黑曲霉分泌表达载体的构建以及绿色荧光蛋白的表达

采用PCR扩增得到糖化酶基因启动子（PglaA-g）、色氨酸合成酶基因终止子（TtrpC）和潮霉素抗性筛选标记基因,依次连接这些基因元件,获得黑曲 Aspergillus niger 分泌表达载体pPHT. EGFP 基因与黑曲霉表达载体pPHT连接,得到重组表达载体pPHT-EGFP.pPHT-EGFP表达载体通过原生质体转化法转化黑曲霉,经潮霉素抗性筛选、基因组PCR鉴定阳性重组转化子.荧光显微镜观察表明,绿色荧光蛋白成功表达,而且荧光的分布具有一定的规律,主要集中在菌丝顶端、膈膜以及培养基中;固体培养基发出绿色荧光,表明绿色荧光蛋白分泌到培养基中,属于分泌性表达,蛋白分泌的部位主要位于菌丝顶端.     

重庆3个区县W.默科特果实品质分析

通过分析源于重庆3个区县(江津、长寿、开县)不同果园W.默科特果实品质理化指标(可溶性固形物、可滴定酸、维生素C、固酸比、亮度、色泽颜色),初步评价了3个不同区县W.默科特果实品质差异。结果表明,开县地区样地果园W.默科特果实转色期和成熟期明显早于江津地区和长寿地区,并且果实品质明显优于长寿地区和江津地区的样地果园。     

渝西资源圃茶园节肢动物的群落结构及时间格局

采用陷阱法、拍打、网捕3种方法对渝西永川资源圃茶园中节肢动物进行了调查,结果表明:2011年1-12月茶园共调查节肢动物分属3纲16目46科,茶园节肢动物群落演替随季节的变化而有很大差异,茶园生长旺盛期(3-7月),物种群落多样性指数、均匀度指数、昆虫种群数量和个体数量较高,其昆虫群落结构也较稳定;9-10月为茶园物种群落繁衍旺盛,蟋蟀为优势种群;茶园中天敌消长规律与害虫消长规律基本一致.     

农杆菌介导pepA基因对黑曲霉菌丝体的遗传转化

通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1 347 bp的酸性蛋白酶基因pepA与黑曲霉糖化酶基因5’同源臂和3’同源臂进行拼接,构建pepA基因表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-pepA。将载体pSZH-pepA通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉菌丝体。以PDA作为共培养培养基,乙酰丁香酮(简称AS)浓度200μmol.mL-1的条件下,28℃恒温静置培养48 h,经潮霉素筛选和PCR鉴定获得3株重组菌株。以出发菌株作为对照,对3株重组菌株静置培养7 d后的发酵液上清进行酶活测定,结果发现酸性蛋白酶酶活最高达45.56 U.mL-1,而出发菌株的酸性蛋白酶酶活仅为3.72 U.mL-1,表明酸性蛋白酶基因pepA在高产糖化酶的黑曲霉中得到表达。研究建立了农杆菌介导的pepA基因导入黑曲霉菌丝体的转化体系,为实现酸性蛋白酶在黑曲霉菌丝体中高效表达奠定基础。     

房县中药材产业转型升级措施探讨

第四届中国国际农业博览会最近在北京中国国际展览中心(老馆)召开。中国国际现代农业博览会(简称CTMAE)是国际性的行业盛会,重点突出现代农业的品牌化和国际化,旨在加快我国在农业新技术转化应用、加快农业发展方式转变等多方面的快速发展,使其在促进国际交流、合作与贸易中更好的推动我国农业的现代化健康快速发展中发挥积极     

江苏省畜禽养殖污染减排措施与政策研究

为提高江苏省畜禽养殖污染治理水平,达到污染减排要求,完成污染减排任务,本文从分析江苏省畜禽养殖业污染产生量、排放量和污染特征入手,对污染治理措施和法律、法规及政策支撑等进行了归纳总结,深入分析了目前治理中存在的主要问题,提出了适合江苏畜禽养殖污染治理的技术模式,以及促进污染减排目标实现的管理机制和保障条件。     

基于SCoT 标记的芥菜种质遗传多样性与指纹图谱

利用SCoT 标记对46 份芥菜种质资源进行遗传多样性分析。从70 条引物中筛选出21 条用于PCR 扩增,共扩增出200 条条带,其中多态性条带140 条,多态性比率为70%。供试材料相似系数介于0.77～0.95 之间,平均Nei’s 基因多样性为0.198,平均Shannon 信息指数为0.301,平均多态信息含量为0.822 7。利用UPGMA 构建46 份芥菜种质资源的聚类树状图,在相似系数D1=0.780 处,可以将46 份芥菜种质分为两大类;而在D2=0.807 处,第Ⅱ类可进一步细分为5 个亚类。选出清晰的16 个多态性位点,构建46 份芥菜种质的SCoT 指纹图谱,结果由引物SP4、SP19、SP20、SP23、SP30 所构建的DNA 指纹图谱可将供试材料完全区分开。     

不同鲜食葡萄品种对霜霉病的抗性比较

对甘肃省不同鲜食葡萄品种进行了室内离体叶片接种和田间自然发病情况调查,以期为葡萄抗性品种的选育和葡萄霜霉病的防治提供科学依据.结果表明:室内接种试验和大田调查结果基本一致;室内离体叶片接种发现,供试的10个葡萄品种中“京亚”对霜霉病的抗性最强,“瑞必尔”和“火焰无核”的抗性最弱;从发病时间来看,抗性与发病时间存在一定相关性,抗性越强发病越晚;田间调查结果表明,34个鲜食葡萄品种可分为3类,其中“京亚”等16个品种属于抗病品种,“红地球”等10个品种属于感病品种,“瑞必尔”和“京秀”等8个品种为高感病品种.     

低温气调贮藏对松茸保鲜品质的影响

研究了不同气体配比气调对松茸保鲜品质的影响。结果表明,采用一定比例的O2/CO2气体条件,对松茸后熟有极好的抑制作用,可采用O2/CO2为5/5、3/10作为气调贮藏松茸的参考数据。     

地方高校食品专业科研实验室管理措施探析

以渤海大学食品科学与工程学院科研实验室管理经验为依据,分别从实验室安全管理制度、安全教育及基础设施保障等方面进行详细阐述,并重点突出研究生在科研实验室管理中的作用,旨在为建设一个安全、和谐、绿色的实验环境提供安全保障,从而更好地为地方高校科研和学科建设服务。