| 黑曲霉分泌表达载体的构建以及绿色荧光蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 郑红玉,黄毓茂,余希尧,钟泽民,项林盛,唐丽云.黑曲霉分泌表达载体的构建以及绿色荧光蛋白的表达[J].华南农业大学学报,2013,34(4):574-579. |
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| 作者姓名： | 郑红玉 黄毓茂 余希尧 钟泽民 项林盛 唐丽云 |
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| 作者单位： | 华南农业大学 兽医学院,;华南农业大学 兽医学院,;华南农业大学 兽医学院,;华南农业大学 兽医学院,;华南农业大学 兽医学院,;华南农业大学 兽医学院, |
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| 基金项目： | 广东省现代农业生猪产业技术体系（F10021） |
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| 摘 要： | 采用PCR扩增得到糖化酶基因启动子（PglaA-g）、色氨酸合成酶基因终止子（TtrpC）和潮霉素抗性筛选标记基因，依次连接这些基因元件，获得黑曲 Aspergillus niger 分泌表达载体pPHT. EGFP 基因与黑曲霉表达载体pPHT连接，得到重组表达载体pPHT-EGFP.pPHT-EGFP表达载体通过原生质体转化法转化黑曲霉，经潮霉素抗性筛选、基因组PCR鉴定阳性重组转化子.荧光显微镜观察表明，绿色荧光蛋白成功表达，而且荧光的分布具有一定的规律，主要集中在菌丝顶端、膈膜以及培养基中；固体培养基发出绿色荧光，表明绿色荧光蛋白分泌到培养基中，属于分泌性表达，蛋白分泌的部位主要位于菌丝顶端.
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| 关 键 词： | EGFP基因 黑曲霉 表达 |
| 收稿时间： | 2013/2/17 0:00:00 |
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