全文获取类型
收费全文 | 660篇 |
免费 | 33篇 |
国内免费 | 86篇 |
专业分类
林业 | 32篇 |
农学 | 34篇 |
基础科学 | 33篇 |
71篇 | |
综合类 | 208篇 |
农作物 | 22篇 |
水产渔业 | 40篇 |
畜牧兽医 | 229篇 |
园艺 | 16篇 |
植物保护 | 94篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 12篇 |
2022年 | 19篇 |
2021年 | 26篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 24篇 |
2018年 | 8篇 |
2017年 | 26篇 |
2016年 | 25篇 |
2015年 | 23篇 |
2014年 | 29篇 |
2013年 | 33篇 |
2012年 | 43篇 |
2011年 | 46篇 |
2010年 | 51篇 |
2009年 | 59篇 |
2008年 | 50篇 |
2007年 | 45篇 |
2006年 | 41篇 |
2005年 | 27篇 |
2004年 | 18篇 |
2003年 | 12篇 |
2002年 | 21篇 |
2001年 | 10篇 |
2000年 | 19篇 |
1999年 | 10篇 |
1998年 | 18篇 |
1997年 | 15篇 |
1996年 | 15篇 |
1995年 | 10篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 5篇 |
1992年 | 4篇 |
1991年 | 9篇 |
1990年 | 4篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有779条查询结果,搜索用时 203 毫秒
21.
切实提高“思想道德修养与法律基础课”课教学的实效性,是当前”思想道德修养与法律基础课”课教学方法改革的重要课题。如何在教学方法上突破传统单一的理论灌输方法模式,创新更多的教学方法,才能有效改进大学生思想政治教育工作。 相似文献
22.
旨在建立一种以重组酶聚合酶扩增技术(RPA)为基础的快速检测方法,用于小鹅瘟病毒的快速检测。小鹅瘟是一种常见的水禽传染病,严重危害我国养鹅业的健康发展。为了快速准确对小鹅瘟进行诊断,减少该病的危害,本研究以小鹅瘟病毒VP3基因保守片段为靶点,利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA)建立了一种准确高效的小鹅瘟病毒RPA恒温快速检测方法,并对检测方法的灵敏度、特异性进行评价,并与传统PCR和传统RT-PCR方法进行比较。结果表明,该检测方法具有较高的灵敏度,可检测到10 copies/μL的病毒核酸;具有良好的特异性,只特异性地扩增鹅细小病毒,而与鹅副黏病毒、鹅源鸭瘟病毒、小鹅流行性感冒病毒、鹅副伤寒病毒、大肠杆菌和曲霉菌均未发生交叉反应;同时该方法重复性检测的变异系数低于6%,具有很好的重复性。阳性符合试验表明该检测方法与荧光定量PCR符合率为99%。该方法可以很好地应用于小鹅瘟的大规模临床样本检测,为小鹅瘟病毒的高通量检测和流行病学调查提供技术手段。 相似文献
23.
用热扩散式茎流计测定园林树木蒸腾耗水量 总被引:2,自引:0,他引:2
采用热扩散式边材液流探针和环境自动监测系统对北京3种园林树木的树干液流及主要环境因子进行了一个生长季的同步观测.结果表明,3树种树干液流的日变化呈明显的单峰曲线,晴天的液流速率大于多云天和阴天,紫叶李和悬铃木的日耗水量明显大于元宝枫;对不同天气3树种每h的液流速率与相应的环境因子进行逐步回归分析.结果显示,影响3树种液流速率的主要环境因子是空气温度、空气相对湿度、辐射强度和5 cm土层温度,在不同天气里起主导作用的因子不同,环境因子与树干液流之间的数量关系能较好地预测树木的蒸腾耗水量. 相似文献
24.
为建立了一种可检测血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)的实时定量PCR方法,根据GenBank中DHAV-1 5,非编码区的保守区,设计合成1对引物和1条TaqMan探针,以构建的重组质粒作为标准品,绘制标准曲线,并对所建立方法进行了特异性、敏感性和可重复性试验以及临床病料检测初步应用。结果,该方法与血清3型鸭甲型肝炎病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒等无交叉反应性;最低可以检测到10copies/μL;组内和组间变异系数均小于3%;临床病料的检测结果与测序检测结果一致。结果表明,所建立的实时定量检测方法具有特异、敏感、稳定等优点,可用于DHAV-1的快速检测与定量分析。 相似文献
25.
通过克隆2型猪圆环病毒(PCV2)的开放阅读框2(0RF2)基因编码其核衣壳蛋白(Cap)的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的靶序列设计一对引物和一条TaqMan探针.对PCR反应条件优化后,对构建的标准阳性模板定量,然后1 0×倍比稀释进行荧光定量PCR(qPCR)扩增并制作标准曲线,初步建立了PCV2检测的qPCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μ L,线性范围为101 ~ 109,达9个数量级,并且具有很好的特异性.对起始浓度为1.0×108、1.0× 106、1.0×104拷贝/μL的标准品的最终实际测得CT均值分别为12.77、19.72和26.89;变异系数分别为0.25%、0.10%和0.13%,均小于1%,说明此方法具有良好的准确性和重复性. 相似文献
26.
为建立检测口蹄疫病毒(FMDV)的方法,本研究根据GenBank中FMDV的2B基因序列,设计合成一对引物和一条TaqMan探针,将2B基因克隆到pBlueScriptSK(-)载体中,利用T7体外转录试剂盒制备标准品,通过优化反应条件,建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验重复性的变异系数(CV)均小于3%.本研究建立的FMDV TaqMan荧光定量PCR方法对FMDV的快速检测具有重要意义. 相似文献
27.
研究了用生物素标记的寡核苷酸DNA探针快速检测鱼传染性胰脏坏死病病毒IPNV,取得了较好的结果。对探针的灵敏度,特异性进行了灵敏度、特异性进行了测定,并与其它快速检测技术作了比较。 相似文献
28.
29.
30.
副结核分枝杆菌DNA探针的制备与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
以溶菌酶、SDS、高氯酸钠等处理提取副结核分析杆菌C2株染色体DNA,经限制性内切酶Pst I消化后,以质粒pBluescript SK为载体,通过T4DNA连接酶连接,转入E。coli DH5a受体菌中,构建了副结核菌C2株的DNA基因文库。应用反向杂交试验,从基因文库中筛选出4个重组克隆:PTP12、PTP19、PTP38。对这4个重组克隆进行酶切、电泳分析,结果表明4个插入片段长度分别为:4 相似文献