基于α_s-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立

本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果。首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25~600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%~105.2%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2 g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P0.05),更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。     

响应面法优化芥菜芽苗富集异硫氰酸酯发芽条件

[目的]优化芥菜芽苗发芽条件以富集异硫氰酸盐含量。[方法]以芥菜为试材,通过单因素试验和响应面试验研究发芽时间、光照时间和发芽温度对芥菜中异硫氰酸酯含量的影响并对其进行优化。[结果]建立的回归模型显著,可用于预测异硫氰酸酯富集培养条件,各因素对芥菜中异硫氰酸酯含量影响为发芽时间光照时间发芽温度,经模型预测并验证得到芥菜发芽富集异硫氰酸酯的最佳条件为发芽时间4.8 d、光照时间17.4 h、发芽温度30.7℃,在该条件下芥菜中异硫氰酸酯含量可达(721.9±8.9)mg/kg。[结论]该研究结果为芥菜芽苗类功能食品的开发利用提供了参考。     

大肠杆菌ERIC-PCR分子分型方法的建立及其初步应用

为建立高效、敏感的肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)的分子分型方法,该研究提取大肠杆菌基因组DNA,以此为模板建立和优化ERIC-PCR分型体系,并采用ERIC-PCR方法对62株大肠杆菌进行分子分型和遗传相似性统计分析。结果显示从提取的大肠杆菌基因组中能够扩增到2~8条DNA片段,且大部分片段在100 bp至2 000 bp之间。通过4因素3水平正交试验,建立了较为稳定的ERIC-PCR分型方法。利用ERIC-PCR方法可将62株菌分为20型,其中以A型为优势菌群。遗传相似性结果表明,各菌株之间遗传相似性有较大的变化,但部分菌株高度同源。聚类分析表明,ERIC-PCR的分辨率系数为0.937,具有较高的分辨能力。表明应用ERIC-PCR分型技术在分子水平上对大肠杆菌进行鉴别和分型,具有简便和分辨力高等优点,能够对病原进行溯源分析,在大肠杆菌的分子流行病学研究中具有广泛的应用前景。     

副溶血弧菌在玻璃器皿上的粘附及去除

[目的]研究副溶血性弧菌在玻璃器皿上的粘附及去除技术.[方法]以栽玻片模拟厨房中的玻璃类和陶瓷类厨具,选用酒精、醋酸及乳酸链球菌素作为抑菌剂对人工污染粘附到载玻片上的副溶血性弧菌进行处理,通过观察副溶血性弧菌在栽玻片上的存活数和去除率考察3种抑菌剂及其协同抑菌作用.[结果]载玻片上粘附的副溶血性弧菌的活菌数经生理盐水和不同浓度的酒精、醋酸和乳酸菌链球菌素作用后均有一定程度的降低,抑菌剂组残留的活菌数（残留率）明显低于生理盐水对照组,各抑菌组的抑菌能力均随着抑菌剂浓度的增加而增强.协同抑菌试验结果表明,pH 4.0、35％酒精、1.0 g,/L乳酸链球菌素的组合能有效抑制副溶血性弧菌在玻片上的粘附,具有良好的协同效应.[结论]副溶血性弧菌在玻璃器皿上有一定的粘附力,但酒精、醋酸和乳酸菌链球菌素具有较好的除菌效果.     

云南传统乳产品中乳酸菌的菌群分析

对采集于云南传统乳制品中乳酸菌的种类及优势菌群的分布情况进行了研究.从采集的8份样品中共分离获得73株乳酸菌,分属于5个属的13个种.对乳酸菌优势菌群分析,发现肠球菌、乳球菌和同型发酵乳杆菌为主要菌群,分别占乳酸菌总数的20%、27%和20%.     

乳酸菌对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

将前期体外筛选获得的具有良好抗氧化功能的鼠李糖乳杆菌LVg、嗜热链球菌grx02、屎肠球菌ST1、婴儿双歧杆菌BF以及普通菌株鼠李糖乳杆菌C8M（普通对照）进行急性酒精性肝损伤小鼠试验,各乳酸菌组按每千克体重胃管灌服含乳酸菌数为10^8、10^7、10^6cfu.mL^-1的脱脂乳发酵液10 mL,连续15 d,第15天时与模型组同时按每千克体重灌服50%酒精12 mL,对照组灌等量蒸馏水,禁食12 h后处死,检测血清中谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）及肝匀浆中丙二醛（MDA）、还原性谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、乙醇脱氢酶（ADH）水平,观察肝脏病理学变化。结果表明：与模型组比较,乳酸菌组ALT、AST、MDA水平显著降低,ALB、TP、GSH、SOD、ADH水平显著升高。4株优选乳酸菌保肝效果明显优于对照组,且grx02组总体效果最佳,某些指标（MDA、SOD）上保护效果虽与空白组无显著差异,但优于药物组。     

抑制剂与硬化剂对水煮莲藕褐变及品质的影响

以非含硫褐变抑制剂柠檬酸、抗坏血酸、乙二胺四乙酸(EDTA)和六偏磷酸钠处理水煮莲藕,探讨其对莲藕褐变及品质的影响。结果表明:各抑制剂最佳浓度及抑制作用由大到小顺序为0.25?TA、0.5%柠檬酸、0.2%抗坏血酸、0.5%六偏磷酸钠;抑制剂组合以0.5%柠檬酸 0.1%抗坏血酸 0.2?TA效果为最佳,配合0.1%氯化钙硬化剂保脆和75~80℃杀菌20 min,水煮莲藕的品质较好。