猪传染性胃肠炎转基因疫苗的研究进展

猪传染性胃肠炎(Swine Transmissible gastroenteritis,TGE)是由冠状病毒科冠状病毒属中的成员猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritisvirus,TGEV)引起的高度传染性肠道疾病,临床症状表现为猪呕吐、腹泻、脱水等特征,各年龄段的猪均可发病,而对1周龄内仔猪的危害特别大,死亡率高达100%[10].目前该病尚无有效的治疗药物,通过注射疫苗的方式来对该病进行预防是最有效的手段.……     

我国猪主要腹泻性疾病的现状与综合防制概况

目前,我国养猪业已从家庭户养和分散饲养发展到今天的集约化饲养.集约化养猪场与传统的饲养方式相比具有规模大、数量多、密度高、生产工艺先进等特点.通过党的改革开放政策的不断深入,我国养猪业取得了长足的发展,据不完全统计,除西藏外全国30个省,2001年1月到6月我国生猪的饲养头数达到4.46亿头.但是各种疾病特别是猪的腹泻病也越来越严重地制约着养猪业的进一步发展,它可以造成仔猪的死亡,成猪的掉膘,饲料报酬的降低,增加人工费和药费的开支等危害.根据发病原因,猪的腹泻病主要包括病毒性的、细菌性的、寄生虫性及营养性代谢因素引起的腹泻.现就集约化猪场上述几种常见的腹泻疾病发生的特点及防制对策进行概述.……     

我国猪主要腹泻性疾病的现状与综合防制概况

(接第六期) 　　1.3猪寄生虫性腹泻 　　1.3.1猪兰氏类圆线虫寄生于小肠,为世界性分布的杆状线虫.在温热带地区流行更为严重,是哺乳仔猪的重要寄生虫.它是只有孤雌生殖的雌虫寄生.成虫小,长3.3～4.5mm,其感染途径:通过皮肤钻入,经口和初乳及胎盘感染.临床上常见腹泻和进行性脱水.严重感染时,10～14日龄前的仔猪可发生死亡,但更常见症状为生长停滞和发育不良,无特征性病变.通过粪便检查虫卵,或解剖时在小肠内发现成虫,并具有腹泻和生长发育不良的病史,即可确诊.……     

猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

以纯化的重组PEDVN蛋白为抗原免疫7周龄雌性BALB／c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了7株稳定分泌抗重组N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为9C1、7H8、3C10、6C4、10G9、2C10和483。7株杂交瘤细胞诱导小鼠产生的腹水抗体效价分别为1：3200、1：3200、1：6400、1：12800、1：25600、1：6400和1：12800。9C1、7H8、3C10、6C4、10G9和2C10免疫球蛋白类型均为IgM,轻链均为K链;483免疫球蛋白类型为IgG2a,轻链为K链。Westernblot试验结果显示,这7株单克隆抗体均能与天然的PEDVN蛋白发生反应。     

猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验

采用在病毒培养液中加５～１０μｇ／ｍｌ胰酶的培养方法，将猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）ＣＶ＿（７７７）适应于Ｖｅｒｏ细胞，并传４５代．细胞病变规律．经免疫荧光检查阳性，电镜观察可见典型冠状病毒粒子，猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）免疾荧光检查阴性，猪流行性腹泻（ＰＥＤ）血清可抑制细胞病变（ＣＰＥ）．ＰＥＤＶＣＶ＿（７７７）毒株１１、２５、２８、４０及４４代传代毒的毒价分别为１０￣（３．５）、１０￣（５．５）、１０￣（６．５）、１０￣（７．０）和１０￣（７．０）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．３ｍｌ。以１１、２１及２２代的毒１０ｍｌ头口服接种未吃初乳仔猪，可使之典型发病，免疫荧光及电镜观察均呈阳性．分别以２５、２８及３１代毒０．５ｍｌ／头、１ｍｌ／头、２ｍｌ／头口服接种３日龄仔猪１８头．除０．５ｍｌ组有１头反应外，均未发病，攻毒试验的总保护率为８７．５％，对照组１００％发病．以２８代毒制备氢氧化铝灭活苗，后海穴位接种，主动免疫组８５．１９％保护，被动免疫组８５％保护，对照组１００％及９２．３％发病．     

轮状病毒的免疫研究

轮状病毒(Ro-tavirus,RV)属呼肠孤病毒科的成员,是引起婴幼儿和多种幼龄动物急性腹泻的非菌性腹泻的主要病原体。1973年Bishop等在澳大利亚从腹泻患儿十二指肠粘膜及粪便中发现了一种新的病毒粒子。不论在发展中国家或是发达国家,因严重腹泻住院的3岁以下病儿中有20%～70%是轮状病毒感染性腹泻,平均为33%。世界卫生组织报告,每年有70万或者说每天有2000婴幼儿死于轮状病毒腹泻,其中发展中国家占全部腹泻死亡数的25%。Woode等在1974年首次从猪分离出轮状病毒,我国阙玲玲1982年首先在台湾发现猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PRV),以后江苏…     

A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRVJS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约1.3 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1 320 bp全基因序列;将其ORF与国内外9株PRV VP6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较,核苷酸同源性在77.1%~91.1%之间,氨基酸的同源性在89.7%~99.5%之间;在氨基酸系统发育进化树中,JS毒株与A131、OSU、CN86毒株亲缘关系较近,为一个进化群。