北极狐出血性肠炎病原分离鉴定

从排血便为主要临床特征的濒死期育成北极狐肠内容物中分离到 ５ 株革兰氏阳性大杆菌，各株菌的 ３７℃ ８ 小时厌气肉肝汤纯培养上清液 ０２ｍ ｌ小鼠尾静脉注射，１２ 小时内 １００％ 死亡。生理生化鉴定证实分离菌为产气荚膜杆菌（ Ｂ．ａｅｒｏｇｅｎｅｓｃａｐｓｕｌａｔｕｓ）。血清定型结果表明，分离的 ５ 株菌均为 Ａ 型产气荚膜杆菌。以饲喂狐的变质鱼浸出液静脉注射小鼠引起死亡，并从该浸出液中也分离到 Ａ 型魏氏梭菌，证实该病的发生是饲料传播。     

豚鼠气单胞菌引起山羊猝死的鉴定

2020年5月,江苏省某养殖场饲养的220只山羊疑似感染产气荚膜梭菌,共死亡25只。为鉴定感染的产气荚膜梭菌复合群类型,采集大肠、小肠内容物以及肠系膜淋巴结、肝、脾、肾等组织病料进行细菌分离鉴定,并对分离菌株进行药敏试验及致病性试验。结果显示：分离菌株为革兰氏阴性短杆菌,经生化试验和16S rRNA试验鉴定为豚鼠气单胞菌;该分离株对多种常用抗菌药物耐药,仅对呋喃唑酮敏感;该菌能造成小鼠发病死亡。此次从临床发病羊病料中分离到致病性豚鼠气单胞菌,在国内较为少见,截至目前未见类似报道,本研究为避免此类疫病的临床误诊以及做好该病防控提供了帮助。     

致病性嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物菌株的分离鉴定

对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行了细菌分离鉴定，共检出46株嗜水气单胞菌疑似菌，通过生化试验结合PCR扩增气溶素基因Aer，确定其中22株为致病性嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性，其中有4株对喹诺酮类药物耐药，并且为交叉耐药，耐药菌检出率为18．2％，纸片扩散法检测其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌负染后电镜观察，耐药菌表面有许多大小不同的球形结构，而敏感菌表面则为细丝状菌毛结构。     

家养观赏地图鱼肺炎克雷伯氏菌、维氏气单胞菌与黏质沙雷氏菌的分离鉴定及耐药性分析

本试验旨在通过细菌分离鉴定,明确家养观赏地图鱼的死因,筛选敏感药物。采用常规方法分离纯化细菌后,进行细菌形态学观察,并通过小白鼠致病性试验、细菌主要生化鉴定、16SrDNA序列测定分析、药敏试验及耐药基因检测等方法对分离的细菌进行鉴定及耐药分析。分离出3株革兰氏阴性短杆菌,根据细菌形态特征及理化特性,结合16SrDNA序列测定与系统发育分析结果,判定其分别为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens),其中肺炎克雷伯氏菌具有较强致病性。3株细菌均对洛美沙星、氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素敏感,对阿莫西林、氟苯尼考、克林霉素、甲硝唑等具有较强耐药性。结果表明,肺炎克雷伯氏菌、维氏气单胞菌、黏质沙雷氏菌的混合感染是家养观赏地图鱼的死亡原因。     

杀鲑气单胞菌的快速检测

杀蛙气单胞菌引起的鱼类疖疮病是进口动物检疫对象。该菌只能在疾病流行期从病鱼体内分离。在水和鱼卵中虽有此菌，也无法用常规细菌分离和培养法进行分离和鉴定。用ELISA技术快速检测水样中的该菌获得成功，为进口虹鳟鱼卵时检测该菌提供了方法。     

致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

对锦州及周边地区3个水库30尾病鱼进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验和PCR扩增气溶素基因aer鉴定,确定6株为嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的敏感性,各分离菌株均对环丙沙星、氯霉素、强力霉素、妥布霉素敏感;对氨苄青霉素、青霉素不敏感;部分菌株存在不同程度的耐药性。接种试验动物出现典型的嗜水气单胞菌的病理变化和死亡。     

用点酶法检测鱼类致病性嗜水气单胞菌HEC毒素

本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病料,均为阴性反应,仅与豚鼠气单胞菌、杀鲑气单胞菌新亚种及吕克氏耶尔森氏菌有轻度的交叉反应。对72株病鱼分离菌及33份病鱼组织的检测结果表明,点酶法与溶血试验的符合率分别为80.7%和90.9%。以上试验重复3次,结果完全一致。综上可见,用点酶法检测嗜水气单胞菌HEC毒素,无须作复杂的细菌鉴定,并能直接用于病料,是一个快速、敏感、特异、有效的方法,显示出广阔的应用前景。     

河南中牟地区斑点叉尾鮰突发性败血症病原分离及鉴定

为鉴定近期河南中牟地区斑点叉尾鮰突发性败血症的病原,本研究从患病濒死鱼中分离到3株致病菌并对其进行常规理化特性、分子生物学、病理学和致病性试验以及药敏性检测。结果显示,3株分离株理化特性与维氏气单胞菌(A.veronii)特征相符,与Gen Bank中登录的A.veronii的gyr B基因同源性达99%以上,在系统发育树上均与A.veronii聚为一族。病理学和致病性试验显示,病鱼鳃、肝、肾、脾、肠等组织器官具有典型病理变化,人工感染鱼出现与自然发病相似症状,并能够从发病鱼组织中再次分离到相同病原菌,以上结果表明3株分离株均为致病性A.veronii。药敏试验表明3株分离菌株均对氧氟沙星、氯霉素、多西环素3种药物敏感。本实验为中牟地区A.veronii的防治和自然感染A.veronii致病机理的研究奠定了基础。     

中华鳖几种常见疾病病原的分离鉴定及药敏试验

从患“穿孔病”、“腐皮病”、“溶血性腹水病”等濒死鳖的肝、心血和腹水中分离到20株细菌，其中温和气单胞菌（Aeromonas sobria）5株，豚鼠气单胞菌（A.caviae）3株、凡隆气单胞菌（A.veronii）2株、奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）2株、产碱假单胞菌（Pseudomonas alcaligene）2株、无色杆菌（Achro sp.）3株、不动杆菌（Acinetobacter sp.）2株、黄杆菌（Flavobacterium sp.）1株。人工感染试验证实，运动型气单胞菌的温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌是其主要病原菌。药敏试验结果表明，分离菌株对新霉素、菌必治、丁胺卡那、庆大霉素、环丙沙星高度敏感。     

鱼源气单胞菌的主要特性研究

对分离于草鱼肠炎、白鲢鱼打印病、鲢鱼白皮病、草鱼烂鳃、鲤鱼体表出血感染及甲鱼败血症等病例的80株细胞进行了主要特性研究。结果表明均为气单胞菌属（Aeromonas)的细菌，其中嗜水气单胞菌（A.hydrophila)29株（占36．25％）、豚鼠气单胞菌（A.caviae)38株（占47．5％）、温和气单胞菌A.sobria）13株（占16．25％）。在被检验的病例中，或为其中一种气单胞菌的单独感染，或为两种、三种气单胞菌的混合感染。经做人工感染试验检查，表明这些分离菌均为相应感染症的致病菌。     

甲鱼病原性豚鼠气单胞菌的分离鉴定

自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到２２株细菌，在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选３株作进一步鉴定，生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力，用其中１株回归本动物发病死亡，并出现与自然病例类似症状。用１株分离菌制备的抗血清与其他２１株分离菌株进行玻板凝集试验，其中１１株有毒力菌株都出现凝集反应，显示豚鼠气单胞菌为本病的主要病原。     

某池塘鱼细菌感染的暴发调查

辽宁省大连市某人工池塘养殖的淡水鱼苗出现大量死亡。从病死鱼体内分离到一株致病性嗜水气单胞菌和一株类志贺邻单胞菌。对鱼饲料、池塘环境样品进行细菌计数与优势菌筛查,发现池底淤积物和池塘排水管污物中细菌总数严重超出限值,优势菌为致病性嗜水气单胞菌、类志贺邻单胞菌和摩氏摩根菌,与病死鱼体内分离到的细菌基本一致。由此判断引起池塘鱼感染的细菌主要来源于池底淤积物和池塘排水管污物。     

斑点叉尾鮰中一种病原菌的分离与鉴定

目的未知病菌对江苏地区斑点叉尾鮰的养殖业造成了巨大的危害,本文对该地区某养殖场病鱼中分离的细菌进行了鉴定及微生物学特性研究。方法采用VIA培养基分离优势菌株;采用回归感染实验确认病原菌;采用形态学观察、生理生化特征测定、细菌特异性引物PCR扩增检测及细菌基因测序分析鉴定细菌;采用药敏实验测定它对部分抗生素的敏感性。结果从病鱼症状及菌株的培养特性、形态特征与嗜麦芽寡养单胞菌感染斑点叉尾鮰症状十分相似,病鱼有典型的肠套叠和肝脏变性现象。分离菌株为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阴性、硝酸还原阴性,不发酵糖类,无动力。最初判为嗜麦芽寡养单胞菌,而经过VITEK2生化及16S rRNA基因系统发育进化显示,与不动杆菌16S rRNA核苷酸同源性最高,为98.7%～99.8%,该菌株为约翰逊不动杆菌。结论分离出的约翰逊不动杆菌grp2580083能导致斑点叉尾鮰患病,症状与嗜麦芽寡养单胞菌感染具有类似性,对渔业养殖造成影响。     

鲤鱼豚鼠气单胞菌感染症的研究Ⅰ.病原分离鉴定

对长春地区池塘精养鲤鱼暴发的以出血性败血症为特征的疫病进行了病原分离与鉴定.从自然感染鲤鱼分离获得的菌株,经生理生化特性测定,属于豚鼠气单胞菌.用增菌培养物经人工感染试验获阳性结果.证明该菌为本病致病菌.用自然感染病鱼的组织滤液,经人工感染呈阴性,证明本病非病毒感染.     

青海湖裸鲤体表白点病病原菌的分离与药敏试验

为确定养殖青海湖裸鲤(Gymnocypris przewaiskii)体表白点病的病原,分别对患病鱼白色点状囊泡样物进行了细菌分离、生理生化特性鉴定、16SrRNA基因分析和药敏感试验,分离到了以弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,AV)和摩氏摩根菌(Morganella fulton)为代表的菌落形态一致、革兰阴性细菌;且分离到的3种菌都对头孢吡肟、丁胺卡那霉素、庆大霉素等药物敏感。     

黄喉拟水龟致病菌-维氏气单胞菌的鉴定及药敏试验

对患病黄喉拟水龟(Mauremys mutica)进行细菌学检查和分离,对分离到1株革兰阴性细菌进行形态特征、理化特征、VITEK 2 ZOMPACT 30自动微生物鉴定系统鉴定、结合16S rDNA序列的分子鉴定,并构建系统发育树;进行人工感染试验及药物敏感性试验。结果分离到1株优势菌,根据此株分离菌的形态特征、理化特征、自动微生物鉴定系统鉴定、结合16S rDNA序列测定与系统发育树分析结果,判定其为气单胞菌属的维氏气单胞菌。此菌对供试健康黄喉拟水龟和小鼠有较强的致病作用,对供试20种抗菌药物中的头孢吡肟、阿米卡星、氧氟沙星、米诺环素高度敏感;对洛美沙星、恩诺沙星、氯霉素等3种中度敏感;对头孢噻吩、环丙沙星等13种表现耐药。表明所检出的维氏气单胞菌,是导致黄喉拟水龟以出血和腹水为主要病理特征的致病菌。     

黄鳝温和气单胞菌病病原的分离鉴定及免疫应答

从患病黄鳝苗种的肝脏、消化道、血液中分离到2株细菌,经腹腔人工注射及浸浴感染试验均出现与自然病例相似的症状,并从病鳝体内重新分离到生理生化特性与原菌株相同的细菌.经多项形态、生理生化测试,此2株细菌均鉴定为温和气单胞菌(Aeromionas sobria).该菌对先锋霉素Ⅵ、复达欣、头孢呋肟、菌必治、氟嗪酸等药物高度敏感,可选用这些药物拌饵投喂黄鳝苗种,来防治黄鳝苗种的温和气单胞菌病.免疫试验表明,黄鳝在免疫后7 d可以检测到抗体,滴度为25(32),以后逐渐上升,21 d达最大值212,随后下降,免疫保护率较对照组有明显提高.     

黄鳝温和气单胞菌病病原的分离鉴定及免疫应答

从患病黄鳝苗种的肝脏、消化道、血液中分离到2株细菌，经腹腔人工注射及浸浴感染试验均出现与自然病例相似的症状，并从病鳝体内重新分离到生理生化特性与原菌株相同的细菌。经多项形态、生理生化测试，此2株细菌均鉴定为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。该菌对先锋霉素Ⅵ、复达欣、头孢呋肟、菌必治、氟嗪酸等药物高度敏感，可选用这些药物拌饵投喂黄鳝苗种，来防治黄鳝苗种的温和气单胞菌病。免疫试验表明，黄鳝在免疫后7d可以检测到抗体，滴度为2^5(32)，以后逐渐上升，21d达最大值2^12，随后下降，免疫保护率较对照组有明显提高。     

市售淡水鱼肠内气单胞菌及类志贺邻单胞菌的调查

对市售的６种淡水鱼共采肠内容物样品７３份，检出气单胞菌３２株，阳性率为４３．８４％；类志贺邻单胞菌１７株，阳性率为２３．２９％。其中有８份样品同时检出上述两菌。对３２株气单胞菌用８项生化试验鉴定为４个种，分别是嗜水气单胞菌１６株，豚鼠气单胞菌８株，温和气单胞菌７株，简达气单胞菌１株。     

黑天鹅温和气单胞菌病的诊断

1998年 6月间 ,北京动物园水禽湖相继死亡 2只成年黑天鹅 ,死前无明显症状 ,死后剖检胃肠道内无食物 ,肝稍微肿大、瘀血 ,肠轻度瘀血。对心血和肝组织作细菌分离鉴定 ,结果分离到纯粹的温和气单胞菌 ,由于该菌的感染引起黑天鹅败血症死亡。1　细菌分离　将黑天鹅心血和肝组织分别接种于肉汤和厌气肉肝汤中 ,37℃培养 1 8h,两种培养液均一致混浊、产气。将两种培养液各取 0 .3ml分别腹腔注射小鼠 ,均于次日死亡 ,取死鼠心血划线于 1 0 %绵羊脱纤维血琼脂平皿上 ,37℃培养 1 8h,均长出纯粹的 β-溶血的灰白色菌落。2　细菌鉴定2 .1　细菌形态…