鸡毒支原体活疫苗的保存期测定

将鸡毒支原体弱毒冻干疫苗和湿苗分别在不同温度下保存,然后分别在不同时间内测定其活菌数和鸡体内免疫效力测定。活菌数测定结果表明：鸡毒支原体冻干疫苗在－２５℃的条件下保存１１．５个月,活菌数维持不变;在－１５℃保存９．５个月,活菌数下降一个滴度;在４℃～１０℃条件下保存８．５个月,活菌数不变。湿苗（培养物）的室温２４℃保存４ｄ,活苗数不变,保存５ｄ活菌数下降两个滴度;在３２℃保存４８ｈ活菌数不变,保存     

禽源沙门氏茵的血清型鉴定和耐药性研究

为了解我国禽源沙门氏茵血清型的分布情况和耐药情况,选取江西、辽宁和广东3个省的部分养殖场进行用药调查和采样,分离到25株沙门氏茵,进行血清型鉴定和对24种抗菌药物的药物敏感性试验.结果显示,分离株的血清型主要为O1、O2、O9和O12,分离细菌对阿米卡星和头孢曲松均敏感,但对萘啶酸、阿莫西林、氨苄西林、链霉素、四环素、磺胺、复方新诺明和部分氟喹诺酮类药物的耐药率都大于50%.     

鸡新城疫-鸡传染性支气管炎-禽流感三联灭活油乳剂疫苗的研制与免疫试验

用鸡新城疫弱毒株Lasota株、鸡传染性支气管炎病毒弱毒株M-H120和禽流感病毒HB1（H9N2）株做为抗原制成油乳剂灭活苗，并对其进行了物理性状、无菌情况、安全性、灭活效果、保存期和免疫效力等方面的检验。证明所制备疫苗完全符合质量标准，鸡体对该疫苗3种抗原均产生了良好的免疫应答。攻毒试验结果证明，免疫鸡能良好地抵抗同种强毒的攻击，所制备疫苗4C放置保存12个月后其免疫效力没有下降。     

甲磺酸培氟沙星对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡毒支原体病的治疗试验

利用甲磺酸培氟沙星水溶性粉剂对鸡毒支原体分别进行体内外的抑菌治疗试验。体外抑菌试验结果表明：该药物能有效地抑制试管中鸡毒支原体的生长繁殖。体内试验结果表明：当饮水中药物浓度达到１００ｍｇ／Ｌ时,能有效地防止由于鸡毒支原体引起的死亡;当饮水中药物浓度达到５０ｍｇ／Ｌ以上时,能明显地减轻以至部分消除鸡毒支原体强毒引起的气囊损伤;和感染不治疗对照组相比,该药物能提高鸡体增重;用甲磺酸培氟沙星治疗,能抑制感染鸡体内的鸡毒支原体,从而使部分鸡体内检测不到鸡毒支原体抗体。     

动物支原体病预防与控制的研究进展

动物支原体给畜禽造成的危害早在２００多年前就引起了人们的重视,丝状支原体丝状亚种曾引起的牛传染性胸膜肺炎并造成牛群的大量死亡,自此,人们就开始了对动物支原体疾病的研究。从Ｎｏｃａｒｄ和Ｒｏｕｒ等［１］１８９８通过培养基培养成功丝状支原体丝状亚种到今天...     

鸡败血霉形体弱毒F株对鸡的致病性和免疫效力测定

以鸡败血霉形体弱毒Ｆ５和Ｆ３６株的新鲜培养物分别点眼和鼻内接种１日龄鸡雏,比较其对鸡的致病性和免疫原性。结果,在鼻内感染时,Ｆ５可使３０只鸡中的４只出现轻度气囊损伤,而Ｆ３６只使３０只中的１只出现轻度气囊损伤;点眼接种时,Ｆ５和Ｆ３６均不使感染鸡出现气囊损伤;Ｆ５与Ｆ３６接种鸡体内的抗体产生情况无明显区别,在强毒Ｒ株攻击后,２个代次菌株的接种鸡均能产生良好的免疫力,且无明显差异,但在维护体质量增加方面,Ｆ３６株略优于Ｆ５株。     

猪瘟病毒EO基因在CHO细胞中的表达

将EGFPEO融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0.将重组质粒转染CHO(dhfr'),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功.通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达.高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础.     

猪瘟病毒Thiverval株3''非编码区插入片段对病毒拯救的影响

猪瘟病毒(CSFV)疫苗株Thiverval株与亲本病毒Alfort株相比,最明显的区别就是其3'-UTR含有一定长度的插入序列.本研究通过反向遗传学操作,构建了3'-UTR含有19 nt、32 nt以及插入片段完全缺失的CSFVThiverval株全长cDNA感染性克隆,将突变病毒基因组进行体外转录,利用BHK-21细胞转染、PK-15细胞传代增殖的方式成功的从3种重组突变感染性克隆中拯救出活病毒粒子,表明CSFV疫苗株3'-UTR插入片段并不影响病毒的拯救.通过3'-UTR二级结构模拟,发现疫苗株的插入片段导致3'-UTR空间构型发生改变、自由能升高、影响二级结构的稳定性,可能是导致疫苗株毒力减弱的原因之一.     

猪链球菌2型的鉴定及其毒力因子检测

猪链球菌的感染不仅对养猪业造成巨大的损失,同时对公共卫生尤其是相关从业人员的生命造成威胁,严重感染引起死亡.根据参考文献,设计了1对猪链球菌2型特异性引物.对四川分离的7株链球菌、江苏分离的1株、北京分离的6株和菌种中心保存的5株C群马链球菌兽疫亚种、1株D群链球菌、4株R型链球菌、2株S群链球菌和E、F、G、K、L、M、N、O、P群链球菌各1株进行了检测.结果7株四川分离株均为2型;1株江苏分离株为2型;6株北京分离株有3株为2型;1株R群、2株s群链球菌为2型猪链球菌.对检测出的14株猪链球菌2型的毒力因子做进一步检测.MRP基因检出率为92.9%(13/14);EF基因检出率为100%(14/14);sly基因检出率为71.4%(10/14);Cps2A基因检出率为92.9%(13/14);gapdh基因检出率为64.3%(9/14);FBPS基因检出率为92.9%(13/14);orf2基因检出率为71.4%(10/14).毒力因子全为阳性的菌株有6株,MRP-EF+菌株有2株.本研究从259份健康猪扁桃体中分离到16株2型猪链球菌,健康猪带菌率为6.2%(16/259).16株猪链球菌2型中,MRP、EF、Cps2A全为阴性,只从1株2型猪链球菌中检测到了sly基因(1/16);gapdh基因检出率为56.25%(9/16);FBPS基因检出率为75.0%(12/16);Orf2基因检出率为37.5%(6/16).     

猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救

采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18-T载体并测序.经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5'和3'末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T1-7.利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T1-7体外转录成基因组RNA,再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK-15细胞.通过传代、RT-PCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定,表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子.猪瘟病毒低温诱变疫苗"Thiverval"株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救,为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具.