SPF鸡感染禽白血病病毒A/B亚群后血清抗体与卵黄抗体的变化及其相关性

拟研究以卵黄抗体替代血清抗体检测判定SPF鸡群禽白血病病毒(ALV)感染状态的可行性。在人工接种ALV-A/B后的40只SPF鸡刚开产时,从21只抗体阳性鸡及19只抗体阴性鸡分别采集血清和卵黄并一一对应,比较卵黄不同稀释度与血清中ALV-Ab抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。另外36只同批次不攻毒的SPF鸡单独饲养作为对照,76只鸡在25~34周龄期间,每隔3周分别采集1次血清,每周采集1次种蛋,共采集了304份血清样品及836份卵黄样品。所有血清和卵黄抗体用IDEXX的ALV-Ab抗体ELISA检测试剂盒检测。血清按试剂盒规定的1∶500稀释,卵黄按预试验结果选定稀释度稀释。同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品,严格在同一次ELISA试验中检测。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄做1∶300稀释时,假阳性和假阴性最少,确定1∶300为卵黄最适稀释度。在25~34周龄,836份卵黄抗体的检测判定结果与304份血清抗体检测结果吻合率达94.7%,即这些血清抗体阳性鸡同时期采集的卵黄抗体也全部阳性,血清阴性鸡的卵黄抗体也均为阴性。结果提示疫苗生产企业可通过检测SPF种蛋的卵黄抗体来判断SPF鸡场对ALV的洁净度。     

蛋用型祖代鸡群禽白血病病毒感染状态的持续观察

为了检测从国外直接进口的蛋用型祖代鸡群是否存在外源性禽白血病病毒(ALV)的感染,将240只1日龄鸡饲养在严格的SPF环境中。在不同日龄采集泄殖腔棉拭子检测ALV群特异性p27抗原、采集血浆分离外源性ALV和采集血清检测ALV-AB及J特异性抗体。结果表明:在近3个月的6次采样检测中,6个不同的配套系间泄殖腔棉拭子检出率显著不同。其中1个配套系6次完全阴性,其余5个则在不同时期呈间隙性阳性。各品系之间ALV p27抗原检出率与快慢羽性状没有相关性。慢羽的配套系C,36只鸡中在45日龄检出了1例ALV-AB抗体一过性阳性,在60日龄检出了2例ALV-J抗体一过性阳性。分别在5、21日龄采血浆在DF1细胞分离病毒,所有的6个配套系的204只鸡外源性ALV的病毒分离均为阴性。     

AA肉种鸡内源性类ALV-J gp85基因及其抗原表位的分析

利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉种鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kb的目的片段,用ALV-J特异性单抗JE-9做间接免疫荧光检测,也呈现阴性反应。这种内源性类ALV-J gp85基因与已报道的禽内源性反录病毒EAV-HP序列的同源性为85.6%～93.8%,其中与ADOL 0系来航鸡EAV-HP的相似性最高(93.8%)。所得到的内源性类ALV-J gp85基因与外源性ALV-J毒株HPRS-103、SD07LK1、NX0101的同源性分别为93.8%、91.8%和91.7%。并且与外源性ALV-J gp85基因具有相似的Jameson-Worlf抗原表位优势。这种内源性类gp85基因很可能与肉雏鸡早期感染ALV-J后所呈现的免疫耐受现象有关。     

规模化肉鸡安全生产与免疫抑制性病毒多重感染的预防控制

规模化肉鸡安全生产涉及到二方面:一是鸡群自身的健康安全问题;二是作为人类的食物链,养鸡产品中的药物残留对人类的安全性问题.鸡免疫抑制性病毒感染可同时影响到这二个方面.     

鸡马立克氏病meq基因缺失疫苗(SC9-1株)的临床应用效果比较研究

鸡马立克氏病基因缺失活疫苗(SC9-1株)的临床试验分别在3个鸡场进行,试验鸡分别为1日龄雪山黄鸡20 600只、1日龄京红1号蛋鸡17 000只、1日龄北京油鸡9 732只。临床安全性试验观察期内,免疫鸡群的精神状态、采食、饮水情况、生长性能与对照组无异。临床免疫效力试验期间,将免疫SC9-1鸡群与免疫CVI988/Rispens(市售)鸡群进行对比,SC9-1鸡群的死淘率分别为2.7%与0.4%,均低于CVI988/Rispens免疫鸡群的3.7%与1.2%(P0.05)。另外分别将免疫SC9-1的鸡群与免疫CVI988/Rispens的鸡群在6日龄时攻击马立克超强毒Md5(1 000 pfu/只),结果显示SC9-1株疫苗攻毒保护率分别为35/35与34/35,显著高于CVI988/Rispens株疫苗的25/35与27/35(P0.05)。以上表明SC9-1株疫苗安全性良好,免疫效力较好,可能是一株理想的马立克氏病疫苗。     

鸡群的免疫抑制病与药物的应用和研发

一、鸡群中免疫抑制剂病的普遍性及其危害近两年来,我国养鸡生产面临着来自疫病的严重挑战。一方面由于肉鸡产品中抗菌素残留超标及检出强毒新城疫病毒和H5禽流感病毒,使我国鸡肉出口不断受阻。另一方面,鸡群中的疫病变得越来越不典型,因而越来越难以鉴别诊断、越来越难以控制,     

免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测

分别用digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒（CAV)和禽网状内皮增生症病毒（REV）核酸探针以及PCR技术对某种鸡场进行检测，检测结果表明，在20个样品中，CAV和REV感染的阳性率分别为10％和5％，这一结果显示，CAV和REV感染是导致该鸡场发生免疫抑制的主要病因之一。     

犬瘟热病毒中国分离株囊膜糖蛋白基因免疫小鼠诱发的抗体应答

将CDV中国分离株(YZ0101)的两囊膜糖蛋白基因F和H与pGEM—rreasy载体构建的重组质粒分别采用EcoRI和Kprd、BamHI和Kpnl双酶切后定向克隆进真核表达载体pcDNA3．1(-)中，DNA测序和限制性酶切分析筛选阳性克隆pcDNA-H和pcDNA-F，以重组质粒DNA和脂质体共转染COS-7细胞，用间接免疫荧光试验验证转染的COS-7细胞胞浆中分别表达了CDV的H和F蛋白。以聚乙烯胺(PEI)为佐剂，将犬瘟热病毒F和H基因重组质粒pcDNA-H和pcDNA-F的DNA分别或混合肌注6周龄BABI／c小鼠，同时设pcDNA原载体DNA对照。以2周为间隔共免疫4次。最后一次免疫后3周，采血分离血清，酶联免疫吸附试验(ELISA)和病毒中和试验(SN)分析基因免疫在小鼠体内诱导的免疫应答。结果显示：pcDNA-H和pcDNA-F试验组免疫4次后分别激发了10^2.99 0.134、10^2.93 0.164滴度的ELISA抗体；两种质粒DNA混合免疫后产生了1：32～1：128的抗CDV的中和抗体；而原载体DNA免疫后，用ELISA和SN未检测出特异的CDV抗体。表明犬瘟热病毒囊膜糖蛋白F和H基因免疫小鼠可诱发产生特异性的体液免疫。     

从一病例谈对肉仔鸡J—亚群白血病的认识

2000年11月，济宁市郊区的三个饲养户在饲养三群肉仔鸡(每户1 000只)时发现，鸡群从20日龄左右开始出现死亡，有一户日死亡鸡高达10只左右，因曾喂过一段时间结块怀疑发霉的饲料，故怀疑是霉饲料中毒，28日龄时来校化验，发现：病鸡的个体差异较大，有的鸡出现瘫痪，在进行病理组织检查时发现，有两只鸡的肝脏出现了淡黄色大小各异的斑块，使肝脏呈花斑状，未发现其他病变，故将心、肝、脾、皮肤、关节等用福尔马林固定，制作了病理切片，病理组织学观察发现：肝、心、脾、肾等器官组织有嗜酸性颗粒的髓细胞局灶性浸润，故怀疑为J－亚群白…