甘蔗渣作为粗饲料对奶牛生产性能、养分消化和采食行为的影响

文章旨在评价甘蔗渣作为粗饲料对泌乳奶牛采食量、消化率、采食行为、泌乳量、乳成分及微生物蛋白合成等方面的影响。试验选择10头初始体重为(450±25.6)kg,泌乳天数为(143.7±30.7)d的杂交奶牛为研究对象,试验采用5×5拉丁方设计,饲喂周期为5个21 d(1~14 d为适应期,15~21 d为数据采集期)。试验日粮分为对照日粮、45%、50%、55%和60%甘蔗渣日粮。结果:对照组与45%和50%甘蔗渣组干物质、有机物、总可消化养分摄入量、干物质和有机物消化率无显著差异(P>0.05),而55%和60%甘蔗渣组干物质和有机物消化率最低(P<0.05)。甘蔗渣组与对照组对中性洗涤纤维摄入量和表观消化率的影响具有显著差异(P<0.05),其中45%甘蔗渣组奶牛的非纤维碳水化合物摄入量和消化率与对照组相似(P>0.05)。日粮甘蔗渣添加水平对营养物质的摄入量和消化率呈显著线性降低(P<0.05)。60%甘蔗渣组较对照组显著降低了奶牛反刍时间,显著提高空闲时间(P<0.05)。奶牛的反刍时间、反刍和采食效率随日粮甘蔗渣添加水平的升高显著线性降低(P<0.05),而空闲时间随饲粮中甘蔗渣含量的增加线性增加(P<0.05)。结论:日粮添加甘蔗渣降低了奶牛日产奶量,但添加水平为45%~50%时可以使奶牛泌乳量达到12 kg/d。     

甜菜粕替代玉米对肉牛生长性能及瘤胃发酵成分的影响

文章旨在研究日粮添加不同水平甜菜粕替代玉米对肉牛生长性能、瘤胃发酵能力及营养物质表观消化率的影响。试验选择初始体重为(237.2±24.5)kg的肉牛36头,随机分为4组,每组9头牛,每头牛作为1个重复,试验共进行20周。试验基础日粮以玉米和青贮高粱为主,处理组分别用33%、67%和100%甜菜粕等量替代玉米。结果:试验期间肉牛总增重和日增重随甜菜粕替代水平的升高表现为显著二次曲线效应(P<0.05),料比表现为显著二次曲线降低(P<0.05)。日粮添加甜菜粕显著提高肉牛瘤胃pH(P<0.05),33%甜菜粕替代玉米组瘤胃氨氮含量最高(P<0.05);随着日粮甜菜粕添加水平的升高,总脂肪酸、乙酸、丁酸含量及乙酸与丙酸比值表现为显著线性升高(P<0.05),而丙酸和异丁酸含量表现为显著线性降低(P<0.05)。有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和纤维素摄入量随日粮甜菜粕水平的升高表现为显著二次曲线增加效应(P<0.05),而粗脂肪摄入量表现为显著二次曲线降低效应(P<0.05)。有机物、中性洗涤纤维、纤维素和半纤维素表观消化率随甜菜粕水平的升高表现为显著线性升高(P<0.05)。血清肌酸酐、胆固醇水平随甜菜粕添加水平的升高表现为显著线性降低(P<0.05),而血清尿素氮、甘油三酯、IGF-1、皮质醇和T4含量表现为显著二次曲线升高效应(P<0.05)。结论:在本试验条件下,肉牛日粮用甜菜粕替代玉米可有效提高营养物质的消化率,改善肉牛瘤胃的发酵能力,在不损害动物健康的前提下提高日增重,降低料肉比,其适宜替代水平为67%。     

饲粮中添加过瘤胃赖氨酸对福清山羊生长性能、养分表观消化率和氮代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中添加过瘤胃赖氨酸(RPLys)对福清山羊生长性能、养分表观消化率和氮代谢的影响。选择体况良好、体重[(12.06±1.65)kg]相近的4月龄福清山羊羯羊30只,采用单因素试验设计,随机分为5组,每组6只。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组在基础饲粮中每只羊添加2.5、5.0、7.5和10.0 g/d RPLys。预试期15 d,正试期60 d。结果表明:1)饲粮中添加RPLys对福清山羊干物质采食量(DMI)、总能采食量、初始体重、终末体重、总增重和平均日增重(ADG)均无显著影响(P>0.05),试验I组的DMI最高,试验Ⅱ组的总增重和ADG最高。2)饲粮中添加RPLys对福清山羊干物质、有机物、总能、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率均无显著影响(P>0.05)。3)对照组的进食氮显著低于各试验组(P<0.05),试验Ⅳ组的进食氮显著高于试验Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05)。试验Ⅳ组的粪氮显著高于试验Ⅱ组(P<0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的沉积氮显著高于对照组(P<0.05)。各组之间的尿氮、排泄氮、氮沉积率和氮生物学价值无显著差异(P>0.05)。由此可见,在本试验条件下,饲粮中添加RPLys对福清山羊生长性能无显著影响,饲粮中添加2.5~7.5 g/d RPLys显著提高了福清山羊的沉积氮。     

复合酶制剂对肉仔鸡生长性能和养分利用率的影响

试验旨在研究复合酶制剂对饲喂玉米-豆粕型低能量水平日粮肉仔鸡生长性能和养分组,对照组(8个重复)饲喂玉米-豆粕型低能量水平基础日粮;复合酶制剂组(10个重复)饲喂添加250 mg/kg复合酶制剂的试验日粮,每个重复25只鸡。试验期35 d。试验二为笼养试验,试验选取8日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡300只,分为3组,每组10个重复,每个重复10只。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮;低能组饲喂在对照组基础上降低0.63 MJ/kg能量水平的日粮;复合酶制剂组饲喂在低能日粮中添加220 mg/kg复合酶制剂的日粮。试验二为8～22日龄进行。试验于第14～17 d采用全收粪法测定各试验组日粮的养分利用率。试验一结果表明:复合酶制剂组较对照组改善试验前期(0～21 d)和全期(0～35 d)体增重和采食量、试验前期(0～21 d)的料重比和体重(21 d和35 d)(P0.05)。试验二结果表明:(1)对照组料重比、能量利用率和表观代谢能显著优于低能组(P0.05);(2)复合酶制剂组显著提高低能组表观代谢能并降低其变异(P0.05),能量利用率和表观代谢能与对照组差异不显著(P0.05)。综上所述,在玉米-豆粕型低能日粮中添加复合酶制剂能改善肉仔鸡生长性能、料重比和表观代谢能,并降低代谢能变异。     

磷缺乏日粮添加米糠和植酸酶对生长猪养分利用率及氮磷代谢的影响

文章旨在研究日粮添加不同水平米糠及植酸酶对生长猪养分消化率及钙磷代谢的影响。试验选择48头平均体重为(87.0±2.45)kg的生长猪,随机分为6组,每组4个重复,每个重复2头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,处理组用7.5%、15%、30%的米糠替代基础日粮,同时另外两组在对照组和30%米糠组分别添加750IU/kg植酸酶,试验共进行2周,包括1周适应期和1周试验期。结果显示:随着日粮米糠添加水平的升高,干物质、能量、氮、纤维、钙表观消化率显著线性升高(P<0.05),而磷表观消化率显著线性降低(P<0.05)。随着日粮米糠添加水平的升高钙沉积率显著升高(P<0.05),对磷代谢平衡其他指标均具有显著升高的影响(P<0.05),粪氮量显著升高(P<0.05),其他氮平衡指标显著降低(P<0.05)。日粮添加植酸酶显著提了磷、脂肪和钙表观消化率(P<0.05),而米糠添加水平显著提高了养分表观消化率(P<0.05)。米糠替代基础日粮添加植酸酶显著提高了钙沉积率(P<0.05),显著提高了磷的吸收和沉积量(P<0.05)。结论:猪日粮中添加米糠较玉米-豆粕型日粮降低了磷表观消化率,添加植酸酶后可以改善氮、磷代谢。     

育成期太行鸡饲粮代谢能和粗蛋白质适宜水平的研究北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮代谢能和粗蛋白质水平对育成期太行鸡生长性能和血清生化指标的影响,以确定饲粮适宜代谢能和粗蛋白质水平,为制定太行鸡饲养标准提供依据。以代谢能(11.0、11.5、12.0 MJ/kg)和粗蛋白质水平(14%、15%、16%)为因子,采用2因素3水平的试验设计。选取体重均匀、健康的77日龄太行鸡母鸡360只,随机分为9组,每组设4个重复,每个重复10只鸡。预试期3 d,正试期42 d。结果表明:1)饲粮代谢能水平对育成期太行鸡平均日采食量和料重比的影响显著(P<0.05),随饲粮代谢能水平的升高,育成期太行鸡的平均日采食量和料重比降低。饲粮粗蛋白质水平对育成期太行鸡料重比的影响显著(P<0.05),随饲粮粗蛋白质水平的升高,育成期太行鸡的平均日采食量先增加后降低,料重比先减小后增大。饲粮代谢能和粗蛋白质水平对育成期太行鸡平均日采食量、平均日增重和料重比表现出显著互作效应(P<0.05)。2)饲粮代谢能水平对育成期太行鸡平均日代谢能摄入量(ADMEI)和平均日粗蛋白质摄入量(ADCPI)的影响显著(P<0.05),随饲粮代谢能水平的升高,育成期太行鸡的ADMEI增加。饲粮粗蛋白质水平对育成期太行鸡ADCPI的影响显著(P<0.05),随饲粮粗蛋白质水平的升高,育成期太行鸡的ADCPI增加。饲粮代谢能和粗蛋白质水平对育成期太行鸡ADMEI和ADCPI表现出显著互作效应(P<0.05)。3)饲粮代谢能水平对育成期太行鸡血清甘油三酯含量的影响显著(P<0.05)。饲粮代谢能和粗蛋白质水平对育成期太行鸡血清甘油三酯含量表现出显著互作效应(P<0.05)。综合血清生化指标得出,饲粮代谢能水平为11.5 MJ/kg即可以满足太行鸡的能量需要。综合考虑各项指标,育成期太行鸡饲粮适宜代谢能水平为11.5 MJ/kg,适宜粗蛋白质水平为14%~15%。     

大豆加工废弃物对徐淮白山羊生产和繁殖性能的影响

本研究开展2个试验,旨在评估用大豆加工废弃物饲喂徐淮白山云对其生产和繁殖性能的影响。试验1选择平均初始体重为(12.39±0.16)kg的徐淮白山羊36头,随机分为3组,每组4个重复,每个重复3头,每天分别提供的大豆加工废弃物量为体重的0.4%、0.8%和1.6%,试验为期19周。试验2选择妊娠1 d、平均体重为(19.29±0.38)kg的母山羊10头,随机分为2组,每组5头,分别饲喂全价配合饲料和1.6%体重的大豆加工废弃物。结果:试验1,大豆加工废弃物饲喂水平达到1.6%时,山羊干物质、粗蛋白质和代谢能摄入量分别较0.4%饲喂水平显著提高25.19%、71.63%和49.45%(P<0.05),同时干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维的消化率分别显著提高23.61%、25.98%、9.05%和40.25%(P<0.05)。随着大豆加工废弃物饲喂水平的升高,山羊日增重表现为显著升高(P<0.05)。试验2,全价料组山羊象草摄入量较大豆废弃物组显著提高42.22%(P<0.05),但粗蛋白质摄入量和日增重显著降低36.04%和21.15%(P<0.05)。大豆加工废弃物组乳羊在60 d、90 d及平均日增重较全价料组分别显著提高19.04%、24.35%和26.48%(P<0.05)。结论:徐淮白山羊的干物质、粗蛋白质和代谢能摄入量随大豆加工废弃物饲喂水平的增加而增加,但象草摄入量降低。大豆加工废弃物饲喂水平达到体重的1.6%时,对山羊采食量、日增重和繁殖性能无负面影响。     

包被共轭亚油酸对山羊瘤胃氢化、肠道及乳脂肪酸的影响

文章旨在评估日粮添加棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸对瘤胃氢化和长链脂肪酸从十二指肠到乳转化的影响。试验将12只体重(61.9±8.57)kg处于泌乳期的多胎次萨能奶山羊随机分为2组,每组6个重复,每个重复1只羊。两个试验组分别在基础日粮中补充50g棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸,试验共开展42d。结果显示,两个试验组对山羊干物质、有机物、中性洗涤纤维、淀粉摄入量及养分在十二指肠流量和瘤胃表观消化率均无显著影响(P>0.05)。与棕榈油酸钙组相比,包被共轭亚油酸组有降低干物质和中性洗涤纤维消化率的趋势(P=0.08),但处理组对淀粉消化率无显著影响(P>0.05)。山羊饲喂棕榈油酸钙或包被共轭亚油酸日粮后,脂肪酸的十二指肠流量高于脂肪酸摄入量。包被共轭亚油酸增加了C18:2trans-10,cis-12和C18:2cis-9,trans-11的十二指肠流量,导致两种脂肪酸对瘤胃的氢化保护率均达到16%。C18:1cis-9、C18:2cis-9,12、C18:3cis-9,12,15的瘤胃生物氢化不受包被共轭亚油酸处理的影响(P>0.05)。综上所述,与添加棕榈油钙相比,在奶山羊中饲喂不受瘤胃生物氢化包被共轭亚油酸对干物质、有机物、中性洗涤纤维、淀粉摄入量、十二指肠流量及瘤胃表观消化率无显著影响。包被共轭亚油酸增加了十二指肠的流量和C18:2trans-10,cis-12和C18:2cis-9,trans-11的比例,使瘤胃生物氢化保护率达到15%~16%。     

羽扇豆对生长育肥肉兔生长性能、养分消化率及屠宰性能的影响

文章旨在研究日粮添加不同蛋白原料(豆粕、葵花粕或羽扇豆)对生长育肥期肉兔生长性能、养分消化率及屠宰性能的影响。试验选择37 d断奶的肉兔120只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只兔。试验设计3种日粮,日粮中蛋白原料分别是豆粕(10%)、葵花粕(17%)和羽扇豆(15%),试验共进行6周。结果:葵花粕组较豆粕和羽扇豆组有降低肉兔总能、酸性洗涤纤维和淀粉表观消化率的趋势(P=0.06,P=0.08,P=0.09),同时中性洗涤纤维显著低于其他两组(P<0.05)。豆粕组较葵花粕和羽扇豆组有提高其他挥发性脂肪酸含量的趋势(P=0.08),同时豆粕组有提高盲肠及其内容物相对重量的趋势(P=0.09,P=0.06)。与豆粕组和葵花粕组相比,羽扇豆组显著提高了盲肠乳酸含量(P<0.05)。葵花粕组较其他组显著提高了肉兔各阶段平均日采食量(P<0.05)。葵花粕组较羽扇豆组显著提高了59~79 d肉兔的死亡率(P<0.05)。羽扇豆组较豆粕组和葵花粕组显著提高了肉兔的屠宰率(P<0.05)。结论:羽扇豆是生长育肥肉兔饲料中较好的蛋白原料,可以完全替代饲料中的豆粕,对肉兔生长性能、屠宰性能以及养分消化、盲肠相关指标无负面影响。     

高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡生长性能、养分利用率和肉质的影响

试验旨在研究高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡生长性能、养分利用率、空肠形态和肉质的影响。选取健康、体重一致的AA肉鸡864只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复36只。试验设计玉米-豆粕型、玉米-豆粕型+200 mg/kg蛋白酶、高粱-豆粕型及高粱-豆粕型+200 mg/kg蛋白酶4种日粮,试验共进行42日龄。结果显示:日粮添加蛋白酶显著提高22~42日龄和1~42日龄肉鸡日增重(P0.05);日粮添加蛋白酶显著提高19~21日龄和40~42日龄肉鸡的表观代谢能、总能和氮的利用率(P0.05);高粱型日粮有降低肉鸡表观代谢能、总能和氮利用率的趋势。日粮添加蛋白酶显著提高21日龄和42日龄肉鸡空肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比(P0.05),同时显著降低42日龄肉鸡隐窝深度(P0.05)。日粮添加蛋白酶显著提高肉鸡胸肌重量,显著降低胸肌滴水损失(P0.05)。结果表明:在本试验条件下,玉米或高粱型日粮添加蛋白酶可以提高22~42日龄和1~42日龄AA肉鸡日增重,改善1~21日龄AA肉鸡表观代谢能、干物质、总能和氮的利用率,提高肉鸡屠体、胸肌重量,降低胸肌滴水损失。     

比格犬皮肤病病原的分离与鉴定

对青岛某犬场一例比格犬皮肤病患犬进行了病原的分离培养以及鉴定。经过皮肤局部观察、寄生虫检查、真菌分离及18SrRNA基因测序、细菌分离及16SrRNA基因测序,结果显示本病例主要致病原因是寄生虫、细菌和真菌的混合感染,其中寄生虫感染以蠕形螨为主,细菌病原包括中间型葡萄球菌、链球菌和乳酸菌,真菌病原主要有隐球菌、青霉菌和念珠菌。调查结果为临床治疗提供了理论依据。     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。     

鸭源鸡杆菌gtxA突变株构建及其生物特性分析

为了了解毒素GtxA对鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis,G.anatis)生物学特性及致病性的影响,利用自然转化和正向筛选法构建了1株G.anatis gtxA缺失突变株,初步探究突变株的生物学特性。与亲本菌株比较,突变株溶血活性消失,菌落形态及生长速率并未出现显著改变,其对小鼠的致病力下降。外毒素GtxA参与G.anatis致病过程并扮演一定角色;G.anatis gtxA基因突变株的构建及其生物学特性探究为更好的了解其致病机理和研发出更为高效安全疫苗建立了理论基础。     

复合中药凝胶剂的制备

本试验以天葵子为主药,与蒲公英、苦参、白鲜皮3种中药联合使用制备复方中药凝胶剂。采用水提法提取中药的有效成分,以卡波姆-940、主药、甘油、氮酮的用量为因素,采用正交试验设计,优选复合中药凝胶剂的最佳配比,并根据2015版中国药典关于凝胶剂的质量要求,对本试验所制备的复合中药凝胶剂进行质量检查。结果显示,1.5%卡波姆940,15%主药,10%甘油,1.5%氮酮为本试验中复合中药凝胶剂的最佳组合方案。药效学试验表明,本试验所制得的凝胶剂对治疗皮肤炎症具有一定的治疗效果。     

阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O_1大鼠肠黏膜屏障的影响

作者旨在研究阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O1大鼠肠黏膜机械屏障、免疫屏障和化学屏障的影响。选用60只6～8周龄SD大鼠进行试验,分为空白对照组、未治疗组、环丙沙星组和阿如拉-7味散高(1.08g·kg^-1)、中(0.54g·kg^-1)、低(0.27g·kg^-1)剂量组,共6组,每组10只。试验结束时,计算其保护率,并采集小肠各段进行HE染色,测定小肠黏膜形态指标;同时采集血清和回肠组织,ELISA试剂盒法检测血清中的D-乳酸和二胺氧化酶(DAO)含量以及回肠黏膜中的分泌型免疫球蛋白(sIgA)和肠三叶因子(ITF)含量。结果表明:(1)阿如拉-7味散中剂量对感染致病性E.coli O_1大鼠的保护率最好,为50%;且对小肠黏膜形态有一定的改善和修复作用,其效果与环丙沙星相当;(2)环丙沙星组与空白对照组相比D-乳酸含量无显著差异(P>0.05);阿如拉-7味散高、中剂量组DAO含量与空白对照组相比无显著差异(P>0.05);(3)除阿如拉-7味散低剂量组外,其余各组与未治疗组相比回肠黏膜sIgA含量显著提高(P<0.05);未治疗组大鼠回肠黏膜ITF含量与其余各组相比显著降低(P<0.05)。结果提示,阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O_1大鼠引起的肠黏膜损伤有一定的修复作用,其中中剂量(0.54g·kg^-1)效果最佳,与抗生素环丙沙星的修复效果相当。     

病例教学法在兽医临床诊断学教学中的探索与实践

兽医临床诊断学是动物医学专业重要的专业基础课,具有很强的实践性。通过病例教学法的实施,有效的激发了学生学习兴趣,培养了学生临床思维的能力,提高了教学效果。本文结合兽医临床诊断学的特点,总结近年来的教学成果,介绍了病例教学法在课程教学中的意义、实施方法及注意事项等,以期进一步提高兽医临床诊断学的教学效果。     

纳米硒和大蒜油对公兔生长、养分消化和精液品质的影响

文章旨在探讨纳米硒、大蒜油及其组合对雄性家兔营养物质消化率、精子质量、血清睾酮和代谢产物的影响。将160只(120日龄)家兔随机分为4组,每组40只(10只/重复)。对照组饲喂基础日粮,大蒜油组在基础日粮中添加600 mg/kg大蒜油,纳米硒组在基础日粮中添加0.4 mg/kg纳米硒,大蒜油+纳米硒组在基础日粮中添加0.4 mg/kg纳米硒和600 mg/kg大蒜油,试验从120 d开展到180 d。结果表明,纳米硒处理组的末重、日增重和料重比均较未添加硒处理组的有所改善,且纳米硒和大蒜油对家兔末重的影响有一定的交互作用。与不添加硒、大蒜油、纳米硒和大蒜油混合物组相比,纳米硒、大蒜油及其混合物组的养分消化率均显著提高(P <0.05)。此外,与对照组相比,添加纳米硒和大蒜油组的精液质量显著改善(P <0.05)。同样,补充纳米硒、大蒜油及混合物可以显著改善肝脏和肾脏功能,提高血清睾酮水平。综上所述,纳米硒或大蒜油及其组合可以提高雄性家兔的营养物质消化率、精液质量、肝肾功能和睾酮水平。     

花椒籽发酵做固体饲料的研究

花椒籽中含有大量蛋白质和油脂,但也含有酰胺类(麻味)物质。本文通过对实验室保藏菌种的培育和筛选,确定降解花椒酰胺类物质的菌种,并通过正交试验,将菌种在适宜条件下继续各自单独培养及混合培养。结果表明:产朊假丝酵母(Candida utilis)及白地霉(Geotrichum candidum)的混合菌种降解花椒酰胺类物质的效果最好。经过重复试验验证,菌种的最佳降解生长条件为:温度28℃,料液比1:1,接种量10%,时间24h。生长元素添加最佳条件为:(NH4)2SO40%,KH2PO40.2%,MgSO40.01%,葡萄糖0.5%。花椒酰胺类物质平均残留量为3.5776mg/g。     

牛支原体EF-Tu基因的克隆表达、亚细胞定位及间接ELISA方法建立

旨在获得牛支原体延伸因子EF-Tu蛋白,分析其在牛支原体菌体内的分布情况,建立EF-Tu间接ELISA法,为进一步研究牛支原体EF-Tu的生物学功能提供理论依据,也为建立牛支原体有效的血清学诊断方法和亚单位疫苗的研制奠定基础。参照Uniprot数据库中M.bovis PG45株EF-Tu基因序列,应用Overlap PCR扩增获得EF-Tu基因并将其克隆至pMD19-T载体,测序正确后,构建pET32a-EF-Tu原核表达载体,转化大肠杆菌BL21表达菌,IPTG诱导表达,纯化后的表达产物免疫新西兰兔(New Zealand rabbit)制备多克隆抗体,利用间接ELISA测定高免血清抗体效价,用Western blot和间接ELISA法初步定位EF-Tu在菌体内的分布,通过优化反应条件,建立间接ELISA检测法。结果表明:重组蛋白EF-Tu约为66ku,主要以可溶性形式表达;采用间接ELISA测定的多克隆抗体效价为1:6400;Western blot和ELISA表明该蛋白在牛支原体细胞质和细胞膜中均有表达,且含量相当。利用EF-Tu建立的ELISA法具有很好的特异性和敏感性。通过原核表达系统成功得到牛支原体延伸因子的重组蛋白,该蛋白分布于菌体细胞质和膜表面,且含量基本相当。本研究所建立的EF-Tu ELISA法适合大规模的血清学诊断检测。     

紫花苜蓿和黑麦草混合青贮过程中主要营养物质变化规律研究

为研究紫花苜蓿和黑麦草混合青贮过程中主要营养物质的变化规律,试验以贵州省常见紫花苜蓿和黑麦草按70∶30比例混合青贮,测定青贮第0、14、21、28、42、72、84、100、114、128、142d的主要营养物质含量。结果:从0~142d,随着青贮时间的延长,青贮饲料干物质中的粗蛋白含量逐渐降低,下降12.00%(P<0.05);中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量也呈逐渐下降趋势,分别降低17.87%、17.70%(P<0.05);粗灰分含量呈上升趋势,上升29.31%(P<0.05)。结果表明:青贮过程中随着青贮时间的延长会导致蛋白质流失,但也降低了纤维素水平,增加了青贮饲料的可消化性。