宠物源细菌耐药性研究进展

现代社会宠物的数量日益增加,宠物受到的关注和其福利也随之增高.随着人们防疫意识的提高和传染病疫苗的注射,宠物病毒性传染病得到了有效控制,而因细菌感染引发的呼吸道、胃肠道及泌尿系统疾病等却经常发生.为控制这些细菌性感染,宠物临床上抗菌药的使用非常广泛而频繁,甚至有滥用的迹象,很容易导致耐药性的产生.宠物细菌产生的耐药性不仅影响治疗效果,而且由于人类经常与小动物亲密频繁地接触,犬猫等身上的耐药菌非常有可能传给人类.     

宠物源大肠杆菌耐药性调查

宠物细菌产生的耐药性不仅影响治疗效果,而且由于人类经常与小动物亲密频繁地接触,犬猫等身上的耐药菌非常有可能传给人类,导致严重的公共卫生问题[1].鉴于此,近年来欧美等发达国家对小动物临床的细菌耐药问题开始重视,已有不少宠物源细菌耐药性的研究[2-3].但在我们国家还没有这方面的认识,实际上随着国内宠物行业的发展,抗菌药的使用量非常大,由此导致的耐药问题可能比较突出.目前,国内已有大量关于畜禽病原菌耐药性的研究[4-5],但还未见有宠物源细菌耐药性方面的报道.本研究拟调查宠物源大肠杆菌对常用抗菌药物的敏感性,为小动物临床合理使用抗菌药物提供指导.     

猪源和牛源大肠杆菌耐药性比较试验

近年来,由于抗菌药物在动物生产上的不合理使用,使得动物源细菌耐药性变得越来越严重,且动物源耐药菌极有可能通过直接接触和动物性食品(肉制品和奶制品)传给人类,对人类的健康造成危害,动物源细菌耐药性问题也因此受到广泛的重视.大肠杆菌是一种重要的畜禽病原菌,常引起腹泻、尿道感染、腹膜炎,甚至败血症等.此外,大肠杆菌也是肠道菌群的共生菌,食品动物中治疗或预防性使用的抗菌药物给肠道中的大肠杆菌造成一种选择性压力,导致大量耐药大肠杆菌的出现,因此共生型大肠杆菌常作为抗菌药物选择压力的一个指示菌.肠道的内环境也为耐药基因的传递创造了良好的条件,共生型大肠杆菌作为一个可能的耐药基因储存库,在耐药基因的传播扩散方面发挥了重要作用[1].     

低浓度恩诺沙星对离体恒化器模型中人体肠道菌群的影响

 【目的】应用离体恒化器模型评价低浓度恩诺沙星对人体肠道菌群的影响,为制定微生物学日允许摄入量（ADI）提供依据。【方法】四套接种人体肠道菌群的离体恒化器模型中连续添加0、0.2、2及20 mg•L-1恩诺沙星8 d,采用细菌培养计数和PCR-DGGE方法研究细菌数量、耐药性、菌群结构和定植抗力的变化。【结果】2及20 mg•L-1恩诺沙星可抑制肠道总厌氧菌、总需氧菌和兼性厌氧菌、大肠杆菌、肠球菌的生长（P＜0.05或P＜0.01）;0.2、2及20 mg•L-1恩诺沙星均使总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率增加（P＜0.05或P＜0.01）, 停药7 d后,总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率呈下降趋势,但与对照组相比仍处于较高水平（P＜0.01）。20 mg•L-1恩诺沙星对肠道菌群结构的影响较大,使PCR-DGGE图谱发生明显变化,条带数、菌群多态性和相似性参数降低（P＜0.05或P＜0.01）;2和20 mg•L-1恩诺沙星可使肠道菌群对外源沙门氏菌的定植抗力明显下降。【结论】0.2 mg•L-1恩诺沙星（相当于3.67μg•kg-1体重）可对离体恒化器模型中的人体肠道菌群耐药性产生显著影响,说明中国现行规定的恩诺沙星和环丙沙星的ADI（6.2μg•kg-1体重）可能会对人体肠道菌群产生影响,主要为选择出耐药需氧和兼性厌氧菌。     

肺组织中的NOS在肉鸡腹水症发生发展中的变化

研究利用β-NADPH-d组织化学染色法检测一氧化氮合酶（Nitric oxide synthase,NOS）在正常肉鸡、亚临床腹水鸡和腹水鸡肺组织中的分布和活性变化，结果显示，在正常肉鸡肺组织中，气道上皮和肺大，中血管内皮出血NOS阳性染色，而外径小于100μm的小血管却很少见阳性染色；腹水鸡肺内大，中血管内皮着色较正常肉鸡深，血管平滑肌也有阳性反应，在正常肉鸡不出现阳性染色的肺小血管出现了强阳性染色的肺小血管出现了强阳性染色，肺小血管壁增厚，无肌性血管肌化，染色很深；亚临床腹水鸡有部分肺小血管内皮或平滑肌着色，研究结果表明正常肉鸡肺血管内皮有NOS活性，说明由NOS催化生成的NO对正常肉鸡肺血管张力有一定调节作用；腹水鸡肺水血管平滑肌层和内皮NOS表达增强，这可能与肺血管中膜增厚有关。     

缺氧、肺动脉高压、心脏功能与肉鸡腹水综合征的关系

为阐明缺氧、肺动脉高压、心脏功能与肉鸡腹水综合征 (ascites syndrome,AS)之间的关系 ,比较了正常肉鸡、亚临床腹水鸡和腹水鸡的右心室平均压 (m RVP)、平均肺动脉压 (m PAP)、心电图 导联 S波幅 (L ead S)、红细胞压积(HCT)、动脉血血氧饱和度 (Sa O2 )、心率 (HR)和右心肥大指数 (RV/ TV) ,并对这些指标进行相关分析和回归分析。结果表明 :在 AS的发展过程中 ,m RVP、m PAP、L ead S、HCT和 RV/ TV逐渐升高 ,HR和 Sa O2 逐渐下降 ;各指标相互之间的相关性都很高 (P<0 .0 0 1) ;HCT发生变化较其他指标早。此外 ,亚临床腹水鸡的左心室和体质量的比值 (L V/BW)及全心室和体质量的比值 (TV/ BW)最高 ,与腹水鸡的 L V/ BW值差异显著 (P<0 .0 5 ) ;正常鸡的 TV/ BW最低 ,与亚临床腹水鸡的差异显著 (P<0 .0 5 )。结果说明肺动脉压升高与机体慢性缺氧有关 ,且是造成右心肥大衰竭和 AS的原因 ;AS发展早期肉鸡心脏功能是代偿性增加的 ;m RVP、m PAP、L ead S、HCT和 Sa O2 可作为早期诊断、预测AS的指标。     

食品动物源细菌耐药性与公共卫生

抗菌药在人类感染性疾病防治中起着非常重要的作用,但随之而来的耐药问题也越来越严重。一般临床应用抗菌新药3～12年后开始出现耐药性,有的应用之初即出现耐药菌。抗菌药在畜禽养殖上的应用对治疗和预防动物疾病、促进生长、提高畜牧业产量起到了积极的作用,但动物使用抗菌药导致大量耐药菌出现,一方面     

广东省宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药性调查研究

为调查广东省宠物源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的携带和耐药情况,从小动物临床采集皮肤、耳部和鼻腔等部位的样品,分离鉴定伪中间型葡萄球菌,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法对伪中间型葡萄球菌进行抗菌药物敏感性检测,采用PCR方法检测mecA基因。结果表明,从898个样品中共分离到144株伪中间型葡萄球菌,检出率为16.0%,皮肤、耳部和鼻腔的伪中间型葡萄球菌检出率分别为20%(64/319)、17.8%(64/359)和7.5%(3/40)。抗菌药物敏感性检测和mecA基因检测结果显示有89株(61.8%)为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)。伪中间型葡萄球菌对氨苄西林、红霉素、阿奇霉素、克林霉素和四环素的耐药率均在80%以上,对利福平和阿米卡星的耐药率低于8%,对万古霉素、利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀和替考拉宁均敏感。大部分(>69%)MRSP对红霉素、克林霉素、泰乐菌素、阿奇霉素、复方新诺明、四环素、环丙沙星和恩诺沙星等抗菌药物表现耐药。本研究结果表明宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药情况严重且MRSP的检出率高,应高度重视宠物源细菌耐药问题。     

有机农场鸡、猪源大肠杆菌耐药性研究

为了解有机养殖模式下鸡、猪源大肠杆菌的耐药情况,2014年从广东从化某有机农场鸡、猪粪便中采集并分离出118株大肠杆菌,包括55株鸡源大肠杆菌和63株猪源大肠杆菌,采用琼脂稀释法测定大肠杆菌对18种抗菌药的敏感性。结果发现,同一有机农场中,鸡源大肠杆菌与猪源大肠杆菌在耐药种类及耐药率上均呈现相似规律,对头孢他啶、头孢喹肟、头孢噻肟、头孢西丁、阿米卡星、安普霉素、庆大霉素、新霉素、氟苯尼考、氯霉素、亚胺培南、环丙沙星、喹乙醇等较敏感(鸡0~21.8%,猪0~14.3%),对氨苄西林、链霉素呈现轻度耐药(鸡29.1%~38.2%,猪23.8%~27.0%),对复方新诺明、四环素、多西环素呈现较严重耐药(鸡45.5%、76.4%和72.7%,猪50.8%、81.0%和68.3%)。鸡源大肠杆菌中3耐及3耐以上的菌株占56.4%,猪源大肠杆菌占47.6%。结果表明有机养殖模式下鸡、猪源大肠杆菌耐药率相对较低,多重耐药现象存在但相对轻微,对个别临床常用抗菌药耐药率虽较严重但比常规养殖场低。由于目前国内大部分学者致力于研究常规养殖方式下细菌耐药情况,本研究很好地填补了有机养殖模式下畜禽大肠杆菌耐药性研究的空白。     

猪阴沟肠杆菌16SrRNA甲基化酶耐药基因分析

 【目的】分析猪阴沟肠杆菌GZL41B中4种质粒介导的16SrRNA甲基化酶耐药基因及其水平传播方式;【方法】采用PCR及序列分析方法检测鉴定猪阴沟肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因。以大肠杆菌E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌进行接合试验研究16SrRNA甲基化酶耐药基因的水平传播方式。用微量稀释法测定原菌株及其接合子对18种抗菌药物的敏感性。用PCR及序列测定法分析比较来自同一猪腹泻直肠拭子阴沟肠杆菌GZL41B和大肠杆菌GZL41H的侧翼序列并对172株动物源大肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因流行情况进行调查。【结果】从阴沟杆菌中成功扩增出目的片段,该片段经限制性内切酶HindⅢ酶切后,出现与预期的531 bp和194 bp相符的两段片段,序列测定结果证实该基因为rmtB,GenBank登录号为EF017943。以E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌,成功地获得了接合子,该接合子经鉴定为大肠杆菌。原菌株和接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素等4,6-二脱氧链霉胺类高度耐药,其MIC均≥256 μg?mL-1。大肠杆菌GZL41H中,rmtB的上游为Tn3转座子的部分序列,下游为肠炎沙门氏菌基因岛SGI1上融合酶编码基因groEL/intI1的部分序列orf1,而来源相同的阴沟肠杆菌GZL41B未扩增到与大肠杆菌GZL41H相同的侧翼序列。172株动物源大肠杆菌中,25株菌(15%)检出rmtB,1株菌(0.6%)检出armA;【结论】16SrRNA甲基化酶耐药基因rmtB首次出现在猪阴沟肠杆菌中,该基因介导猪阴沟肠杆菌对4,6-二脱氧链霉胺类氨基糖苷抗生素的高度耐药,并能通过接合方式在不同种属细菌间进行传播。rmtB在阴沟肠杆菌和大肠杆菌中传播的遗传背景存在差异。动物源大肠杆菌中rmtB广泛流行。