寡核苷酸芯片检测兽医病原菌耐药性的研究

 利用寡核苷酸芯片（oligonucleotide array）对兽医临床常见病原菌耐药性检测进行了初步研究。设计1对兼并引物扩增3种病原菌（E. coli、S. aureus、M. gallisepticum）的gyrA基因片段，并用cy5-dCTP标记荧光。设计一系列检测病原菌对氟喹诺酮类药物耐药的寡核苷酸探针，将探针固定在APS-PDC法制作的Microarray上，用标记的PCR产物与之杂交，置于Scanarrray4000中扫描，利用ImaGene3.0软件对杂交图像进行分析。研究结果表明，设计的兼并引物能很好地扩增出3种病原菌的gyrA基因片段，与Microarray杂交后在相应的位点出现可检测的杂交信号，样本O78S（禽大肠杆菌）、SS（金黄色葡萄球菌）、S6-10（鸡毒支原体）的ratio比值均≥2，说明这3株是敏感株；样本EDr（犬大肠杆菌）、ECr（猫大肠杆菌）与a1探针（检测GyrA第83位氨基酸发生突变的探针）的ratio比值≤0.5，说明这两株是耐药突变株，均与样本的实际情况相吻合。说明利用Oligonucleotide array能快速准确地检测出GyrA亚基第83、87位发生突变的耐药菌株，是可行、有效、快捷的抗菌药耐药性的监测方法。本研究为进一步研制和开发兽医临床常见病原菌耐药性检测芯片打下初步基础。     

滔罗定对大肠杆菌和沙门氏菌混合感染鸡的药效学试验

研究了滔罗定的体外抑菌效果及对人工混合感染雏鸡大肠杆菌和沙门氏菌的治疗效果.采用试管两倍稀释法测定滔罗定对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌标准菌株和临床分离菌株的最小抑菌浓度.选择180只4日龄罗曼雏鸡随机分为健康组(Ⅰ),感染对照组(Ⅱ),氟苯尼考治疗对照组(Ⅲ)和滔罗定高、中、低剂量组(Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ)等6个不同处理组,进行人工致病治疗试验.试验结果:滔罗定对受试菌株的体外最小抑菌浓度≥256μg/ml.治疗试验中,与感染对照组相比,滔罗定高、中剂量组的死亡率分别降低了20.0%、16.7%,治愈率分别提高了23.3%、16.6%,差异均极显著(P＜0.01);滔罗定高、中剂量组的有效率和治愈率均高于氟苯尼考组,但差异不显著(P＞0.05).结果表明,滔罗定的体外抑菌效果较差,但对人工混合感染雏鸡大肠杆菌和沙门氏菌具有一定的治疗效果.     

中兽药代谢及药物代谢动力学研究动态

在分析相关文献的基础上,评说国内中兽药发展水平,并结合实验室相关研究,得出中药代谢及动力学须与中医的传统理论结合,体现多组分的药效特点,将有助于中药药代动力学的研究和中药药效物质基础的阐明。     

动物药学专业课程体系建设及复合型人才培养模式探索

动物药学专业是应我国动物药业发展需求而创办的新专业,准确定位该专业的人才培养目标,建立相应的专业课程体系和人才培养模式,是办好该专业的基础和关键。华南农业大学动物药学专业确立了培养"厚基础、宽口径、重实践、广适应"复合型创新性人才的目的,构建了兽医学和药学知识并重的专业课程体系,并强化实践教学环节,突出对学生实践技能和创新能力的培养。     

恩诺沙星对隆腺蚤(Daphnia Carinata)的急性活动抑制毒性测定

恩诺沙星是在畜禽养殖业中得到广泛应用的抗菌药物。以隆腺蚤(DaphniaCarinata)为试验对象,测定了恩诺沙星对隆腺蚤的急性毒性。结果表明,25℃时,24h恩诺沙星对隆腺蚤的最大不致死浓度为1μg·mL-1,使隆腺蚤全部死亡的最低浓度为120μg·mL-1;恩诺沙星在24h、48h时对隆腺蚤的EC50分别为34.03μg·mL-1和19.37μg·mL-1。48h时,恩诺沙星对隆腺蚤的LC50为25.86μg·mL-1。依据蚤类急性活动抑制毒性分级标准,恩诺沙星对于隆腺蚤属于中毒性化合物。     

人工合成抗菌药--磺胺类及二氨嘧啶类

1发展简史 1.1磺胺类 磺胺类药是用于预防和治疗人的细菌性感染作全身用药的第一类化学治疗药.在青霉素使用之前,磺胺类是抗菌化学治疗的主要药物,并在第二次世界大战中有很好的医疗记录.在发现磺胺以后十年时间里,就有超过5400种同系物被合成和研究(到目前已有8000种以上),但有医疗价值的不过20多种.     

乙基环丙沙星对实验性感染猪链球菌病及水肿病的药效学研究

本文报道以国内新近研制的畜禽专用氟喹诺酮类抗菌药──乙基环丙沙星（Ｅｎｒｏｆ－ｌｏｘａｃｉｎ），进行对实验性感染猪链球菌病及水肿病的药效学研究（２３０头猪）。试管两倍稀释法测得乙基环丙沙星对兰氏Ｃ群类马链球菌（Ｃ＿（５５１２０））和猪大肠杆菌（Ｏ＿（５４））的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）分别是０．８及０．０５μｇ／ｍｌ。肌注给药对猪链球菌病和水肿病的实验性治疗结果表明，乙基环丙沙星低、中、高剂量组（分别为１．２５、２．５、１０ｍｇ／ｋｇ）用药６０（每天２次）对猪链球病的治愈率分别是５０％、９５％及９５％，而链球菌感染对照组的死亡率为７０％；乙基环丙沙星低、中、高剂量组（分别为１．２５、２．５、１０ｍｇ／ｋｇ）用药３ｄ（每隔１２ｈ给药一次）对猪水肿病的治愈率分别是８５％、９０％及９０％；而大肠杆菌感染对照组的死亡率为９０％。     

饲料中喹乙醇含量的高效液相色谱测定方法

喹乙醇是一种人工合成的抗菌促生长剂，对一些敏感致病菌有防治作用。国外主要用作猪、犊牛的促生长添加剂，而我国更多地用于禽的饲料添加剂，并作为革兰氏阴性菌引起的某些疾病的防治药物。由于家禽对其敏感、安全范围小，近年来，因为误用或混料不均匀引起的家禽中毒屡...     

复方连翘对Th细胞分化信号蛋白钙调神经磷酸酶转录表达的影响

 【目的】观察中药复方连翘对T淋巴细胞活化信号蛋白CaN 转录表达变化，探讨其免疫调控机制。【方法】用含药血清培养鸡脾T淋巴细胞并以OVA和ConA体外干预诱导;利用半定量RT-PCR和Western-blotting技术检测CaN mRNA及其蛋白的表达。【结果】发现信号蛋白CaN转录、表达在0.1% OVA的情况下无血清组和正常血清组高于其它实验组，与10%OVA相比差异显著（P＜0.05）。0.1%OVA浓度下，抗病毒口服液与复方连翘血清组的CaN表达均有明显降低，但两者之间降低程度无显著差别;复方连翘血清组在10%OVA条件下的CaN转录表达，与无血清组比较，有显著升高（P＜0.05）。【结论】复方连翘可能通过调节信号转导通路第一个接头蛋白CaN的转录表达来影响Th的分化进而实现对机体的免疫调控，同时也表明复方连翘通过双向调节、多环节、多途径实现的对机体免疫调节作用。     

猪肠道菌氨基糖苷类药物耐药基因分析

为调查和分析猪肠道菌的氨基糖苷类药物耐药机制,用PCR及序列分析方法检测鉴定2个猪肠道菌中4种16S rRNA甲基化酶耐药基因rmtA、rmtB、rmtC和armA和10种氨基糖苷钝化酶基因,用接合试验研究rmtB基因和10种氨基糖苷钝化酶基因的水平转移机制,用微量稀释法测定携带rmtB基因的分离菌及其接合子对20种抗菌药物的敏感性.结果,从分离的152株猪肠道菌中共检测到49株(32.3%)rmtB阳性菌,其中48株为大肠埃希氏菌,1株为阴沟肠杆菌,未检出其它16S rRNA甲基化酶编码基因.49株rmtB阳性菌中检测到7种氨基糖苷类钝化酶基因,检出率从高到低依次是aac(3)-Ⅱ(87.8%)、aph(3′)-Ⅶ(79.6%)、aph(3′)一Ⅱ(77.6%)、aadAJ(34.7%)、aacc(6′).-Ⅰb(14.3%)、aac(3)-Ⅳ(10.2%)和aph(4)-Ⅰ(8.2%).46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB、aac(3)-Ⅱ、aph(3′)-Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因传递给受体菌E.coli C600和E coli 488 Rifr,接合率从3.0×10-6～4.6×10-13不等.所有rmtB阳性菌株及其接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种氨基糖苷类抗生素均高度耐药(MIC≥512 Pg·mL-1).研究结果表明,rmtB基因和氨基糖苷钝化酶基因广泛存在于两猪场,它们共同介导猪源肠道菌对庆大霉素、阿米卡星等氨基糖苷类药物的高度耐药.rmtB基因与aac(3)-Ⅱ·aph(3′)一Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因位于同一接合性质粒上,共同传播氨基糖苷类的耐药性.