土木香提取物抑制金黄色葡萄球菌毒力因子分泌作用的研究

本研究旨在分析土木香提取物对金黄色葡萄球菌主要毒力因子分泌的影响及机制研究,以耐药性金黄色葡萄球菌USA 300为研究对象,通过醇提法获取土木香提取物,根据主要毒力因子蛋白表型功能(溶血活性和TNF-α含量释放分析),利用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR分析检测不同浓度土木香提取物对金黄色葡萄球菌主要毒力因子分泌的影响及机制。无抗菌活性的土木香提取物与金黄色葡萄球菌共培养后可显著抑制培养物上清溶血活性及其诱导小鼠脾淋巴细胞TNF-α释放活性,蛋白免疫印迹分析表明,土木香提取物处理可显著降低金黄色葡萄球菌α-溶血素、肠毒素A和中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)的分泌,荧光定量PCR试验结果进一步表明土木香提取物与金黄色葡萄球菌共培养后降低金黄色葡萄球菌α-溶血素、肠毒素A和TSST-1编码基因的转录及金黄色葡萄球菌二元调控系统agr的转录。本研究结果表明,土木香提取物通过抑制agr二元调控系统转录及其毒力因子编码基因的转录而降低毒力因子的分泌,土木香提取物是一种潜在的新型抗金黄色葡萄球菌感染先导化合物。     

黄芩提取物对单增李斯特菌溶血素的作用

为了研究黄芩提取物对单增李斯特菌溶血素(LLO)溶血活性及单增李斯特菌致病力的影响,试验采用测定最小抑菌浓度(MIC)、绘制生长曲线、分析溶血活性、蛋白免疫印迹分析和细胞毒性试验的方法分析了黄芩提取物对单增李斯特菌增殖、单增李斯特菌溶血素溶血活性和单增李斯特菌对细胞的毒性作用。结果表明:黄芩提取物可通过直接中和单增李斯特菌溶血素活性而降低溶血活性,且这一作用与黄芩提取物的抗菌活性无关;在细菌与细胞共培养体系内加入黄芩提取物可有效抑制细菌对细胞介导的细胞毒性作用。说明黄芩提取物是一种潜在的抗单增李斯特菌感染的先导化合物。     

猪组织中多西环素残留的HPLC检测方法研究

试验旨在建立猪组织中多西环素的HPLC检测方法(国外多采用反相苯基柱、多聚合柱的HPLC检测方法),为控制食品中多西环素的残留提供可靠的方法保证.     

体细胞克隆太湖猪出生

以中国太湖猪胎儿成纤维细胞为核供体,以体外成熟卵母细胞为核受体,以杜洛克猪为代孕母猪,进行了太湖猪体细胞克隆技术的研究,成功地获得了首例体细胞克隆太湖猪仔猪.经微卫星DNA多态性鉴定,确定克隆猪来自供核细胞,与代孕母猪无亲缘关系.本研究将为体细胞克隆技术在我国太湖猪育种、建立人类疾病模型等研究方面提供可行的技术方法.     

蒽酮-硫酸比色法检测多糖条件的优化

本研究通过单因素实验和L9(33)正交实验优化蒽酮-硫酸比色法检测多糖含量的条件,研究反应温度、反应时间、蒽酮-硫酸液的体积对吸光度值的影响。结果表明,蒽酮-硫酸比色法检测的糖含量的最优条件为蒽酮-硫酸2 mL,于100℃反应10 min。验证实验结果表明,总标糖获得的标准曲线方程A=0.005W-0.0162,r=0.9998,优于葡萄糖标准曲线方程。在620 nm下测定,能得到较高的吸光度值,重现性好。     

华蟾毒精对胃腺癌细胞MGC-803作用的研究

研究华蟾毒精（cinobufagin,CBG）体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细胞的抑制作用、细胞周期及细胞早期凋亡的影响。一定浓度范围内CBG对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;光镜下可见细胞形态明显发生变化,细胞变圆,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁;流式细胞仪检测MGC-803细胞,G1期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。CBG对MGC-803细胞的抑制作用与诱导其细胞阻滞及凋亡密切相关。     

皮肤癣菌微量液基稀释法抗真菌先导化合物敏感性试验方法的建立

为考察抗真菌先导化合物的抗皮肤癣菌活性.建立一种皮肤癣菌微量液基稀释法抗真菌先导化合物敏感性试验方法.以NCCLS(CLSI)M38-A产孢丝状真菌抗真菌药敏试验参考方案为基础,笔者对6种溶媒对红色毛癣菌生长系数的影响进行了考察.对红色毛癣菌的孢子接种量、所用培养基、孵育温度和时间以及终点判定等条件进行了修正.各种溶媒的工作浓度应该分别不高于1%(N,N-二甲基甲酰胺)、8%(聚乙二醇200)、2%(二甲基亚砜)、4%(丙酮)、8%(无水乙醇)、2%(1,2-丙二醇).红色毛癣菌孢子接种量在1×104～5.0×104CFU/ml、培养温度28℃、培养时间7d、80%的菌株生长受到抑制时作为判定的终点是理想的测定条件.改良后的M38-A方案,其试验结果可靠,具有很强的重现性,适合作为考察先导化合物的抗皮肤癣菌活性的药敏试验方法.     

Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响

本实验室从胡黄连根茎分离到1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside单体Caffeoyl Glycoside（CG）,体外试验测定其对小鼠免疫细胞功能的影响。通过MTT法检测CG对Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖,NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响,以及小鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）能量代谢水平;CG对PMΦ吞噬中性红能力的影响。CG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用均能够显著增强小鼠脾淋巴细胞、PMΦ的增殖能力（P〈0.05或P〈0.01）,CG单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性（P〈0.05或P〈0.01）。CG在体外对小鼠主要免疫细胞的增值和功能方面具有显著的促进作用（P〈0.05或P〈0.01）。研究结果显示CG具有特异性与非特异性的免疫增强作用。     

IGF1对生长30d鹿茸的体外培养鹿茸生长中心干细胞的影响

【研究目的】利用细胞培养技术，探讨胰岛素样生长因子（IGF1）对生长30d的鹿茸体外培养不同代数梅花鹿鹿茸生长中心干细胞（鹿茸干细胞）的影响；【方法】原代分离、培养生长30d的鹿茸的梅花鹿鹿茸干细胞．将第2代、5代、8代鹿茸干细胞经含有不同浓度的IGF1（0，1，3，和10nM）作用后，在培养24h后用3H．胸腺嘧啶核苷测定法检测每分钟衰变数（DPM）值；【结果】取材于生长30d鹿茸的干细胞，全部IGF1处理组（1，3，10nM）都显著高于对照组（0nM）（p〈0．01）。3个不同浓度IGFI处理组的平均值和最高值都是离体培养2代的细胞最低（分别为2987和3743DPM／mg蛋白），而培养5代的细胞最高（分别为10320和12180DPM／mg蛋白）．第8代的细胞又开始下降（分别为8754和11568 DPM／mg蛋白）；【结论】IGF1能够促进鹿茸干细胞分裂增殖，生长30d鹿茸的干细胞在离体培养，不同培养时期的鹿茸干细胞对IGF1刺激的敏感度不同。     

高脂血症金黄地鼠血液流变学研究

为了研究高脂血症金黄地鼠模型血液流变学特性的改变，研究采用14只叙利亚金黄地鼠随机分为2组，分别给予普通饲料及高脂饲料，10周后检测血浆甘油三酯、胆固醇、红细胞变形指数、取向指数、电泳率、全血粘度及血浆粘度，处死后，肝脏经油红O染色观测脂质沉积情况。结果显示高脂饲喂10周后，试验组动物体重、血浆甘油三酯、胆固醇、全血粘度及血浆粘度显著升高，红细胞的变形指数、取向指数、电泳率以及红细胞膜的流动性都显著降低，动物高脂血症引起显著的血液流变学特性变化。