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《畜牧与兽医》2014,(9):11-14
为建立稳定的奶牛乳腺上皮细胞系(BMEC),进一步研究乳腺上皮细胞体外蛋白的分泌情况,本试验首先采用组织块贴壁法获得奶牛乳腺上皮细胞,用胰蛋白酶纯化细胞,并运用SDS-PAGE进行鉴定。采用MTT分析细胞活力,瑞氏-吉姆萨染色法对细胞核进行分析,并测定细胞上清液中β-酪蛋白(β-CN)含量。结果显示:本试验成功培养出较纯化的奶牛乳腺上皮细胞;细胞生长曲线呈明显"S"型,用瑞氏-吉姆萨法染色细胞,细胞核形态多为卵圆形且呈现明显蓝紫色。原代乳腺上皮细胞可连续多次传代且未出现永生化,细胞呈单层贴壁生长,证明细胞活力良好;测定其β-CN含量为3.3 mg/L。 相似文献
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基于α_s-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果。首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25~600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%~105.2%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2 g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P0.05),更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。 相似文献
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酪蛋白胶束粉的陶瓷膜分离生产工艺 总被引:1,自引:1,他引:0
为尽快建立酪蛋白胶束粉(micellar casein concentrate, MCC)的中试生产线,实现MCC在国内的工业化生产,该研究通过测定牛乳蛋白粒径,选取孔径40和100 nm的中空纤维陶瓷膜进行膜分离效果的对比,并选用膜分离效果较佳的陶瓷膜进行最佳操作参数的确定及稀释过滤工艺的研究,最后将自制MCC和进口MCC进行品质特性对比并分析其工业化生产的可能性.结果表明:孔径40 nm中空纤维陶瓷膜与孔径100 nm中空纤维陶瓷膜相比,渗透液中不含酪蛋白,能够减少酪蛋白损失,更适合于酪蛋白和乳清蛋白的分离,孔径40nm中空纤维陶瓷膜的最佳操作参数为操作压力2×105 Pa,料液温度50℃;采用四段式的连续稀释过滤工艺,可使料液中酪蛋白占真蛋白的比例从69.39%提升至93.34%,真蛋白占干物质的比例从38.45%提升至88.15%;稀释过滤完毕后膜的纯水通量衰减了39.98%,经生物酶清洗液清洗后膜的纯水通量恢复至初始的98.02%;自制MCC在成分组成上与加拿大Proteinco公司生产的MCC相比差异不显著(p<0.05),但在溶解度和粉粒的微观形态上优于Proteinco MCC;生产1 kg MCC需要原料乳46.24 L,成本为244.58元,可实现其国内工业化生产.研究结果为实现MCC在国内工业化生产及其应用性研究提供参考. 相似文献
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酪蛋白磷酸肽(CPPs)是从牛奶的酪蛋白中提取的一种生物活性肽,在中性和偏碱性环境下可 提高Ca的溶解度和Ca溶液的稳定性,从而促进肠道对Ca的吸收,酪蛋白磷酸肽还可有效促进Zn、Fe等其他 矿物元素的吸收。本文就国内外对酪蛋白磷酸肽的促吸收机理的研究作一综述。 相似文献
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新型功能性饲料添加剂——酪蛋白磷酸肽 总被引:1,自引:0,他引:1
由于分离技术和结构鉴定等研究方法的发展,研究者从牛奶蛋白质中分离提取出大量的小分子生物活性肽。研究表明这些生物活性肽有着重要的生理功能,具有潜在的开发应用前景,极受人们瞩目。酪蛋白磷酸肽(CaseinPhosphopeptides,简写为CPPs)就是其中的一种。它是一种由牛乳酪蛋白经蛋白酶酶解作用而得到的含有成簇磷酸丝氨酰基的多肽。在上世纪五六十年代CPPs被英国科学家发现,我国上世纪九十年代初开始研究。研究证明CPPs在促进钙、铁、锌离子的吸收和利用方面具有特效。另外,对动物免疫和繁殖等方面也有着重要的作用。本文将就CPPs的来… 相似文献
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尿素-SDS-PAGE显示干酪成熟过程中酪蛋白降解生成的小分子多肽 总被引:3,自引:0,他引:3
本文采用尿素-SDS-PAGE对多肽标准品MarkerI(2512-16949)的分子量进行了测定,并对干酪成熟过程中酪蛋白降解生成的小分子多肽进行了分析。结果表明,采用16%T,6C物分离胶,6%T,3%C的浓缩胶,6 mol/L的尿素分析系统能清楚地显示分子量为2512-16949的小分子多肽,多肽标准品的直线回归系数R^2=0.9948,样品在固定,染色和脱以过程中不易扩散丢失,不需特殊染色方法,该法是显示小分子多肽物质的简单,快速,有效的方法。对成熟30天的霉菌干酪样品进行分析结果表明,样品中的酪蛋白降解后生成了大量的小分子多肽物质(分子量<100000Da). 相似文献
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