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猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响
引用本文:刘随新,石达,陈建飞,张鑫,时洪艳,刘孝珍,张莎,王璐,冯力.猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响[J].中国预防兽医学报,2013,35(3):173-176.
作者姓名:刘随新  石达  陈建飞  张鑫  时洪艳  刘孝珍  张莎  王璐  冯力
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;东北农业大学,黑龙江哈尔滨150030
基金项目:国家自然科学基金,黑龙江省杰出青年基金
摘    要:为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  核衣壳蛋白  核仁定位信号  流式细胞术  宿主细胞周期

Effects on host cell cycle by nucleoli localization signal peptides of porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein
LIU Sui-xin,SHI Da,CHEN Jian-fei,ZHANG Xin,SHI Hong-yan,LIU Xiao-zhen,ZHANG Sha,WANG Lu,FENG Li.Effects on host cell cycle by nucleoli localization signal peptides of porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(3):173-176.
Authors:LIU Sui-xin  SHI Da  CHEN Jian-fei  ZHANG Xin  SHI Hong-yan  LIU Xiao-zhen  ZHANG Sha  WANG Lu  FENG Li
Institution:1*(1.Division of Swine Infectious Diseases,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China;2.Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)
Abstract:
Keywords:
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