齐齐哈尔种畜场猪传染性胃肠炎流行病学调查报告

猪传染性胃肠炎(TGE)有不同的流行方式,在初次发生本病的地区或养猪场里呈暴发流行,传播迅速,各种猪只均可感染,新生仔猪死亡率极高,经过2～3周则停熄,几年之后由于本病免疫期较短,当猪群里绝大多数猪只成为易感猪时又可再次暴发。近些年来国外文献报导在受本病侵袭过的地区或养猪场里常呈地方性流行,由于     

抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用猪传染性胃肠炎(TGEV)华毒株弱毒H-155代感染iBRS_2传代细胞,通过冻融、PEG3000沉淀、蔗糖密度梯度离心提纯制备的TGEV抗原,免疫BALB/c小鼠,取血清抗体阳性的免疫鼠的脾细胞,在50％PEG4000作用下,与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,产生杂交瘤。用ELISA间接法对杂交瘤细胞生长孔上清液进行检测,筛选阳性杂交瘤细胞株。通过有限稀释法进行3次克隆,获得了2株分泌抗TGEV的单克隆抗体杂交瘤细胞株。并对其所分泌的单克隆抗体免疫球蛋白亚类、特异性、中和反应性等特性作了初步鉴定。     

猪流行性腹泻灭活疫苗的研究

用猪流行性腹泻(PED)沪毒株研制氢氧化铝灭活疫苗.接种途径为后海穴位。以0.1ml/头主动免疫接种3日龄仔猪,保护率为77.28%;以0.5ml/头主动免疫接种3～22日龄仔猪,保护率为85%;以3ml/头被动免疫接种妊娠母猪,其所产3日龄仔猪的保护率为97.06%。接种疫苗后14天开始产生免疫力。免疫期可达6个月.疫苗在室温(19～26℃)保存226天仍保持较好的免疫原性.     

单克隆抗体技术在猪传染性胃肠炎病毒研究中的应用和进展

用杂交瘤细胞产生单克隆抗体(MAbs)是近几年来在免疫学和分子生物学领域中最为显著的成就。自1975年英国剑桥大学的 K hler 等报道了淋巴细胞杂交瘤技术以来,其理论和实用的研究,已取得了惊人的进展,杂交瘤单克隆抗体的应用范围愈来愈广泛,目前已经深入到整个生物医学的各个领域。在动物病毒学领域已被广泛用于研究病毒的鉴定、纯化、抗原结构分析、病毒株间鉴别、     

猪流行性腹泻灭活疫苗区域性试验

应用猪流行性腹泻灭活苗在9个省、市、区40多个猪场进行了区城性试验、共预防接种10.3万余头猪,与实验室试验结果是一致的,取得了较好的效果。在疫苗的试用中,要先进行定性诊断,并注意混合感染及适时的使用疫苗。     

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联氢氧化铝细胞灭活疫苗的研究

猪传染性胃肠炎(TGE)细胞灭活苗的主、被动免疫试验的保护率为93.55％及76.34％,猪流行性腹泻细胞灭活苗的主、被动免疫试验的保护率为88.89％及90.7％。在此基础上,进行了TGE、PED二联氢氧化铝灭活苗的研究。灭活前细胞毒毒价均为10~(7.0)-10~(7.5)TCID_50/0.3ml,主动免疫保护率:TGE100％、PED92％。被动免疫保护率:TCE87.9％、PED82.4％。免疫期6个月。疫苗保存期一年。田间试验保护率为92～96.35％。     

猪传染性胃肠炎免疫的研究 Ⅰ.猪传染性胃肠炎弱毒株的培育

当培养液中加二甲基亚砜处理细胞的方法,已使27—4代华毒株强毒适应于胎猪肾细胞,并传至165代。自92代进行了5批克隆纯化,并自116代开始选直径1mm以内小空斑传代。第100代以后的病毒度为10~(4.67)～10~(6.0)TCID50/0.3ml。以鼻内途径免疫接种的母猪中和抗体价最高,持续期最长可答13个月,三日龄哺乳仔猪主动免疫的安全性为76.9～94.3％,被动免疫的保护率可达97％以上。第120及135代毒分别作猪体连续传代5及6代,均未见毒力增强。接种102代毒的后备猪群有28.2％水平感染。以5ml剂量经肌肉、鼻内途径接种三头母猪,免疫持续期可达两产。几年来在几个大型养猪场试用证明,本弱毒安全有效,收到了防制本病的效果。     

猪外周血液中β-内啡肽与针刺免疫

应用放射免疫分析测定法,观察正常猪和穴位注射及口服接种猪传染性胃肠炎(TGE)疫苗后30分钟、24小时猪的外周血液中β-内啡肽(β-Ep)的含量,分析血中β-内啡肽变化与机体产生抗 TGE 免疫力的关系,以探讨针刺免疫的机理。     

猪传染性胃肠炎免疫的研究 Ⅰ.猪传染性胃肠炎弱毒株的培育

用培养液中加二甲基亚砜处理细胞的方法,已使27—4代华毒株强毒适应于胎猪肾细胞,并传至165代.自92代进行了5批克隆纯化,并自116代开始选直径1mm以内小空斑传代.第100代以后的病毒滴度为10~(4.67)～10~(6.8)TCID50/0.3ml.以鼻内途径免疫接种的母猪中和抗体价最高,持续期最长可达13个月,三日龄哺乳仔猪主动免疫的安全性为76.9～94.3％,被动免疫的保护率可达97％以上.第120及135代毒分别作猪体连续传代5及6代,均未见毒力增强.接种102代毒的后备猪群有28.2％水平感染.以5ml剂量经肌肉、鼻内途径接种三头母猪,免疫持续期可达两产.几年来在几个大型养猪场试用证明,本弱毒苗安全有效,收到了防制本病的效果.     

猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原间接ELISA抗体检测方法的建立

本研究以纯化的原核表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白为诊断抗原，建立了猪传染性胃肠炎病毒抗体检测的间接ELISA诊断方法，将其命名为mTGE-ELISA。该抗原不与其他常见10种猪病的阳性血清发生交叉反应。批内和批间重复性试验的变异系数均小于15％；对仔猪免疫后不同时间的血清检测结果表明mTGE-ELISA与纯化病毒ELISA符合率达95．0％；mTGE-ELISA相对于VN试验的敏感性为96．3％、特异性为92．2％：现地试验中，mTGE-ELISA与Svanova TGEV／PRCV antibody diagnosis Kit的符合率达87．0％，通过中和试验复核结果表明，mTGE-ELISA的假阳性低于Svanova TGEV／PRCV antibody diagnosis Kit。本试验建立的mTGE-ELISA诊断方法具有良好的敏感性和特异性，为免疫猪群抗体监测和TGE流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。