首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   93篇
  免费   1篇
  国内免费   6篇
农学   1篇
基础科学   2篇
  1篇
综合类   16篇
水产渔业   2篇
畜牧兽医   76篇
园艺   2篇
  2023年   3篇
  2022年   1篇
  2021年   3篇
  2020年   1篇
  2019年   1篇
  2018年   4篇
  2017年   1篇
  2016年   2篇
  2015年   4篇
  2014年   6篇
  2013年   5篇
  2012年   7篇
  2011年   7篇
  2010年   3篇
  2009年   9篇
  2008年   7篇
  2007年   10篇
  2006年   5篇
  2005年   2篇
  2004年   1篇
  2002年   6篇
  2001年   1篇
  2000年   3篇
  1998年   2篇
  1995年   1篇
  1994年   1篇
  1993年   4篇
排序方式: 共有100条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品,以其为模板建立一种SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示,所建立方法在3.31×101~3.31×107拷贝·μL-1模板量时,呈良好的线性关系,相关系数(R2)为0.997,斜率为-3.318。该方法特异性检测SADS-CoV;而猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测结果均为阴性。所构建的标准品检测灵敏度下限可以达到3.31×101拷贝·μL-1,组内和组间变异系数均小于1%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。用该方法检测SADS-CoV感染IPI-2I和IPEC-J2细胞后不同时间点和不同接毒剂量的复制情况,结果显示,SADS-CoV感染细胞后2 h病毒含量较低,在12~36 h病毒含量迅速增长,36 h后增长速度减缓且病毒含量维持在较高水平。分别用0、0.1、1 MOI SADS-CoV感染细胞结果显示病毒的mRAN转录水平呈现剂量依赖性增加,当MOI为1时,IPI-2I和IPEC-J2细胞病毒含量分别为106.7、105.3拷贝·mL-1。进一步利用所建立的方法对经口服攻毒SADS-CoV仔猪的临床样本进行检测,结果发现病毒在空肠回肠含量较高,表明病毒主要定殖于空肠和回肠。综上表明,本研究建立SYBR Green荧光定量PCR检测方法能灵敏特异地检测SADS-CoV,为SADS-CoV的诊断和病毒相关基础研究提供可靠的检测手段。  相似文献   
2.
针对培养高素质应用型电气专业人才的实践能力、科技创新能力和团队协作能力的要求,对电气工程及自动化专业的生产实习开展校内外联合生产实习的研究与实践。积极开展校内与校外实习相结合,生产实习与综合实验相结合,生产实习与毕业设计相结合的实习模式的探索,进行了生产实习教学方法和考核方式的改革,形成具有一定特色的生产实习教学模式,取得了很好的教学效果。  相似文献   
3.
草料是草食家畜最主要最优良的“粮食”,也是草食家畜最经济的植物性营养蛋白来源,合理地种植牧草不仅能为草食家畜提供优质草料,提高经济效益,还能改善土地质量,绿化美化生态环境。本文通过系统论述发展草地生态畜牧业的意义、玉溪镇发展种草养畜的优势及存在的问题及措施,以期为玉溪镇发展种草养畜提供参考,从而保证玉溪镇草地生态畜牧业持续健康发展,增加农民收入。  相似文献   
4.
5.
为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BALB/c小鼠;以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb.MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为к链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1:3000和1:2×105.Western blot试验表明该MAb能够识别重组及天然的PEDV M蛋白.间接免疫荧光试验表明该MAb能够与PEDV感染的Vero E6细胞产生特异性免疫荧光.  相似文献   
6.
校园绿地小气候是城市生态环境效益评价的重要内容之一,是广大师生员工学习、工作和生活娱乐的重要场所。为了探明校园不同绿地类型的小气候特征及其对人体舒适度的影响,在广西大学校园内选择密林(A)、疏林(B)和草坪(C)3种植被类型分别建立固定样地,对主要气象要素进行同步观测研究。结果表明:(1)A、B和C日平均太阳辐射能依次为11.7w/m2、39.5 w/m2和177.3 w/m2,其中密林内仅占草坪的6.6%。(2)A、B和C日平均气温依次为24.9℃、25.2℃和25.6℃,其中密林内比草坪低0.7℃。(3)A、B和C日平均地面温度依次为23.8℃、25.2℃和27.9℃,其中密林内比草坪低4.1℃。(4)A、B和C日平均相对湿度依次为91%、89%和88%,其中密林内比草坪高3%(RH)。(5)A、B和C日平均温湿指数依次为24.4、24.5和24.8,其中密林内比草坪低0.4。研究结果初步说明,校园内密林型在白天对太阳辐射的削减、降温、增湿以及对人体舒适作用明显。  相似文献   
7.
为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经3次亚克隆后制备了1株稳定分泌抗NSP8蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。分泌的单克隆抗体亚类鉴定其重链为IgG1型,轻链为κ链;杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶3 200。Western blotting试验结果表明该单克隆抗体能识别原核及真核表达的NSP8重组蛋白。利用截短表达的方法对NSP8蛋白进行抗原表位的鉴定,初步确定了单克隆抗体针对的抗原表位序列为31SPQILKQLTKAFNIAKSDFEREASV55。本研究制备的单克隆抗体及对抗原表位的鉴定,为TGEV NSP8蛋白相关功能的研究奠定了基础。  相似文献   
8.
正一、猪病毒性腹泻的概况我国至少存在四种主要病毒性腹泻(剧烈腹泻)病原,还有至少其他五种潜在病原(致病性弱或不确定)。腹泻病原感染情况各个猪场不尽相同,混合感染非常严重。猪流行性腹泻为主要病原之一,发生腹泻的猪场阳性率超过80%。新的德尔塔冠状病毒在我国存在。猪病毒性腹泻的临床特点主要是呕吐,水样腹泻,脱水,哺乳仔猪的高死亡率,无体温升高,濒死期体温降低,所有日龄猪只均可感染,日龄增加,死亡率下降。此病  相似文献   
9.
为确定猪捷申病毒(PTV)Swine/CH/IMH/03株的易感细胞系及其致病性,本实验将该病毒接种不同细胞,通过细胞病变、电子显微镜观察和PCR技术进行鉴定。并进一步将该病毒回归本动物鉴定其致病性。试验结果表明,PTV Swine/CH/IMH/03对IB-RS-2和PK-15细胞系敏感,能够在IB-RS-2和PK-15细胞系中增殖。致病性试验结果显示,Swine/CH/IMH/03分离株能够导致实验猪出现神经症状,剖检可见脑、肾、脾、肠道发生出血,病理组织学检查可见脑实质内胶质细胞浸润、肾脏间质小血管淤血、脾淋巴细胞减少、小肠伴有出血及淋巴细胞浸润等病理变化,对仔猪具有强致病性。  相似文献   
10.
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号