A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRVJS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约1.3 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1 320 bp全基因序列;将其ORF与国内外9株PRV VP6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较,核苷酸同源性在77.1%~91.1%之间,氨基酸的同源性在89.7%~99.5%之间;在氨基酸系统发育进化树中,JS毒株与A131、OSU、CN86毒株亲缘关系较近,为一个进化群。     

轮状病毒的免疫研究

轮状病毒(Ro-tavirus,RV)属呼肠孤病毒科的成员,是引起婴幼儿和多种幼龄动物急性腹泻的非菌性腹泻的主要病原体。1973年Bishop等在澳大利亚从腹泻患儿十二指肠粘膜及粪便中发现了一种新的病毒粒子。不论在发展中国家或是发达国家,因严重腹泻住院的3岁以下病儿中有20%～70%是轮状病毒感染性腹泻,平均为33%。世界卫生组织报告,每年有70万或者说每天有2000婴幼儿死于轮状病毒腹泻,其中发展中国家占全部腹泻死亡数的25%。Woode等在1974年首次从猪分离出轮状病毒,我国阙玲玲1982年首先在台湾发现猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PRV),以后江苏…     

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联疫苗及其应用

我所研制成的猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED)二联灭活苗及二联活疫苗，是预防由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的仔猎呕吐，水样腹泻及新生仔猪高死亡率(可达100％)的高度传染性肠道病发病的有效措施。用于妊娠母猪的被动免疫以保护仔猪，也用于主动免疫保护不同年龄的猪只。     

基于相场法的液态食品冷冻浓缩冰晶生长数值模拟

旨在建立冷冻浓缩过程冰晶生长的数理模型,用以微观上分析冰晶夹带造成液态食品中溶质损失的问题。探讨结晶时间对冰晶形貌的影响。采用国内外描述相变微观结构的相场模型,将液态食品体系视为水和溶质二元结构,模拟冰晶生长的演变过程。研究等温结晶情况下,计算时间对冰晶生长形貌的影响及其对冰晶内部溶质浓度分布的影响。模拟结果表明,随着时间的延长,冰晶形貌逐渐变大,主干变细,二次分枝乃至三次分枝更加发达;同时,冰晶所包含的溶质浓度越大,各区域的溶质浓度分布也随之改变。由于溶质再分配,冰晶溶质分布曲线存在着波峰与波谷,波峰对应着来不及扩散溶质的冰晶尖端,波谷对应着冰晶固相。结果启示,在等温情况适当控制结晶时间将有效控制冷冻浓缩过程冰晶的形貌演化,降低液态食品冷冻浓缩过程的溶质损失。为进一步研究各种因素对冰晶生长的影响提供理论依据,从而为改进冷冻浓缩工艺、推进其工业化提供技术支持。     

ST细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

为了筛选与猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）结构蛋白VP2相互作用的宿主蛋白,深入研究病毒入侵及致病的分子机制,本试验建立了ST细胞酵母双杂交cDNA文库。采用RNeasy Min Kit提取ST细胞的总RNA,反转录合成cDNA第一链之后,通过SMART技术合成了双链cDNA,并利用同源重组的方法,构建了ST细胞的酵母cDNA文库。结果显示,文库滴度为8.1×10⁸ CFU/mL,插入的双链cDNA片段大小为250~1 000 bp,平均大小约为500 bp,文库的重组率为96%。此文库可用于筛选与病毒相互作用的ST细胞宿主蛋白,为进一步阐明病毒的致病机制奠定了基础。     

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金实施成效

自2006年国家设立"中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金"(以下简称基本科研业务费专项)以来,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所积极开展前瞻性、储备性和基础性研究,努力建立稳定持续、科学管理的专项运行机制,有力促进了该所科学管理水平,培育了一批中青年科研骨干和创新团队,取得了显著的科研成果,为该所科研事业的长远和良性发展创造了条件。     

反向遗传操作研究进展

反向遗传操作(又称感染性克隆)为在DNA水平上研究RNA病毒的基因组结构及功能和病毒宿主相互作用提供了重要手段。文章综述了反向遗传操作的研究策略,包括全长克隆的获得、体外转录和病毒的挽救,概括了反向遗传操作在病毒分子生物学研究、疫苗的研制、基因治疗和重组载体中的应用,分析了当前反向遗传操作研究中存在的问题。     

猪病毒性腹泻有效防控——生猪产业无法回避的现实问题

猪病毒性腹泻带给生猪产业的危害是巨大的,也是生猪产业健康发展难以逾越的一道屏障。由于引起猪病毒性腹泻疫病的病原复杂,从而导致在实际防控中出现种种困惑。近年来又有新的冠状病毒出现,病毒变异是无法回避的现实,疫苗其保护性还有待提高,对猪病毒性腹泻的认知和防控还需要普及,各种因素导致的猪病毒性腹泻有效防控还面临各种挑战,因此猪病毒性腹泻防控依然任重而道远,但是随着对猪病毒性腹泻的行业认知深入、科研投入与产出的增加,尤其是企业主动参与疫病的防控,从防控理念到防控手段,都逐步向科学、规范、有效的目标迈进,使得猪病毒性腹泻得到有效防控,相信在政产学研用的共同努力下,随着新理念、新技术、新产品的不断推广,猪病毒性腹泻不再成为制约养猪业发展的重要问题,我国的生猪产业也会实现从产业大国到产业强国的转变。     

超声波引发合成阳离子聚丙烯酰胺及其表征

在超声波和VA-044引发体系下，丙烯酰胺（AM）单体和丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵（DAC）阳离子单体通过共聚合成阳离子聚丙烯酰胺P（AM-DAC），该方法具有反应时间短、合成效率高等优点。研究了合成过程中的关键因素对P（AM-DAC）特性粘度的影响规律，并对其合成条件进行优化。实验结果表明： 当AM∶DAC=3∶2、引发剂浓度为0.02%、超声20 min、反应体系pH值为4时，合成的P（AM-DAC）特性粘度最大。红外光谱表征结果表明，P（AM-DAC）是AM与DAC的共聚物，具有-NH₂、C=O、-CH₂-N⁺和-OH等活性基团。P（AM-DAC）在30~200 ℃范围内具有良好稳定性。     

猪肠道组织RIG-I的表达及其在猪传染性胃肠炎病毒致病机制中作用的初步研究

为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况，评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白，将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体，采用间接ELISA检测抗体效价。结果显示获得了效价可达1∶64 000的兔RIG-I多克隆抗体。利用该抗体经western blot检测SPF猪各肠道组织中RIG-I的表达。结果显示，制备的多克隆抗体可与猪各肠道中的RIG-I反应，且RIG-I在SPF猪空肠中的表达量最高。利用该抗体经western blot检测TGEV感染的ST细胞及猪空肠中RIG-I的表达水平。结果显示，TGEV感染后ST细胞中RIG-I的表达水平极显著高于空白对照细胞(P<0.01)；与正常SPF猪空肠相比，TGEV感染的SPF猪空肠组织中RIG-I蛋白的表达水平明显提高。表明TGEV感染后能够刺激细胞内源性及感染猪肠道组织中RIG-I蛋白的表达水平。将本研究构建的重组质粒p CAGGS-RIG-I-flag和RIG-I干扰RNA (siRIG-I)分...