全文获取类型
收费全文 | 1308篇 |
免费 | 40篇 |
国内免费 | 82篇 |
专业分类
林业 | 16篇 |
农学 | 48篇 |
基础科学 | 2篇 |
32篇 | |
综合类 | 446篇 |
农作物 | 49篇 |
水产渔业 | 49篇 |
畜牧兽医 | 702篇 |
园艺 | 23篇 |
植物保护 | 63篇 |
出版年
2024年 | 6篇 |
2023年 | 14篇 |
2022年 | 35篇 |
2021年 | 34篇 |
2020年 | 24篇 |
2019年 | 37篇 |
2018年 | 7篇 |
2017年 | 36篇 |
2016年 | 30篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 47篇 |
2013年 | 53篇 |
2012年 | 63篇 |
2011年 | 93篇 |
2010年 | 65篇 |
2009年 | 94篇 |
2008年 | 86篇 |
2007年 | 87篇 |
2006年 | 81篇 |
2005年 | 78篇 |
2004年 | 52篇 |
2003年 | 47篇 |
2002年 | 33篇 |
2001年 | 35篇 |
2000年 | 35篇 |
1999年 | 36篇 |
1998年 | 32篇 |
1997年 | 35篇 |
1996年 | 41篇 |
1995年 | 33篇 |
1994年 | 22篇 |
1993年 | 22篇 |
1992年 | 7篇 |
1991年 | 7篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 1篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有1430条查询结果,搜索用时 16 毫秒
21.
22.
流感病毒核酸检测方法研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
流感病毒可以引起人和动物高度接触性传染性疾病,对公共卫生和畜禽养殖业均造成极大的威胁.因此,准确而又快速的诊断方法对流感的防控起着非常重要的作用.近年来,流感病毒的核酸诊断技术发展较快,主要有RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、基因芯片、逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)等.论文对这些诊断技术的基本原理和应用现... 相似文献
24.
本研究基于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。 相似文献
25.
根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ)ZJ-Ⅴ株基因组序列(GenBank登录号:EF382778),设计了一对扩增RNA聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的特异性引物,以ZJ-Ⅴ株基因组为模板,扩增DHV-Ⅰ的RdRp基因。运用DNAStar软件对ZJ-Ⅴ株病毒与GenBank上已发表的其他不同DHV毒株的RdRp基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,结果表明,ZJ-Ⅴ株与A型DHV-ⅠR85952株(DQ226541)的同源性为97.1%,亲缘关系最近,与2株台湾新型(B型)DHV之间为76.9%和77.0%,与C-GY株和4株韩国新型(C型)DHV株之间为76.2%~76.5%,亲缘关系较远。将RdRp基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),获得重组表达质粒pET-RdRp,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示RdRp蛋白分子量约为65 kDa,Western blot检测证明RdRp蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的免疫学活性。本文为进一步研究DHV-Ⅰ的复制机理奠定了基础。 相似文献
26.
27.
28.
柿属植物ISSR分析技术的建立 总被引:15,自引:0,他引:15
以部分柿属(Diospyros)植物为材料,对ISSR-PCR反应体系腗g2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶浓度,退火温度及扩增循环次数进行了探讨,确立了适合柿属植物ISSR分析技术体系在25 μL反应体系中,含1× Buffer,Mg2+2.0或2.5 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.6 μmol/L,Taq DNA聚合酶1U,甲酰胺2%,模板DNA 2.4 ng/μL;PCR扩增程序94℃变性3 min;94℃ 30 s,(Tm+2)℃(根据引物不同设定)45 s,72℃1.5 min,35个循环;72℃延伸7 min;2%琼脂糖电泳分离PCR产物.结果为柿属植物遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持. 相似文献
29.
痘病毒感染的物种已经超过230个,这种感染的普遍性给人们提出了一个问题:痘病毒的感染是如何在世界范围内传播的?Gyuranecz等在近期出版的《Journal of Virology》发表了相关论文:利用DNA聚合酶基因,结合4b核心蛋白基因区序列,通过对111个鸟痘病毒自然感染病例的分析获得了痘病毒更加完善的遗传发育框架。这为鸟痘病毒基因提供了一个更加宽泛和完善的遗传分析、测序及分类的方法。 相似文献
30.
应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测牛结核病 总被引:2,自引:0,他引:2
本试验应用聚合酶链式反应(PCR)技术原理,研究建立了牛结核病PCR检测方法。试验结果表明:该方法的敏感性测定模板浓度为30.4pg,特异性测定牛结核分枝杆菌在478bp出现特异扩增带。通过对298头份牛奶和229份牛全血样本进行检测,检出阳性牛奶样本33份,阳性全血样本43份;鲜牛奶样本同时还用罗氏培养后采取PCR方法进行检测,检出阳性样本34份;全血样本同时还用PPD进行皮内试验,检出阳性样本52份。试验表明:牛结核病PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、快速等优点,为牛结核病的早期诊断提供了科学依据。 相似文献