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表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的质粒扩增出N基因,构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S—FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)之后,采用蓝色表型筛选的方法,筛选到表达N基因的重组病毒,并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因,间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达,本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。 相似文献
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在生物医学研究中对实验动物使用的关注促进了替代方法的发展。一种替代可被定义为(1)采用非动物方法来替代动物模型;(2)减少用于特定目的实验动物的数量;或(3)优化操作程序的任何方法或策略。替代、减少和优化的3Rs原则从上世纪70年代开始引入到生物医学研究中,目前已经成为欧洲乃至全球实验动物法规都共同遵守的原则。免疫制品是由活的生物得到或生产的产品,其活性与抗原抗体的相互作用有关。与动物福利最相关的制品是多抗、单抗和疫苗。提到替代,多数人想到的是毒理学,其实,这些 相似文献
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传染病现在仍是导致动物死亡,使畜牧业遭受损失的主要原因,疫苗免疫可以减少动物发病和死亡,对畜牧业生产的经济意义重大。但现在采用传统方法制备的疫苗在毒力、安全性和效力等方面不是最佳,因此需要开发新型疫苗以及替代免疫途径来 相似文献
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利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株的gB蛋白抗原性,筛选出一段抗原性较强的片段,该片段位于邸蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物,引入双酶切位点EcoR Ⅰ,Sal Ⅰ,将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a(+),得到重组表达质粒pET—tgB并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导后,表达分子量为37ku的融合蛋白His—tgB,表达量占菌体蛋白的40.6%。Westemblot分析表明,His-tgB具有免疫反应性。重组蛋白免疫兔之后可以产生针对ILTVgB的特异性抗体。 相似文献
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智海东 《畜牧兽医科技信息》2011,(9):5-7
对致病性微生物毒力机制以及致病因子与免疫系统相互作用的进一步了解,现已可鉴定出一系列的候选保护性抗原,及用于免疫预防可引起复杂致病机理的病原体。采用鉴定明确的亚单位抗原可诱导特异性免疫应答,并且避免了一些由采用灭活或致弱病原体制备的疫苗所引起的潜在相关危害, 相似文献
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基因免疫指用DNA(质粒或线性的PCR产物)或RNA接种,诱发机体产生对基因编码蛋白的免疫,这是免疫领域最新的进展.基因疫苗可以在很多种类的动物中诱发保护性免疫反应[1].但在实际应用中该疫苗诱发的免疫反应并不强,目前正在致力研究DNA疫苗作用的机理,从而提高基因疫苗的免疫原性,以便更合理地使用这些疫苗.基因疫苗主要是通过主要组织相容性复合体(MHC)分子进行抗原呈递,诱发T细胞反应,机理非常的复杂. 相似文献