秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究

本研究以秋水仙碱为染色体加倍剂,采用液体浸泡法对半枝莲茎尖进行离体诱导.结果表明,以0.2％的秋水仙碱浸泡4h的诱导效果最佳,外植体存活率为15.0％,多倍体诱导率达到50.0％.形态学观测结果表明,与对照植株相比,变异植株形态特征变化明显,植株高度降低,节间变短,叶型发生改变.变异植株的气孔变大,气孔密度降低,保卫细胞中叶绿体数增加.根尖染色体计数结果表明,对照植株的染色体数目为2n=2x=26,变异植株的染色体数目为2n=4x=52.流式细胞仪检测结果表明,获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体.     

ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究

以洋桔梗(Eustoma graniflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121 - ACC合酶反义基因片段(1008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗.再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA0.1 mg/L+ Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6 -BA 0.1 mg/L+ NAA 0.05 mg/L +Km 30 mg/L+ Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性;5个PCR阳性株系经PCR - Southern杂交鉴定得到1株阳性植株.将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24d.