细胞内细菌产生紫外光致癌的假说

不久前给《微生物学》杂志评论栏目投的一份稿件中 ,我们讨论了微生物通过产生紫外光影响邻近细胞生长的可能性 ,有相当多的证据也提示 ,细菌和其他非病毒性微生物可能引发癌症。把这两种可能结合在一起就可形成一个有趣的假说 ,即当细菌在其存在部位产生诱变性紫外光时可能导致一些癌症的发生。过去和现在的大量证据表明 ,可以容易地从人的肿瘤中分离到细菌和其它非病毒性微生物 ,与其说这些微生物是无害的污染物 ,不如说它们可能引发癌症。这些所谓的“癌症微生物”通常缺乏细胞壁 ,表现高度多形性 ,而且明显地存在于癌细胞内。引起胃溃疡…     

侧柏裸根苗和容器苗造林对比试验

选择适宜造林树种和造林方法是提高干旱山区造林成效的主要途径之一。为此 ,1 997年至 1 999年 ,结合太行山绿化工程建设进行了侧柏不同苗木的造林对比试验。现总结如下 :1　试验地概况试验地设在井陉县天长镇核桃园村 ,30 7国道南侧的半阴坡 ,坡度 1 8度 ,基岩为石灰岩 ,土层厚 2 0 cm,属于干旱山区。2　试验材料和方法2 .1　试验材料(1 )侧柏裸根苗 ,1 a生 ,平均苗高 2 5 cm,主根长 3～ 5 cm,侧根 3～ 6条。(2 )侧柏容器苗 ,1 a生 ,平均苗高 35 cm,容器为直径 1 0 cm、高 1 5 cm的塑料袋。2 .2　试验方法本试验设计了裸根苗造林和容器苗造…     

一批乌拉圭奶牛境外预检及分析

受国家质检总局动植司委派,两位预检兽医官赴乌拉圭执行进口奶牛预检任务。该批荷斯坦奶牛来自乌拉圭13个省305个农场,初选奶牛共13 162头。农场检疫共采集血样13 002份,送往乌拉圭国家兽医实验室DILAVE进行疫病检测,检测疫病包括牛白血病(EBL)、牛病毒性腹泻(BVD)、副结核病(PT)、布鲁菌病和口蹄疫(FMD),共检出疫病呈阳性的牛(以下简称阳性牛)2 459头,阳性率18.91%,阳性牛全部淘汰,10 543头牛合格。经过临床检查后共有10 217头奶牛进入乌拉圭畜牧业、农业和渔业部(MGAP)批准的出口活牛隔离场Rubadel SA。隔离场共采集血样10 197份进行检疫,送DILAVE实验室进行EBL、BVD和FMD的检测,检出阳性牛227头,阳性率2.23%,9 970头牛合格。240头"哨兵动物"进行口蹄疫液相阻断ELISA检测合格。隔离期间同时进行了钩端螺旋体病治疗、体内外寄生虫驱除及口蹄疫(A型、O型)、传染性鼻气管炎(IBR)、炭疽(Anthrax)的疫苗注射。监装重点核对奶牛数量、耳号等信息,最终共计9 604头合格奶牛装船启程运往中国。预检兽医官与MGAP官方兽医一起顺利完成了该批进口奶牛产地检疫任务。     

病毒载体研究进展

外源基因进入细胞通常需要“运载工具”。在漫长的自然进化过程中,病毒是以寄生形式存活下来的最小、最简单的生命体,病毒分子生物学的发展为生物工程领域研究拓展了思路,提供了有效的方法和工具。重组病毒栽体又是当今病毒基因工程研究的热点之一,目前以动物病毒为基础设计的基因克隆及表达栽体主要有取代型的重组病毒栽体和重组的病毒一质粒栽体。文章对应用较广泛的病毒栽体做一综述。     

我国近期7株猪瘟流行野毒E2基因变异研究

应用RT PCR 和nPCR 扩增了7 株国内近期(2001 年-2003 年)流行的猪瘟野毒E2 基因,分别克隆至pGEM T 载体并对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列推导,同时将其与C 株、Alfort 株、Brecsia 株进行了同源性比较及遗传进化分析,构建了CS FV的遗传发生树,并对E2 结构与功能进行了分析。所测7株野毒均包括完整的信号肽序列及部分跨膜区在内的1 170 bp,与C株、Alfort株、Brescia 株核苷酸序列同源性分别为91.6%~94.5%、89.2%~92.7%、85.9%~89.3%,氨基酸同源性分别为91.2%~95.8%、88.9%~92.0%、84.0%~90.1%;而7株野毒之间的差异很小,其核苷酸序列同源性为95.8%~99.7%,氨基酸同源性为96.3%~99. 1%。所绘制的遗传发生树分为2个组群,所测得7 株流行野毒均属于第1 群,而且可分为两亚群,与C 株在同一亚群。同时对主要抗原区氨基酸位点变异进行了分析,对其抗原决定簇的变异情况进行了推测。     

犬转移因子对犬淋巴细胞体外增殖的影响

无菌采取犬抗凝血,分离并制备不同浓度外周血单个核细胞(PBMC)悬液。应用正交试验,测定植物血凝素,犊牛血清对不同浓度PBMC增殖的影响。用 MTT法测定不同浓度犬转移因子(TF)对 PBMC 增殖的影响。结果表明,当 PBMC 为 5×109 个/L,植物血凝素为 12. 5 mg/L, 犊牛血清为100 mL/L,PBMC 增殖效果最佳。TF 浓度在0.39 g/L~100 g/L时,对 PBMC转化增殖均有促进作用,在浓度为 1.56 g/L时促淋转效果最佳。且TF单独作用于 PBMC的效应明显优于PHA P的协同作用。TF对 PB MC有良好的刺激增殖效果。     

动物肌肉发育相关印记基因研究进展

就印记基因的发展过程、主要特点及作用机制进行了简要概述,并主要介绍了与肌肉的生长发育密切相关的部分印记基因(DLK1、SNRPN、IGF2和H19),印记基因的作用原理以及对肌肉发育的影响。     

猪流行性腹泻病毒陕西渭南株的遗传变异

从陕西省渭南某规模化猪场采集疑似猪流行性腹泻(PED)仔猪病料进行病毒检测,旨在从基因遗传变异方面分析疾病发生的可能原因。通过RT-PCR从疑似仔猪20份小肠样品中检测到9份PED病毒阳性样品,并扩增出PED病毒M、ORF3和S基因的部分序列。序列分析结果表明,与CV777疫苗株对比,样品渭南(WN)株PEDV M基因高度保守,同源性为98.2%;ORF3基因存在11处碱基突变,同源性为98.2%;S基因突变较大,存在4个插入区域,分别是164~166、177~179、181~186和416~418nt,内分核心中和表位区(COE,499~638位氨基酸)存在9个氨基酸突变位点。遗传分析显示,WN株M基因与中国近期分离毒株亲缘关系较近;ORF3基因与同处在G1群中的中国毒株亲缘关系较近,而与CV777疫苗株亲缘关系较远;S基因与中国早期分离毒株及CV777疫苗株亲缘性较远,与当前的流行株亲缘关系密切。这些结果表明,WN株与CV777疫苗株相比,有明显的遗传变异倾向,可能导致目前PEDV疫苗免疫效果下降,PED疫情大规模流行。     

猪圆环病毒多重PCR检测方法的建立

为建立PCV1和PCV2混合感染快速检测的PCR方法,根据GenBank已发表PCV1和PCV2全基因组序列,设计合成4条引物,通过PCV1和PCV2阳性质粒的构建、反应条件的优化、敏感性试验和特异性试验,建立了PCV多重PCR检测方法,可扩增出PCV1和PCV2长度分别为726 bp和433 bp特异性目的基因片段。结果显示,建立的PCV多重PCR可检测到5×101个拷贝的PCV1和PCV2目的基因,HCV、PRV、PPV核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。并初步应用建立的方法对42份采自四川省部分地区的样品进行检测,结果表明,PCV1阳性率为33.3%,PCV2阳性率为45.2%,其中PCV1和PCV2混合感染阳性率为16.6%。     

副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞的黏附作用及其黏附模型的建立

为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)与原代培养的猪气管黏膜上皮细胞的相互作用,应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,于胶原覆盖的盖玻片上培养,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮细胞,然后以对数生长期不同Hps含量的菌液感染上皮细胞和猪脐静脉血管内皮细胞,分别作用1、2、34、h后,通过革兰氏染色法观察Hps对细胞的黏附情况。结果表明,Hps可黏附在上皮细胞和内皮细胞表面;Hps对气管上皮细胞有毒性作用,致细胞变性坏死和凋亡;Hps对细胞的黏附力与其在菌液中含量和作用时间有关,以菌落形成单位计,当含量为1.0×108mL-1且感染4 h后,黏附效果最好。高倍显微镜下可见大量Hps黏附于猪气管上皮细胞,只有个别Hps黏附于猪血管内皮细胞表面。说明Hps对猪气管黏膜上皮细胞的黏附能力远强于猪血管内皮细胞,可以利用猪气管黏膜上皮细胞建立副猪嗜血杆菌的黏附细胞模型。