仔猪雷极氏普罗菲登斯菌的分离鉴定及系统进化分析

为了解猪雷极氏普罗菲登斯菌(P.rettgeri)的生物学特性、致病性及16SrRNA基因系统进化关系,从发生严重腹泻、血便的哺乳仔猪群的内脏器官中分离到1株病原菌,根据形态特征、培养特性、生化特性、16SrRNA基因序列分析鉴定为P.rettgeri。小鼠攻毒试验证实,该分离菌株对试验小鼠有较强致病力,哺乳仔猪回归试验可复制出与临床上相似的典型症状,并从发病死亡小鼠及哺乳仔猪中分离到攻毒菌株。系统进化分析表明,分离菌株与雷极氏普罗菲登斯菌系统进化关系最为密切,其16SrRNA基因序列与雷极氏普罗菲登斯菌代表菌株的同源性在97.3%~99.6%之间。药敏试验结果表明,分离菌株对头孢哌酮钠、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢唑啉、头孢呋肟、头孢吡肟、阿莫西林、链霉素、氨曲南、诺氟沙星、左氟沙星、恩诺沙星、卡那霉素、氨苄青霉素、米诺环素、链霉素、阿米卡星等多数药物敏感。首次报道了雷极氏普罗菲登斯菌可以引起哺乳仔猪严重腹泻,提示在仔猪腹泻中应注意该菌感染的诊断、监测和防控。     

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。     

应用正交试验优化猪细小病毒N株在IBRS-2细胞转瓶培养

利用正交试验对猪细小病毒(PPV)N株在IBRS-2细胞转瓶培养中的培养条件进行优化,为PPV N株弱毒疫苗的大量培养工艺提供参考.设细胞培养液pH值(7.0、7.2和7.4)、接毒时间(0、24和48 h)、接毒剂量(0.10％、1.00％和10.00％)、收毒时间(48、72和96 h)等因子和水平.结果表明,PPV N株转瓶培养的最佳培养条件组合为细胞培养液pH值7.2,采用同步接毒,接毒剂量为0.10％,收毒时间为接毒后96 h.其中收毒时间是影响PPV N株毒价的最主要因素.     

桂科育成猪血常规指标的测定分析

【目的】检测桂科育成猪的血常规指标,明确不同功能细胞(红细胞、白细胞和血小板)的数量变化及形态分布情况,为桂科猪的免疫评估与抗病性能研究提供基础数据。【方法】于49日龄起每周对44头桂科育成猪(公母各半)采血1次,连续采样7周,测定其血常规指标,并与长白猪和恩施黑猪的血常规指标进行比较分析。【结果】在桂科育成猪不同日龄的红细胞类检测指标中,红细胞计数(RBC)和血红蛋白含量(HGB)均在70日龄达最低值(6.85×1012/L和97.1 g/L),显著低于49、56、63、84和91日龄时的对应值(P0.05,下同);平均红细胞血红蛋白(MCH)和平均血红蛋白浓度(MCHC)的变化规律基本一致,均在70日龄达最低值(15.11 pg和275.70 g/L)、91日龄达最高值(16.40 pg和314.30 g/L);红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)和红细胞体积分布宽度(RDW)的变化相对较稳定,不同日龄间均无显著差异(P0.05,下同)。在白细胞类检测指标中,白细胞计数(WBC)于63日龄达最低值(13.71×10~9/L)、84日龄达最高值(17.52×10~9/L),二者差异显著;中性粒细胞计数(NEUT)在70日龄时达最低值(3.61×10~9/L),显著低于49和56日龄的对应值。淋巴细胞计数(LYMPH)的变化相对较稳定,受日龄增长的影响不显著。在血小板类检测指标中,血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)及血小板平均分布宽度(PDW)在不同日龄的变化相对较稳定,受日龄增长的影响不显著。与35日龄长白猪和5月龄以上恩施黑猪相比,桂科育成猪除HCT、平均血小板体积(MPV)、PCT和PDW等少数指标表现异常外,其他大部分血常规指标介于长白猪与恩施黑猪血常规指标范围内。【结论】桂科育成猪在血常规指标方面有一定的独特性,发育至49~91日龄时已具备较稳定的免疫系统。     

估测活猪瘦肉量简易方法的研究

根据74头杜长嘉商品瘦肉猪的七个活体性状和宰后胴体瘦肉量的测定资料,应用通径分析选择最优多元回归的电算程序(Sharp pc—1500电算机),通过对每个性状(Xi)的严格的显著性检验,最后筛选出由宰前活重(X_1)、腹围(X_2)、6—7肋间背膘厚(X_6)组成的估测胴体瘦肉量的“最优”回归方程: Y=11121.96+432.49X_1-142.33X_2+172.54X_6 该方程的R=0.92,准确性较高。基本符合简单易行、准确可靠的设计要求。可供食品、外贸部门收购评级杜长嘉猪时试用。     

马尾藻多糖分离提取及抗氧化活性初步观察

以马尾藻为原料,分别采用水提醇沉、超声波破壁、微波处理、酶法提取4种方法分离提取马尾藻多糖,比较不同提取方法对多糖提取率的影响.通过皮下注射地塞米松或配合马尾藻多糖腹腔注射处理小鼠后,测定胸腺指数、脾脏指数,以及血清中IL-6、TNF-α和胸腺组织匀浆中GSH含量,观察马尾藻多糖对小鼠细胞因子及体内抗氧化能力的影响;通过清除羟自由基、超氧阴离子和抑制红细胞溶血试验观察马尾藻多糖体外抗氧化活性.结果表明,在4种提取方法中,酶法提取率最高.马尾藻多糖处理小鼠后,胸腺中GSH和血清中IL-6、TNF-α的含量随多糖浓度的增加而升高;马尾藻多糖清除羟自由基和对抗过氧化氢溶血的能力随着浓度的增加而升高,且对超氧阴离子具有一定的清除作用.马尾藻多糖具有提高机体细胞因子水平和抗氧化作用,具有开发利用价值.     

除草剂对水稻免耕抛秧药害的预防

1 选用对口的除草剂 农达、农民乐、克无踪等遇土即产生钝化作用,丁 (丙 )草胺为芽前除草剂,对秧苗相对较安全;草甘磷、二甲四氯、百草枯等残效期长、成本低,二甲四氯对水生杂草有特效.应根据稻田环境及季节要求选用.     

3种替抗添加剂对断奶仔猪生长性能和血液生理生化的影响

试验旨在研究酸化剂、益生菌、中药3种替抗添加剂对仔猪生长性能和血液指标的影响。试验分为5个试验组,A组为空白对照组、B组为酸化剂组、C组为益生菌组、D组为中药组、E组为抗生素组,为期30 d。结果显示,试验组和对照组各项生长指标均无显著差异(P0.05),大部分生化指标前后期呈差异性变化;B组RBC总数显著高于C组(P0.05),极显著高于D组(P0.01),试验后与A、E组相比,B、C、D组WBC含量比试验前极显著升高(P0.01)。3种添加剂可改善仔猪生长性能,中药效果最佳;通过提高仔猪红细胞免疫功能以改善断奶应激反应,酸化剂效果最明显。     

四价抗病虫除草剂RNAi植物表达载体构建与转化甘蔗研究

甘蔗是重要的能源作物和糖料作物,面临病虫害日益严重问题。由于甘蔗遗传背景非常复杂,且缺乏必要种质,难以通过杂交培育抗病虫、除草剂聚合品种。基因工程技术提供了新方法。本研究利用BLAST比对获得甘蔗花叶病毒ScMV-CP基因和黄叶病毒ScYLV-CP基因的保守序列作为干扰序列,通过设计内切酶位点、生物合成和连接,获得全长687 bp的两个保守序列融合片段（MYCP）。并将其正向和反向插入中间载体pHANNIBAL上,形成双价病毒干扰结构。再通过在pHANNIBAL上添加SmaⅠ内切酶位点,将双价病毒干扰结构表达框和Cry1AC基因表达框结合;利用NotⅠ酶切,回收双价病毒干扰结构和Cry1AC基因表达框片段,连接到添加Bar基因表达框的表达载体pART27-Z上,构建了抗病虫及除草剂四价植物表达载体（pART27-MYCP-Cry1AC）。采用基因枪法将构建好的四价植物表达载体转入甘蔗品种FN15的胚性愈伤组织中,通过PPT（草丁膦）筛选获得了抗性再生甘蔗植株,经过PCR、定量以及Bt蛋白试纸检测,获得同时整合四种目的基因并表达的四价转基因甘蔗植株,为培育多抗甘蔗新品种提供了材料。