低血凝价新城疫LaSota株病毒免疫原性的研究

用血凝价分别为0、7、8的三批新城疫LaSota株病毒制备的油乳剂疫苗免疫60日龄蛋鸡,疫苗免疫10d后HI抗体水平平均值分别为3.9Log2、5.2Log2、5.9Log2,免疫后20dHI抗体水平升到高峰(4.0Log2、8.1Log2、7.9Log2),免疫60d后用剂量为100ELD50的同种毒攻击。结果表明,血凝价为0的新城疫LaSota株病毒抗原制备的油乳剂免疫效果较差,不能抵御病毒的攻击,但血凝价为7和8的两批病毒抗原能抵御病毒的攻击,并与血凝价为9的病毒抗原的免疫原性无显著差异。     

猪“O”型口蹄疫基因工程苗免疫猪的免疫效力、安全性及抗体消长

对猪“Ｏ”型口蹄疫基因工程疫苗进行免疫效力和安全性的观察,同时检测了免疫猪的抗体消长。结果表明,该基因工程疫苗对猪体是安全、有效的。免疫猪抗体乳鼠中和指数在免疫后４个月仍可达２．０,血凝价仍达２７．５。     

鸡新城疫双相油乳剂苗与油包水型油佐剂疫苗的免疫效果比较

用自制的鸡新城疫水包油包水型双相油乳剂疫苗中试产品与市售鸡新城疫油包水型油乳剂疫苗按同样的免疫程序分别接种饲养条件完全相同的两个鸡群，接种7天、14天、21天分别测定其血清效价，水包油包水型双相油乳剂疫苗免疫鸡群的血清抗体产生较快，鸡群的抗体水平较高，也较整齐。     

新剂型兔瘟疫苗的研究

经血凝抑制和攻毒试验结果表明，在含有相同抗原量制备的疫苗，兔瘟油乳剂灭活疫苗比兔瘟组织灭活苗免疫后血清ＨＩ抗体效价高３．２５￣６．０ｌｏｇ２，即使油乳剂灭活疫苗仅为组织灭活苗四分之一的抗原量，免疫后血清ＨＩ抗体效价还高１ｌｏｇ２。油乳剂灭活苗免疫兔第５０天其血清ＨＩ抗体未见下降，而组织灭活苗免疫后第２６天已开始下降。虽然接种二种剂型的疫苗攻毒后均具有１００％的保护率，但血清ＨＩ抗体效价消长情况证明     

兔瘟油乳剂灭活疫苗免疫效果初探

本实验采用常规血凝抑制试验对兔瘟油乳剂灭活疫苗和组织灭活疫苗在兔体内抗体消长进行检测，并分析比较了两种疫苗的抗体水平及消长规律。结果表明：油乳剂灭活疫苗与组织灭活疫苗在各自抗体最高峰时存在极显著差异（Ｐ＜０．０１），即兔瘟乳剂灭活疫苗在５０天时产生的抗体极显著地高于兔瘟组织灭活疫苗最高峰时的抗时水平，这一结果为兔瘟油乳剂灭活疫苗生产上的应用提供了理论依据。     

大肠杆菌菌毛油乳剂苗的实验研究

利用加热法对一株用牛心琼脂培养的当地产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）进行了宿主特异性菌毛的提取，并用该菌毛制成的油乳剂苗进行了家兔免疫试验。用甘露糖抵抗血凝反应（MRHA）及血凝抑制试验（HI）检测了菌毛的表达效果及抗体含量。结果显示，菌毛的血凝价为1：512，抗体滴度为1：64。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

新城疫疫苗不同免疫程序对商品肉鸡免疫效果影响的分析

为了制定科学有效的鸡新城疫疫苗免疫程序,提高免疫效果,减少鸡只的应激反应,本研究设计了4种免疫程序,即禽流感-新城疫重组二联活疫苗、鸡新城疫灭活油乳剂疫苗分别单独免疫和共同交叉免疫,通过血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验对以上组别进行免疫效果检测和母源抗体消长分析。结果表明:商品肉鸡15日龄为最佳疫苗接种时点,首免接种禽流感-新城疫重组二联活疫苗,35日龄和55日龄分别加免新城疫灭活油乳剂疫苗,这种免疫程序可维持稳定持久的抗体水平,且大大减少鸡只的应激反应和养禽户的投资成本。     

农牧区散养家禽禽流感疫苗免疫后抗体水平检测

为了查明现用禽流感疫苗对农牧区散养家禽的保护效果，探讨合理有效的免疫方案，应用血凝抑制试验（HI）对沙湾县农牧区农户散养的家禽进行禽流感抗体检测结果表明，在禽流感疫苗免疫后21d，采集的全县16个乡（镇）场240户散养户的1200份血清中，541份样品血凝抑制价低于4log2，对散养家禽的保护力有待进一步提高。     

鸡传染性支气管炎腺胃型-肾型二价油乳剂苗的研究

腺胃型传支(GIB)JB9702株和肾型传支(KIB)SN9301株为制苗病毒株,分别经鸡胚繁殖后甲醛灭活,加入油佐剂中乳化制成GIB-KIB二价油乳剂灭活苗。对疫苗的安全性、稳定性和保存期等进行了测定,并进行了免疫试验。结果表明:疫苗安全稳定,易于保存;疫苗用于鸡群免疫,注射后15d产生免疫(HI抗体5.6Log2～6.8Log2),21d抗体达峰值(HI抗体9.0Log2～10.7Log2),40d对相应强毒攻击的保护率为93.3%～100%。     

血清中IBV特异性IgG及总IgG含量变化规律的研究

本研究采用间接酶联免疫吸附试验对人工感染鸡传染性支气管炎病毒的SPF鸡血清中特异性抗体及总IgG含量进行检测并比较其相关性.结果表明感染IBV-M41第1 d、3 d、5 d、7 d、10d、14d、21 d、28 d的血清中特异性抗体水平随感染天数增加而升高,于第14天达到最高,之后略呈降低趋势,与健康对照比较差异显著(P＜0.01);总IgG含量较健康对照组增幅小,差异显著(P＜0.01).同时,两者的消长趋势基本一致.     

口蹄疫LPB-ELISA抗体滴度和中和抗体滴度符合性研究

血清中和抗体滴度的大小反映血清对病毒感染的中和能力,其是评价疫苗免疫效果和病毒感染状况的重要指标,而液相阻断酶联免疫吸附试验(liquid phase block ELISA, LPB-ELISA)是一种通过ELISA检测抗体滴度的方法,因此研究LPB-ELISA抗体滴度和中和抗体滴度的关系对疫苗评价和理论研究有重要意义。本研究采用野外采集的90份牛血清进行了中和试验和LPB-ELISA试验,结果表明中和抗体滴度和LPB-ELISA抗体滴度具有相关性,相关系数为0.642,但是试验证明有41%中和抗体阴性样品会被LPB-ELISA检测为阳性,通过改变LPB-ELISA的阳性判断标准,采用抑制率>0.7的抗体滴度计算方法和1/8判定标准,可以使改进的LPB-ELISA的计算结果和中和试验结果更好的符合,降低假阳性率,使LPB-ELISA更适合进行口蹄疫血清学监测和普查。     

卵黄抗体代替血清抗体评价种鸡群病原感染状态的研究

为了解卵黄抗体与血清抗体间的相关性,分别采集一定数量的莱芜黑鸡、海兰褐蛋种鸡和SPF白来航鸡的血清、鸡蛋,所有鸡蛋与血清样品均一一对应。用禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、呼肠孤病毒(REOV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)、AB亚群禽白血病病毒(ALV-AB)、禽传染性贫血病毒(CAV)以及传染性法氏囊病病毒(IBDV)等6种ELISA检测试剂盒,分别检测血清与卵黄中的抗体水平,用SPSSStatistics17.0程序比较分析血清与卵黄抗体OD值的相关系数,从而获得针对ELISA检测卵黄抗体的最佳稀释倍数。结果显示,23~38份卵黄样品中REV、REOV、ALV-J、ALV-AB、CAV以及IBDV的抗体检测最佳稀释比例分别为1∶200、1∶400、1∶250、1∶200、1∶20和1∶500,与血清中抗体OD值的相关系数分别为0.982、0.939、0.927、0.993、0.935和0.989;检测结果还表明,最佳稀释度卵黄与血清样品的阴阳性符合率为96%~100%。本研究显示,卵黄可代替血清样品用ELISA检测试剂盒检测,以判断种鸡群的病原感染状态。     

种蛋中常见禽病的抗体监测与种蛋质量控制

用卵黄提取液检测9种常见禽病抗体，评估种蛋质量取得良好效果。     

己烯雌酚人工抗原的合成及其抗体制备

以己烯雌酚 (DES)、琥珀酸酐和牛血清白蛋白 (BSA)等为主要原料 ,采用混合酸酐反应 ,首先合成己烯雌酚半琥珀酸酯 (DES- HS) ,经质谱分析鉴定后 ,再将 DES- HS结合到 BSA上 ,并用 SDS- PAGE对 DES- HS- BSA进行测定。以DES- HS- BSA免疫家兔 6次 ,用琼脂双扩散试验测定抗体。试验结果表明 ,高分辨质谱测得合成的 DES- HS分子量为36 8;BSA- HS- DES的 SDS- PAGE图谱经相关软件分析表明 ,单个 BSA上结合有 32个 DES- HS;琼脂扩散试验结果证实 ,免疫兔血清中含有抗 DES的抗体。本试验为下一步研制 DES残留免疫检测试剂盒及抗 DES单抗奠定了基础     

SPF鸡感染网状内皮组织增生症病毒后血清和卵黄的抗体反应相关性比较

为进一步研究采用卵黄抗体检测代替血清抗体检测的可行性,采用已建立的卵黄抗体ELISA检测方法,比较同一时期卵黄抗体与血清抗体的相关性。人工感染23周龄无特定病原体（SPF）鸡,每周采集全血分离血清,每天收集种蛋,ELISA方法检测血清、种蛋中的REV抗体,并进行比较,结果表明：攻毒后第2周开始血清抗体和卵黄抗体呈阳性,并达到峰值,之后抗体水平缓慢下降,两者具有相似的消长规律;对同一时期的卵黄抗体和血清抗体S/P比值进行统计学比较,P值小于0.05,相关系数为0.931,表明两者差异性不显著,相关性很好;阴阳性符合率比较,阳性符合率为97.8%,阴性符合率为100%,总体符合率为98.4%,阴阳性复合率很高。试验证明,同一时期的卵黄抗体和血清抗体的相关性很好,可用卵黄抗体检测方法代替血清抗体检测,从而为监测SPF鸡群感染REV提供新的技术手段。     

克伦特罗单克隆抗体的研制及初步鉴定

为制备克伦特罗(clenbuterol,CL)单克隆抗体,鉴定其特性,采用重氮化法合成克伦特罗-人血清白蛋白(CL-HSA)作为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤技术建立杂交瘤细胞株,利用体内诱生法制备单克隆抗体,用间接ELISA和间接竞争ELISA分别测定抗体效价和特异性.将细胞反复冻存和传代,考察稳定性.获得细胞株C611...     

Antibody coefficients for the diagnosis of equine protozoal myeloencephalitis

Background: Diagnosis of equine protozoal myeloencephalitis (EPM) remains a challenge for equine practitioners. Current utilized methods have inadequate sensitivity and specificity, because of a high number of false positive results. Hypothesis/Objective: Evaluation of antibody indices to Sarcocystis neurona should provide high sensitivity and specificity for diagnosis of EPM. Animals: Archived samples from 29 clinical patients. Methods: Archived serum and cerebrospinal fluid (CSF) samples from clinical patients with either EPM (14) or cervical vertebral compressive myelopathy (CVM) (15) were examined and tested for anti‐S. neurona antibodies by the SnSAG2 ELISA. The results were used to calculate the antibody index (AI) and C‐value. Sensitivity and specificity were calculated, and the AI, C‐value, immunoglobulin G (IgG) concentrations, and anti‐S. neurona titers compared. In addition, negative CSF was spiked in varying concentrations with blood from a horse with a high anti‐S. neurona titer, and the tests repeated. Results: Results demonstrated that the IgG concentration, anti‐S. neurona titer, AI, and C‐value were significantly higher (P < .05) in horses with EPM than in those with CVM. Sensitivity and specificity of the AI was 71 and 100%, respectively, and that of the C‐value was 86 and 100%, respectively. In addition, the AI and C‐value from the samples spiked with S. neurona positive blood remained below 1 (eg, negative) in CSF with a red blood cell (RBC) count up to 10⁵ RBC/μL. Conclusions/Clinical Importance: Results of the study demonstrate the value of calculating the AI and C‐value in the diagnosis of EPM in horses. In addition, the test is robust in the presence of blood contamination.     

三种方法纯化相思子毒素单抗的比较

采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,寻求一种效果好、操作简便的纯化方法。采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对纯化产物进行相对分子质量、浓度、纯度、回收率及免疫活性的鉴定。结果表明,纯化后单抗的回收率以硫酸铵沉淀法及辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵-蛋白A亲和层析法较低;产物纯度以硫酸铵-蛋白A亲和层析法和辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵沉淀法较差;不同方法纯化后的单抗活性未见降低。