熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

【目的】研究熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用,为熟地黄多糖用于临床治疗免疫低下疾病或开发相关保健食品提供科学依据。【方法】选用36只昆明系小鼠,随机分为6组:空白对照组、免疫抑制模型组、黄芪多糖组及熟地黄多糖低、中、高(分别灌胃熟地黄多糖50、100、200 mg/kg)剂量组(PRRPL、PRRPM、PRRPH),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1 次/d,连续15 d,测定小鼠体重、腹腔巨噬细胞吞噬能力、免疫器官系数、脾淋巴细胞增殖及细胞周期、血清细胞因子含量,观察脾脏和胸腺组织形态学、肠道派氏节数目等免疫指标。【结果】与空白对照组相比,模型组脾脏指数极显著升高(P＜0.01),脾脏红髓、白髓界限不清,脾淋巴细胞数量减少;胸腺指数降低,皮质、髓质不清,结构破坏;脾淋巴细胞增殖能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、γ-干扰素(INF-γ)水平均显著或极显著降低(P＜0.05;P＜0.01);脾淋巴细胞滞留在G0/G1期。与模型组相比,熟地黄多糖能极显著降低小鼠的脾脏指数(P＜0.01),缓解环磷酰胺造成的脾脏组织损坏,熟地黄多糖各剂量组对脂多糖(LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖具有极显著的促进作用(P＜0.01),熟地黄多糖各剂量组能显著或极显著提高免疫抑制小鼠血清IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、INF-γ水平(P＜0.05;P＜0.01),缓解淋巴细胞周期滞留,且高剂量组熟地黄多糖能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P＜0.05)。造模前后及熟地黄多糖对肠道派氏结数量均无显著影响(P＞0.05)。【结论】熟地黄多糖能提高免疫抑制小鼠的免疫功能,可用于治疗免疫低下类疾病药物和保健品的开发。     

玉屏风多糖影响小鼠淋巴细胞归巢的组织学效应

通过研究玉屏风多糖对免疫损伤小鼠外周免疫器官和淋巴细胞归巢的影响,以及激活淋巴细胞后的组织学效应,探讨其临床药效的组织学基础。180只SPF小鼠随机分为6组,复制免疫抑制模型,灌服不同剂量玉屏风多糖,检测血常规、淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性,观察主要组织器官淋巴细胞的数量和分布等。结果显示,玉屏风多糖可使免疫抑制小鼠全血白细胞总数增多(P0.05),淋巴细胞数量和百分比上升(P0.05),淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性升高(P0.05或P0.01);促进外周淋巴器官(脾脏)淋巴组织的显著增生,肠黏膜相关淋巴组织归巢过程明显;非淋巴组织以肺脏的淋巴细胞归巢表现突出,对肝脏和肾脏也有一定影响。玉屏风多糖可激活小鼠脾淋巴细胞活性,促进脾脏淋巴细胞增殖,干预淋巴细胞的再循环和归巢过程,并可由此缓解和改善环磷酰胺诱导的免疫损伤。     

太子参参须多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

为研究太子参参须多糖(RPFRP)对免疫抑制小鼠功能的影响,腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫抑制模型小鼠,灌胃RPFRP,称量计算器官指数(脾指数和胸腺指数),碳粒廓清法测定巨噬细胞功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测细胞因子含量。结果显示,RPFRP能下调免疫功能低下小鼠的脾脏指数,上调胸腺指数、碳粒廓清指数K和细胞因子IL-2、IFN-γ含量。说明RPFRP能通过改善免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、特异性细胞免疫和体液免疫功能,增强免疫功能低下小鼠的免疫功能。     

芒柄花素对免疫抑制小鼠免疫功能影响的研究

本研究旨在探讨芒柄花素对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。将100只昆明种小鼠随机分为5组：空白对照组、免疫抑制组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,每组20只（雌雄各半）,采用灌胃法给药。试验期28 d,试验1~7 d,对照组小鼠灌胃0.6 mL生理盐水,其余各组小鼠均灌胃0.6 mL 40 μg/g体重环磷酰胺（CTX）;试验8~21 d,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠分别灌胃0.6 mL 50、150、250 μg/g体重芒柄花素溶液,空白对照组与免疫抑制组灌胃0.6 mL生理盐水。试验结束后,测定小鼠脏器指数（胸腺、脾脏）、血清溶血素及IL-2、IL-4含量。采用免疫组化法检测小鼠胸腺、脾脏CD3和CD20阳性淋巴细胞,肝脏CD68阳性KCs细胞。结果表明,环磷酰胺可成功复制小鼠免疫抑制模型。不同剂量芒柄花素均能提高免疫抑制小鼠胸腺和脾脏指数、血清溶血素及血清IL-2和IL-4含量,尤其当芒柄花素灌胃剂量为150 μg/g体重时效果最为明显,与免疫抑制组差异极显著（P<0.01）。免疫组化分析结果显示,不同剂量芒柄花素均可提高免疫抑制小鼠胸腺和脾脏CD3阳性T淋巴细胞及CD20阳性B淋巴细胞数量,并促使肝脏CD68阳性KCs细胞增殖,也以试验Ⅱ组效果最显著,与免疫抑制组差异极显著（P<0.01）。综上,芒柄花素可促进小鼠相关淋巴细胞增殖和细胞因子的释放,进而增强机体体液免疫和细胞免疫功能,并可明显促进肝脏固有吞噬细胞KCs增殖。     

加味玉屏风汤对免疫抑制小鼠免疫器官的保护效应

应用动物试验和病理组织学方法,研究了传统中药方剂加味玉屏风汤对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾和胸腺等免疫器官的保护作用。结果表明,加味玉屏风汤能明显拮抗环磷酰胺所致脾白髓、骨髓造血组织和胸腺淋巴细胞容量下降（Ｐ〈０．０１）,能显著升高下降的胸腺和脾指数（Ｐ〈０．０１）及减少的外周血白细胞和体重（Ｐ〈０．０１）;同时对健康小鼠以上指标也有不同程度的促进作用,提示加味玉屏风汤对脾和胸腺等免疫器官具有一定的     

螺旋藻抗炎和免疫增强作用的研究

试验旨在探讨螺旋藻抗炎作用及其对机体免疫功能的影响。试验通过二甲苯致小鼠耳肿胀,构建小鼠体内炎症模型,以地塞米松为阳性对照药物,以小鼠耳肿胀为观察指标,探讨螺旋藻的体内抗炎作用;通过环磷酰胺构建小鼠免疫抑制模型,以不同剂量螺旋藻处理后测定免疫抑制小鼠及正常小鼠的脏器指数、血清白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）水平,同时结合脾脏及胸腺病理组织学观察,探讨螺旋藻对免疫抑制小鼠及正常小鼠免疫功能的影响。结果表明,在螺旋藻对小鼠体内抗炎作用影响的试验中,0.3%螺旋藻灌胃对小鼠耳肿胀的抑制率极显著高于地塞米松对照组和其他螺旋藻处理组（P<0.01）,且螺旋藻对各试验组小鼠的脏器指数无不良影响,差异不显著（P>0.05）;在螺旋藻对小鼠免疫功能影响试验中,与空白对照组相比,环磷酰胺阳性对照组脾脏指数和胸腺指数极显著下降（P<0.01）;肝脏指数极显著上升（P<0.01）,其它各剂量螺旋藻处理组小鼠胸腺指数跟空白对照组相比差异不显著（P>0.05）,各组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平差异不显著（P>0.05）;通过病理组织学观察发现,环磷酰胺阳性对照组小鼠的脾小体萎缩、胸腺小体减少、淋巴细胞及网状细胞变性坏死,而各剂量螺旋藻处理组的脾小体和胸腺小体结构清晰完整、淋巴细胞增多。综上,螺旋藻能降低地塞米松和环磷酰胺对小鼠的免疫抑制,并且能修复小鼠脾脏和胸腺损伤,说明其在抗炎和缓解免疫抑制方面具有一定的作用。     

沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠免疫功能及胸腺和脾超微结构的影响

旨在深入探讨沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠的免疫功能及胸腺和脾超微结构的影响。将100只昆明种小鼠随机分为5组:空白对照组、免疫抑制组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,每组20只(雌雄各半),采用灌胃法给药,前7d,免疫抑制组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组与试验Ⅲ组小鼠均灌胃0.6mL环磷酰胺溶液;后21d,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别灌胃0.6mL黄酮剂量为50、150、250mg·(kg·d)~(-1)的总黄酮溶液,未明确写出的组别和时间点在上述给药时段相应灌胃0.6 mL生理盐水。试验28d后,分别测定碳粒廓清指数和脏器指数(胸腺、脾)及小鼠血清IL-2、IL-4含量。同时,采用扫描电镜观察脾和胸腺结构。结果表明,灌胃环磷酰胺可复制小鼠免疫抑制模型。不同剂量的沙冬青种子总黄酮能不同程度提高免疫抑制小鼠胸腺和脾指数、碳粒廓清指数、吞噬指数以及血清IL-2和IL-4含量,尤其试验Ⅱ组,总黄酮灌胃剂量为150mg·(kg·d)~(-1),其效果最为突出,与免疫抑制组比较均差异极显著(P0.01)。电镜观察显示,沙冬青种子总黄酮不同剂量试验组小鼠胸腺、脾中成熟淋巴细胞数量与免疫抑制组小鼠比较均不同程度增多,尤其试验Ⅱ组中成熟淋巴细胞数量增多最明显(P0.01),且淋巴细胞排列紧密,与周围间质间隙明显减少。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮可通过促进免疫器官淋巴细胞的增殖和成熟,改善和修复受损免疫器官组织结构,从而达到改善和增强免疫抑制小鼠免疫功能的作用,且在一定范围内具有剂量依赖效应。     

复方天门冬多糖注射液对小鼠免疫功能影响的观察

为研究复方天门冬多糖注射液对小鼠免疫功能的影响,采用环磷酰胺(CTX)作为抑制剂建立小鼠免疫抑制模型,注射不同配比的复方天门冬多糖注射液,测定小鼠胸腺和脾脏脏器指数、血清白细胞介素2(IL-2)水平及腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,并从组织形态上观察胸腺与脾脏的结构变化。结果表明,复方天门冬多糖注射液对小鼠胸腺指数和脾脏指数无显著影响;复方天门冬多糖Ⅳ组可以极显著提高小鼠血清中IL-2的水平(P<0.01);复方天门冬多糖Ⅰ组、Ⅳ组极显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力(P<0.01);复方天门冬多糖能不同程度地减缓环磷酰胺所致小鼠胸腺和脾脏的萎缩,增加胸腺皮质细胞数量,保持脾小结完整和增加脾淋巴细胞数量。表明复方天门冬多糖对小鼠的非特异性免疫功能具有一定的促进作用。     

黄芪灵芝口服液对雏鸡免疫功能的影响

为了研究黄芪灵芝口服液对雏鸡免疫功能的促进作用,将180只7日龄雏鸡随机分成9组,1~3组为黄芪灵芝口服液高、中和低剂量组;4~6组分别是环磷酰胺(CY)+黄芪灵芝口服液高、中和低剂量组;7~9组分别为环磷酰胺组、阳性对照组及生理盐水组。分别于用药后5、10 d和15 d测定免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖及血清中IL-2水平。结果表明,黄芪灵芝口服液高、中、低剂量组的胸腺指数显著高于生理盐水组,与环磷酰胺共处理各组的胸腺指数均显著高于CY组(P0.05)。高、中剂量组的脾脏指数显著高于生理盐水组(P0.05)。高、中、低剂量组脾淋巴细胞增殖及IL-2水平显著高于生理盐水组;与环磷酰胺共处理组淋巴细胞刺激指数和IL-2水平显著高于CY模型组(P0.05)。黄芪灵芝口服液对雏鸡免疫功能具有促进作用,在一定程度上能有效拮抗环磷酰胺引起的免疫抑制,可望作为一种免疫增强剂。     

玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用研究

研究玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用。将120只1日龄雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、玉竹多糖对照组、玉竹多糖调节组、板蓝根多糖对照组、板蓝根多糖调节组、免疫抑制对照组,除空白对照组外,其余各组在7日龄时饮水免疫鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)。测定免疫后不同阶段雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量和外周淋巴细胞OD570 nm值,以及脾脏指数和法氏囊指数。结果显示,环磷酰胺造模后,可见环磷酰胺抑制对照组抗体滴度持续处于较低的状态,血清IgA含量较低,外周淋巴细胞增殖受抑制,免疫器官指数较低;在免疫后14 d、21 d、28 d和35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清抗体滴度显著高于免疫抑制对照组(P<0.05);在免疫后21d、35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清IgA含量、外周淋巴细胞OD570 nm值和免疫器官指数显著高于免疫抑制对照组(P<0.05)。本试验结果表明,玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺造模形成免疫抑制雏鸡免疫系统具有调节功能,可解除免疫抑制,使免疫系统恢复至正常水平,能够提高雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量,增强外周淋巴细胞增殖。     

鬼臼多糖的分离纯化及药理学活性

目的：分离纯化鬼臼多糖（PEP）,测定PEP的单糖组成,观察PEP对小鼠脾脏、胸腺指数、溶菌酶含量及脾脏淋巴细胞增殖的影响.方法：用热水抽提及醇沉法纯化鬼臼多糖,采用纸层析法和红外光谱对PEP的组成进行研究,用比浊法测溶菌酶含量,用MTT法研究PEP对脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果：PEP的得率为60%,PEP含有葡萄糖、果糖、甘露糖、和阿拉伯糖,红外光谱扫描表现出一般多糖类物质的特征吸收峰.PEP能够提高脾脏指数,但对胸腺指数和血清中的溶菌酶含量的影响不明显.MTT结果显示,PEP能够显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且与ConA有协同作用.     

中药复方制剂产复康对小鼠的抗氧化作用研究

为了评价产复康的抗氧化作用,用环磷酰胺造成免疫抑制小鼠模型,将产复康分别以10、15、20g／kg体重三个不同剂量给模型小鼠连续灌胃9d后,测定了模型小鼠脾脏和胸腺组织中、总抗氧化能力（TAOC）、超氧化物岐化酶（SOD）和丙二醛（MDA）以及血清溶血素、脾脏和胸腺指数。结果发现产复康分别以10、15、20g／kg体重三个不同剂量均能显著提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾脏和胸腺TAOC水平、SOD活性、血清溶血素、脾脏和胸腺指数,而显著降低小鼠脾脏和胸腺MDA水平,且呈剂量-效应关系;正常小鼠单独服用产复康也产生相同结果。结果说明产复康能提高健康小鼠的抗氧化能力。     

左旋咪唑党参多糖对雏鸡免疫调节效果的研究

210羽7日龄蛋公鸡随机均分成7组,每组30只,1～3组口服高、中、低浓度的左旋咪唑党参多糖水溶液,4～6组口服高、中、低浓度的党参多糖水溶液,7组为对照组,口服生理盐水。用2羽份的新支二联弱毒苗点眼、滴鼻,并用新城疫油乳灭活苗皮下注射。用微量法测定新城疫血凝抑制（HI）抗体效价,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,称取体重和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,左旋咪唑党参多糖组和党参多糖组的抗体效价均显著高于对照组,左旋咪唑党参多糖组的抗体效价显著高于党参多糖组。试验组的OD值显著高于对照组,左旋咪唑党参多糖组的OD值显著高于党参多糖组。左旋咪唑党参多糖和党参多糖都可以提高胸腺、法氏囊和肾脏指数,但是以左旋咪唑党参多糖组效果好,尤其高剂量组更为明显。     

怀牛膝多糖对雏鸡疫苗免疫效果的影响

150羽14日龄蛋公鸡随机均分成3组,用新支二联弱毒苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的怀牛膝多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天注射1次,连续注射3次。分别于免疫后第7、14、21、28、35和42天各组随机抽取8只鸡翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制（HI）抗体效价,于免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5只鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,流式细胞仪双染色法检测CD^4＋、CD^8＋T淋巴细胞含量,并放血致死称取体重和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,怀牛膝多糖高剂量组的HI抗体效价、CD^4＋/CD^8＋比值和免疫器官指数都明显高于对照组,并且高剂量怀牛膝多糖可以显著促进T淋巴细胞增殖。提示怀牛膝多糖对鸡新支二联疫苗的免疫效果有明显的增强作用。     

桃金娘果多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

【目的】 探讨桃金娘果多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。【方法】 腹腔注射环磷酰胺80 μg/g BW, 1次/d, 连续3 d, 建立小鼠免疫抑制模型。将造模成功的小鼠随机分为5组(每组16只): 模型组、黄芪多糖组、桃金娘果多糖低、中、高剂量组。另设16只健康小鼠为正常组。黄芪多糖组每只小鼠按200 μg/g BW剂量腹腔注射黄芪多糖混悬液, 桃金娘果多糖低、中、高剂量组分别按50、100、200 μg/g BW剂量腹腔注射桃金娘果多糖混悬液, 正常组和模型组每只小鼠腹腔注射等体积的生理盐水, 1次/d, 连续7 d。试验结束后, 分别测定小鼠脏器指数(胸腺、脾脏)、血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、溶菌酶(LZM)的含量和过氧化物酶(POD)活性。【结果】 桃金娘果多糖不同剂量组小鼠胸腺指数和脾脏指数均有不同程度提高, 尤以桃金娘果中剂量组最高, 与模型组相比差异极显著(P<0.01)。桃金娘果多糖不同剂量组IL-6、IL-1β血清细胞因子含量均极显著高于模型组(P<0.01);桃金娘果多糖低、中剂量组的血清IFN-γ、IL-2含量相较于模型组都有所提升, 但差异均不显著(P>0.05), 桃金娘果多糖高剂量组的IFN-γ、IL-2含量均极显著高于模型组(P<0.01)。桃金娘果多糖不同剂量组小鼠的POD活性和LZM含量均极显著或显著高于模型组(P<0.01;P < 0.05)。【结论】 桃金娘果多糖中剂量即100 μg/g BW对免疫抑制小鼠免疫功能的恢复效果最佳。     

黑木耳多糖对小鼠免疫功能的影响

从黑木耳中提取多糖,研究其对小鼠免疫功能的影响。通过灌胃的方法检测不同剂量黑木耳多糖对小鼠免疫器官发育、溶血素生成和巨噬细胞吞噬功能的影响。结果显示,黑木耳多糖可明显提高小鼠脾脏和胸腺指数,促进脾脏及胸腺的发育,促进巨噬细胞的吞噬活性,明显增强小鼠的体液免疫功能。研究表明黑木耳多糖具有明显的增强小鼠免疫功能的作用。     

不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响

试验旨在比较不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响。用不同浓度乙醇醇沉桑叶水提物,制备桑叶粗多糖MLP-1、MLP-2、MLP-3、MLP-4、MLP-5,采用苯酚硫酸法测定各提取物多糖含量。以5种桑叶粗多糖和桑叶水提物（MLAE）为试验药物,采用MTT法比较多糖含量分别在15.625、31.25、62.5、125、250 μg/mL浓度时各提取物单独刺激及协同LPS、PHA共同刺激小鼠脾脏B、T淋巴细增殖的变化。结果显示,多糖浓度在15.625~250 μg/mL范围内,各提取物无论单独还是协同LPS和PHA时均能促进小鼠脾脏B、T淋巴细胞的增殖,其中,MLP-1多糖含量在低浓度时能显著刺激脾脏B淋巴细胞增殖（P<0.05）;MLP-3和MLP-5在低浓度时表现出较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;MLAE协同LPS在大部分浓度点的脾脏B淋巴细胞的增殖能力均显著高于细胞对照组和LPS对照组,可显著提升体液免疫功能（P<0.05）。     

Effect of Different Mulberry Leaf Extracts on Spleen Lymphocyte Proliferation in Mice

This experiment was aimed to compare the effects of different mulberry leaf extract on spleen lymphocyte proliferation in mice. Mulberry leaf polysaccharides (MLP-1, MLP-2, MLP-3, MLP-4 and MLP-5) were prepared with mulberry leaf aqueous extract (MLAE) by different concentration of alcohol deposit, polysaccharides concentration of all extracts were determined by phenol sulfuric acid method. Five different MLPs and MLAE were as the experimental drug, when polysaccharide concentration was 15.625, 31.25, 62.5, 125 and 250 μg/mL, the changes of spleen B and T lymphocytes proliferation in mice which were stimulated by MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation of drugs with LPS and PHA were determined by MTT method. The results showed that when polysaccharide concentration was in the range of 15.625 to 250 μg/mL, MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation with LPS and PHA could stimulate the spleen B and T lymphocytes proliferation, MLP-1 at low concentration could stimulate significantly spleen B lymphocyte proliferation remarkably (P<0.05), and MLP-3 and MLP-5 at low concentrations showed strong stimulation ability of T lymphocyte proliferation. When MLAE was in synergistical stimulation with LPS at most concentrations points, the spleen B lymphocytes proliferation in mice were significantly higher than those of the cell control and LPS control groups, which revealed that MLAE could significantly improve the humoral immune function (P<0.05).