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猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法。同时对37份现地病料进行检测并与常规RT-PCR方法、TGEV抗原快速检测试剂盒比较。结果,该方法的检测敏感性达到15.3拷贝/μL,且具有很好的特异性和重复性,而常规RT-PCR方法只能检测到1.53×103拷贝/μL。对37份现地病料的检测结果也表明该法(检出17份)比常规RT-PCR方法(检出12份)和TGEV抗原快速检测试剂盒(免疫层析法,检出10份)的敏感性高。 相似文献
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为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。 相似文献
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随着人们生活水平的不断提高以及宠物热的兴起,许多家庭都会挑选一种自己喜爱的宠物来进行饲养.例如:犬、猫、鸟、乌龟、蜥蜴等等,人们在饲养的同时已不仅仅把它们当作玩物,而是家庭的重要成员之一. 相似文献
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猪传染性胃肠炎(TGE)细胞灭活苗的主、被动免疫试验的保护率为93.55%及76.34%,猪流行性腹泻细胞灭活苗的主、被动免疫试验的保护率为88.89%及90.7%。在此基础上,进行了TGE、PED二联氢氧化铝灭活苗的研究。灭活前细胞毒毒价均为10~(7.0)-10~(7.5)TCID_50/0.3ml,主动免疫保护率:TGE100%、PED92%。被动免疫保护率:TCE87.9%、PED82.4%。免疫期6个月。疫苗保存期一年。田间试验保护率为92~96.35%。 相似文献
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