马传染性贫血野毒辽宁株前病毒全基因组核苷酸序列测定

采取马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）辽宁野毒株（Ｌ株）感染马的血液,分离白细胞。提取白细胞中的ＤＮＡ,并以此为模板,利用ＰＣＲ技术分四个片段扩增 ＥＩＡＶ前病毒 ＤＮＡ。将其分别克隆到载体质粒 ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中,经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接,得到 ＥＩＡＶ　 Ｌ株前病毒基因组全序列。     

PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性ＰＣＲ方法。通过对纯化后ＩＢＶ核蛋白基因进行直接ＰＣＲ及套式ＰＣＲ扩增表明，两次ＰＣＲ产物的大小为０．７ｋｂ和０．５ｋｂ，与实际设计相符。而对照的ＮＤＶ及ＩＢＤＶ的ＰＣＲ扩增产物均为阴性。用 ＩＢＶ ＨＢ株感染 ＳＰＦ鸡后，应用我们所建立的 ＰＣＲ方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的 ＩＢＶ，在 ＳＰＦ鸡感染 ＩＢＶ后的２１天仍然能够检测到 ＩＢＶ的基因组，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ杂交试验证明了我们获得的 ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。该ＰＣＲ检测方法比免疫荧光抗体（ＦＡ）法更具敏感、特异、快速等特点，完全适用于不同来源及不同血清型ＩＢＶ的检测。     

抗SARS病毒卵黄及血清抗体检测方法的建立

传染性非典型肺炎，世界卫生组织称其为严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome，sARS)，是21世纪新发现的一种人类传染病，具有很强的传染性和聚集性，临床表现为发热、咳嗽、呼吸窘促。SAPS的流行给我国及世界经济带来了巨大的损失，同时也威胁到人民的身体健康和生命安全，危害极其严重，世界各国积极组织力量，在采取综合防治和控制措施的同时，开展了有关病原学、疫苗学、药物及生物制剂等多方面相关的研究。目前，已取得很大的研究进展。     

5匹马外周血单个核细胞表达MHC-I类分子的差异分析

基于RT-PCR方法,扩增了用于马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)减毒疫苗株CTL表位研究的5匹马的编码经典MHC-I类分子的大部分基因,具体包括编码肽结合区大部分区域、α3区、穿膜区及胞浆区蛋白的基因,并进行了PCR产物的克隆和测序。试验马匹外周血单个核细胞(Peripheral blood mono-nuclear cells,PBMC)的总RNA提取物经RT-PCR扩增,并将所得产物进行T-A克隆。从每匹马的所有克隆中,分别随机挑取鉴定为阳性重组质粒的21~23个克隆用于测序分析。研究结果表明,5匹试验马匹各自具有3~5个等位基因,由于MHC-I分子等位基因表达的共显性特征,可以推测马的基因组内可能存在2~3个基因座对应于这些等位基因,这与国外已有研究结论基本一致。另外,不同马匹PBMC表达的MHC-I类分子的差别水平不一致。除了6号与7号和10号马之间MHC-I类分子的差异较大,无相同或高度相近的经典MHC-I类分子序列外,各马匹间均表达具有1个或1个以上的相同或高度同源的对应经典的MHC-I类分子的mRNA。以上研究结果既可作为正在开展的EIAV减毒疫苗株CTL表位研究的基础性、支持性数据,又可进一步丰富国内马的经典MHC-I分子多态性方面的相关研究。     

马传染性贫血病毒转录调控

马传染性贫血病毒转录调控需要细胞因子，病毒蛋白及病毒RNA及DNA顺式作用元件之间复杂的相互作用，这些调控因素正在不断被发现和鉴定，并进一步研究其功能和复杂的相互作用，本文旨在阐述马传染性贫血病毒转录调控过程中涉及的各种调控因素及其相互作用机制，同时对慢病毒系统的各种调控策略进行了简单比较。     

鸡IL—15基因的分子克隆及其有关特性的研究

实验应用聚合酶链式反应技术从鸡脾淋巴细胞中克隆得到了白细胞介素-15基因，序列分析表明与已发表的鸡白细胞介素-15基因完全一致，核苷酸序列和推导的氨基酸序列与牛的最接近，同源性分别为46%和31%，与哺乳动物白细胞介素-15序列类似，有4个高度保守的半胱氨酸残基，同时本研究也用此方法对鸡脾脏、法氏囊、胸腺、哈德氏腺和盲肠扁桃体等淋巴器官的淋巴细胞中鸡白细胞介素-15mRNA的表达进行了研究，结果表明这些器官的淋巴细胞均表达mRNA。在实验还用有丝分裂原ConA对鸡脾淋巴细胞进行活化，观察活化的淋巴细胞表达白细胞介素-15mRNA的情况，结果发现白细胞介素-15mRNA在活化的脾淋巴细胞中表达量升高。     

检测ＮＤＶ特异性ＩgG、IgM、ＩgA的间接ＥＬＩＳＡ方法的建立

本试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）感染的鸡胚尿囊液经差速离心，庶糖密度梯度离心提纯的ＮＤＶ为包被抗原，以纯化的鸡ＩgG、IgM及ＩgA免疫，制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩgG、IgM及ＩgA，分别建立了检测ＤＮＶ特异性ＩgG、IgM、ＩgA的间接ＥＬＩＳＡ方法，抗原最适包被量为１．３４μg/孔。酶标兔抗鸡ＩgG、IgM、ＩgA的最佳稀释度分别为１：４００，１：４００，１：１００，血清样品检测ＩgG时，最适工作浓度为１：４００，检测IgM时为１：５０。该方法具有特异性强、灵敏度快，快速简便等优点，适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测，同时也为城疫免疫要理研究及流行病学调查提供了可靠手段。     

我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株生物学特性的研究

从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒，在9－11日龄SPF鸡胚上连续传代9次，通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变化、病毒在CEF中的增殖特性、凝集鸡红细胞的特性以及动物回归试验等来研究我国鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的生物学特性。结果表明，该毒株的第一代尿囊液对鸡胚无肉眼可见的致病作用，当继代到第5代后，胚体严重病变；电镜观察该病毒为典型的冠状病毒；病毒在鸡胚中随着接种病毒时间的延长，其效价增高，96小时可达到48小时的1倍，该毒株可在CEF上生长，但不能形成明显的蚀斑；并且经1％胰酶处理后可疑集鸡红细胞；鸡胚的第4代尿囊液病毒回归动物体，可致鸡病变病死鸡肾脏病变尤为明显，呈典型的花斑肾，腺胃则未见肉眼可见的病变，接种鸡、同居鸡和对照鸡之间NDV疫苗免疫后其HI抗体水平无明显差异，但从发病症状来看，IBV对ND疫苗具有干扰作用。     

重组马传染性贫血病病毒核心蛋白抗原在AGID和ELISA中应？…

用昆虫杆状病毒青海比试 马传染性贫血病病毒核心蛋白和Ｐ２６蛋白，作为免疫琼脂双扩散和酶联免疫吸附试验抗原。对７６份已知马传贫非特异性血清进行检查，同时与市售ＡＧＩＤ和ＥＬＩＳＡ试剂盒作比较。     

猪萎缩性鼻炎研究进展

猪萎缩性鼻炎 ( AR)又称慢性萎缩性鼻炎或传染性萎缩性鼻炎 ,主要是由支气管败血波氏杆菌( Bb)和产毒素多杀巴氏杆菌 ( T+ Pm)引起猪的一种多发的慢性呼吸道传染病。该病的主要特征为慢性鼻炎、颜面部变形和鼻甲骨萎缩。哺乳仔猪感染本病后 ,除引起鼻甲骨甚至鼻腔变形、萎缩或消失外 ,还可以引起全身钙代谢障碍 ,致使仔猪发育迟缓、饲料利用率降低 ,有时伴发急、慢性支气管炎 ,导致仔猪死亡。T+ Pm和 Bb感染猪后损害呼吸道的正常结构和功能 ,使机体抵抗力降低 ,极易感染其他病原 ,诸如支原体、嗜血杆菌、猪流感病毒、猪生殖 -呼吸道综合…