中华鳖几种常见疾病病原的分离鉴定及药敏试验

从患“穿孔病”、“腐皮病”、“溶血性腹水病”等濒死鳖的肝、心血和腹水中分离到20株细菌，其中温和气单胞菌（Aeromonas sobria）5株，豚鼠气单胞菌（A.caviae）3株、凡隆气单胞菌（A.veronii）2株、奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）2株、产碱假单胞菌（Pseudomonas alcaligene）2株、无色杆菌（Achro sp.）3株、不动杆菌（Acinetobacter sp.）2株、黄杆菌（Flavobacterium sp.）1株。人工感染试验证实，运动型气单胞菌的温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌是其主要病原菌。药敏试验结果表明，分离菌株对新霉素、菌必治、丁胺卡那、庆大霉素、环丙沙星高度敏感。     

甲鱼暴发性传染病的病原分离及治疗试验

从１５例表现为“红底板”、“红脖子”、“烂甲”的患病甲鱼肝脏分离到９株无荚膜、无芽胞、革兰氏阴性、β溶血的短杆菌,经理化特性鉴定均为气单胞菌属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）嗜温有动力菌群,其中温和气单胞菌（Ａ．ｓｏｂｒｉａ）７株,豚鼠气单胞菌（Ａ．ｃａｖｉａｅ）２株。从Ａ．ｓｏｂｒｉａ和Ａ．ｃａｖｉａｅ各选一代表菌株（ＪＡ－１和ＪＡ－２）分别感染健康鲫鱼均引起发病和死亡,其ＬＤ５０分别为４．３×１０５、５．５×１０７,并回收到该２种菌。在该２种菌培养上清中存在１种具有溶血活性的毒素。以ＪＡ－１和ＪＡ－２为菌种制成混合菌苗,在应用由黄芪、有机锗制成的免疫增效剂后,再用混合菌苗免疫家兔,制得的多价高免血清（效价达１∶５１２）与庆大霉素、恩诺沙星进行了治疗对比试验。结果,高免血清治疗自然病甲鱼１０９只,全部治愈;庆大霉素、恩诺沙星分别治疗自然病甲鱼７２只和８４只,平均治愈率分别为８８％和８４％。     

猪源气单胞菌分离鉴定及耐药谱检测

为调查气单胞菌在我国猪粪便中流行情况及耐药谱,2017年3~7月从河南省4个地区,共采集370份猪粪样品,通过缓冲液蛋白胨水增菌培养后,使用添加有氨苄青霉素的气单胞菌基础培养基选择培养,分离气单胞菌。可疑菌株通过形态特征、生化试验和16SrDNA序列比对进一步鉴定。微量稀释法测定分离菌株对17种抗菌药物耐药谱。结果显示,共分离到11株气单胞菌,分离率为2.97%,其中豚鼠气单胞菌5株(占45.45%),杀鲑气单胞菌2株(占18.18%),中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、水生气单胞菌和贝斯特润气单胞菌各1株(各占9.09%);阿莫西林/克拉维酸菌耐药率为100%,磺胺甲恶唑、氟苯尼考耐药率81.82%,阿米卡星、美罗培南敏感率均为100%,除了其中1株气单胞菌,其他菌株对头孢噻呋、头孢曲松、庆大霉素、强力霉素、磷霉素、恩诺沙星均敏感,各菌株均呈多重耐药性。表明我国健康猪粪便中携带气单胞菌,如果造成水源或者食物污染,可能有引起人类或者动物感染的风险,应引起重视。     

中华鳖出血性肠道坏死症病原及其药敏性

从中华鳖出血性肠道坏死症患病个体的血液、脾脏、肝脏及肠壁中共分离到 5株细菌 ,经人工感染、毒力测试 ,鉴定分离菌株为嗜水气单胞菌 (Aeromonas hydrophila)、豚鼠气单胞菌 (A.Caviae)和类志贺邻单胞菌 (Plesiomonasshigelloides)。药敏试验结果表明 ,此 3种致病菌对新霉素、丁胺卡那、呋喃妥因均高度敏感。     

市售淡水鱼肠内气单胞菌及类志贺邻单胞菌的调查

对市售的６种淡水鱼共采肠内容物样品７３份，检出气单胞菌３２株，阳性率为４３．８４％；类志贺邻单胞菌１７株，阳性率为２３．２９％。其中有８份样品同时检出上述两菌。对３２株气单胞菌用８项生化试验鉴定为４个种，分别是嗜水气单胞菌１６株，豚鼠气单胞菌８株，温和气单胞菌７株，简达气单胞菌１株。     

致病性嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物菌株的分离鉴定

对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行了细菌分离鉴定，共检出46株嗜水气单胞菌疑似菌，通过生化试验结合PCR扩增气溶素基因Aer，确定其中22株为致病性嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性，其中有4株对喹诺酮类药物耐药，并且为交叉耐药，耐药菌检出率为18．2％，纸片扩散法检测其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌负染后电镜观察，耐药菌表面有许多大小不同的球形结构，而敏感菌表面则为细丝状菌毛结构。     

野生胡子鲶“腹水病”病原分离和鉴定

从发生“腹水病”的野生胡子鲶体内分离出１４株致病菌，经生化鉴定，有１２株细菌（８７％）定为豚鼠气单胞菌，１株定为大肠埃希氏菌。动物回归试验也证实了细菌的致病性。因此，本次野生胡子鲶发生“腹水病”主要病原是豚鼠气单胞菌，药敏试验结果对细菌有效的药物有头孢类抗生素、丁胺卡那霉素，卡那霉素，新霉素，氯霉素，庆大霉素。     

4型菌毛、毒素及蛋白酶在动物源气单胞菌的检测

将来源于鱼、猪、犬等９种动物的１８株气单胞菌分离株通过ＡＤ（氨苄青霉素－糊精）培养基纯化。另以大肠杆菌束状菌毛相关（ｂｆｐ－ｒｅｌａｔｅｄ）基因的ＰＣＲ引物对ＥＢ１（ＧＡＴＴＧＡＡＴＣＴＧＣＡＡＴＧＧＴＧＣ）—ＥＢ２（ＧＧＡＴＴＡＣＴＧＴＣＣＴＣＡＣＡＴＡＴ）扩增,用ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ－１１－ｄＵＴＰ标记,构建核酸探针,作斑点杂交试验,用以检测上述气单胞菌菌株的４型菌毛,同时以溶血试验检测其毒素,用脱脂奶溶蛋白圈试验检测其蛋白酶。结果显示,在１８个菌株中,４型菌毛、毒素和蛋白酶均为阳性者为１０株（５５．６％）;３项指标均无肯定的阳性结果者４株,两者合计共１４株,占检测总数约８０％（１４／１８）,提示这３种毒力因子存在较高的相关性。所有鱼源株（５株）三项指标皆为阳性;４株猪分离株三项指标均为阳性者占一半;其它动物分离株检测结果无明显规律性     

甲鱼病原性豚鼠气单胞菌的分离鉴定

自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到２２株细菌，在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选３株作进一步鉴定，生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力，用其中１株回归本动物发病死亡，并出现与自然病例类似症状。用１株分离菌制备的抗血清与其他２１株分离菌株进行玻板凝集试验，其中１１株有毒力菌株都出现凝集反应，显示豚鼠气单胞菌为本病的主要病原。     

湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征．为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，经检测．其中3份为临床乳房炎样本，49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36．4％（20／55）与20％（29／145）。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24）．而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31），其次为无乳链球菌，占25．8％（8／31）。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感．对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。     

罗非鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定

北京某鱼场饲养的罗非鱼陆续发病死亡,其体表鳞片局部出血,肝、胰、脾脏肿大坏死,肠腔积水等,从病死及濒死罗非鱼的肝、胰脏中分离到 ４ 株细菌,经形态学、生理生化特性及血清凝集试验,鉴定为嗜水气单胞菌。４ 株细菌均能致死小鼠和鲢鱼。药敏试验表明,４ 株细菌对环丙沙星、蒽诺沙星高度敏感,而对青霉素和红霉素不敏感。     

一株草鱼维氏气单胞菌的分离鉴定及毒力基因分析

为了鉴定贵州芩巩县某养殖场草鱼发病死亡的病原,本研究通过临床解剖观察、细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定、药敏试验、动物回归试验、16S rDNA与gyr B基因测序及系统分析进行鉴定。结果显示,本研究从发病草鱼体内分离到1株致病菌GZQG2019,分离菌在培养基中呈圆形、表面湿润光滑、边缘整齐半透明的灰白色菌落,菌落周围呈现β-溶血环;革兰氏镜检显示,分离菌呈两端钝圆短小阴性杆菌;16S rDNA、gyr B基因序列分析显示,分离菌与维氏气单胞菌聚为一支,同源性均在99%以上;药敏试验结果显示,在使用的20种抗菌药物中,该菌对四环素、丁胺卡那、多黏菌素B和头孢曲松等10种药物敏感,对苯唑西林、青霉素、阿莫西林和庆大霉素等8种药物中度敏感,对头孢氨苄、复方新诺明2种药物耐药;动物回归试验显示,该菌对健康草鱼具有强致病性;10种毒力基因扩增结果显示,分离菌携带气溶素、热不稳定性肠毒素、溶血素、核酶、丝氨酸蛋白酶、弹性蛋白酶和酯酶7种毒力基因。本试验成功分离到1株草鱼源维氏气单胞菌,具有较强毒力,且携带多种毒力因子;对四环素、丁胺卡那等药物敏感,对四环素、丁胺卡那等耐药,为维氏气单胞菌病临床用药提供参考依据。     

贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析

为了解贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer，RA）的流行血清型、毒力和耐药情况，本试验从贵州省三穗县6个规模养鸭场临床疑似RA感染的病鸭体内分离出6株分离菌，对病原菌进行分离鉴定、毒力基因检测和耐药性分析。细菌分离鉴定结果显示，分离菌在巧克力琼脂培养基上长出表面光滑、圆形半透明的滴状菌落；革兰氏染色呈阴性短小杆菌，瑞氏染色呈两极浓染；分离菌均不具运动性，尿素、触酶和氧化酶试验均为阳性，符合RA生化特性，将6株分离菌分别命名为SS-RA1~SS-RA6；6株分离菌的16S rRNA基因序列与NCBI上RA参考菌株的基因序列相似性≥98%，说明6株分离菌均是RA；SS-RA1~SS-RA4为血清2型且含有8种毒力基因（OmpA、CAMP、wza、AS87_04050、Fur、SIP、TbdR1和luxE基因），SS-RA5和SS-RA6为血清11型，缺失AS87_04050基因，仅含有上述其余7种毒力基因；动物回归试验结果显示，攻毒组雏鸭均全部死亡，对照组雏鸭未表现明显临床症状，表明6株分离菌对雏鸭均有致病力；药敏试验结果显示，6株分离菌仅对羧苄西林、哌拉西林、头孢他啶、头孢氨苄、头孢曲松、头孢拉定和头孢哌酮7种抗菌药物敏感，对其他13种抗菌药物均表现不同程度的耐药，对氨基糖苷类和大环内酯类抗菌药物的耐药率为100%。本试验成功分离得到6株RA，为贵州省三穗县鸭疫里默氏杆菌病的疫苗选择和药物防治提供理论依据。     

川渝地区奶牛隐性乳房炎调查和主要病原菌分离鉴定及药敏试验

用LMT法对川渝地区134头泌乳奶牛的491个乳区进行隐性乳房炎发病情况调查,并对阳性乳样进行主要病原菌的分离鉴定及药敏试验。结果显示,被检奶牛患隐性乳房炎头阳性率为70.90%,乳区阳性率为35.64%,175份阳性乳样的细菌检出率为90.86%,病原菌单独感染率为10.69%,混合感染率为89.31%;共分离到金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌3种主要病原菌134株,其中金黄色葡萄球菌93株,占分离菌株的69.40%,链球菌34株,占25.37%,大肠杆菌7株,占5.23%;主要病原菌对呋喃妥因、新生霉素、头孢菌素类和喹诺酮类药物敏感性较好,对大多数抗菌药物产生不同程度的耐药性,对青霉素和链霉素则完全不敏感,耐药程度接近100%。     

Epizootiology of Salmonella typhimurium infection in chickens]

The incidence of S. typhimurium infections among fowl increased in thr region of Potsdam in general, and on various big farms in particular, 1976 and over the first half of 1977. The outbreaks included subclinical infections and clinically manifest diseases which caused remarkable loss of broilers from the affected stocks (up to 15.92 per cent). Parent stocks contaminated with S. typhimurium were to be the sources of infection in all cases. A total of 1,220 Salmonella strains were isolated from fowl and its environment, with 1,151 of them being S. typhimurium (2.98 per cent of all samples tested). The following amounts of S. typhimurium strains were isolated from different types of samples which had been collected from infected broiler stocks: 8.10 per cent from dead broilers, 5.86 per cent from dead broiler parents, 2.11 per cent from pulp linings of transport cages for day-old chicks, 1.23 per cent from litter, 1.0 per cent from hatching material (eggs or dead and jammed embryos, and 0.12 per cent from swabs used in hygiene supervision). No Salmonellae were isolated from feedstuff. The transmission of S. typhimurium, therefore, is though to have taken the route via the hatching egg and via congenitally infected chicks traded between breeders and propagation farms. The control and prophylaxis of S. typhimurium infections, therefore, should be based primarily on action in the centralised breeding stocks. Specific steps of such action are proposed. Fifty-three strains were biochemically and lysotypically analysed, with the following types being determined: ut/Ph 30 BT b, ut/Ph 30 BT c, n.c. 1/72/n.c. BT b, 2 n.c. BT a, and 1A/6 BT a. The first two types covered 84.9 per cent of all strains isolated from the fowl. All lysotype ut/Ph 30 strains isolated from fowl fell under the copenhagen variant which had rarely been isolated from man in the past. These results are likely to support the demand for a joint control programme for enteritis Salmonellae, with particular emphasis on S. typhimurium, for implementation in human and veterinary medicine.     

Antibiotic susceptibility of bacteria isolated from cats with ulcerative keratitis in Taiwan

Objectives: To assess the antibiotic susceptibility of bacteria isolated from corneal ulcers in cats. Methods: A total of 92 cats with infected corneal ulcers were swabbed for bacterial culture and the antibiotic sensitivity of the isolates analysed. Results: Bacteria were isolated from 54 of 92 infected eyes with corneal ulcers and purulent discharge. A total of 59 bacterial isolates were obtained from the 54 ulcers. The ratio of Gram-positive to Gram-negative isolates was approximately 3:1. The most commonly isolated Gram-positive bacteria were Staphylococcus species (51 per cent of all isolates), while Pseudomonas aeruginosa (13.5 per cent of all isolates) was the most common Gram-negative bacteria isolated. The Gram-negative isolates demonstrated a greater incidence of antibiotic resistance than the Gram-positive ones. The most effective antibiotics against the isolates were ciprofloxacin, tobramycin and gentamicin, with erythromycin and lincomycin showing the greatest number of resistant isolates. Clinical Significance: Staphylococcus and Pseudomonas species were the most common Gram-positive and Gram-negative bacteria, respectively, isolated from feline eyes with ulcerative keratitis. The second-generation fluoroquinolone, ciprofloxacin and the aminoglycoside gentamicin were found to be highly effective against the majority of isolates.     

犊牛大肠杆菌病病原的分离鉴定

从陕西杨凌某发病牛场采取腹泻犊牛病料5份,经微生物学诊断,从中分离出革兰阴性疑似致病菌6株。经生物学特性和生理生化试验鉴定,6株分离菌均为致病性大肠埃希菌。对分离菌进行抗生素敏感性试验,结果表明,该致病菌对氯霉素、菌必治、氧氟沙星、阿米卡星及卡那霉素等高度敏感;对妥布霉素、呋喃妥因和复达欣等中度敏感,对链霉素、庆大霉素、利福平、复方新诺明、四环素及红霉素等有较强的耐药性。动物致病性试验结果表明,该菌对小鼠有强致病性。     

家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定

从病死兔的肺部病变组织中分离到6株细菌,对其形态学、培养特性、生化试验、血清学反应、毒力测定和药物敏感性试验等进行研究。结果表明,分离菌株均属支气管败血波氏杆菌,具有较高的致病性;6株菌对四环素、左氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、阿奇霉素等呈高度敏感。     

鲤源嗜水气单胞菌分离鉴定、耐药性及毒力基因检测

为查明贵州某鲤鱼养殖厂鲤鱼死亡的病因,本试验进行了细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生理生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、药敏试验、耐药基因检测、动物感染试验、毒力基因检测等。结果显示,从死亡鲤鱼病变组织中分离到的细菌呈圆形凸起、表面光滑的灰白色菌落,为革兰氏阴性短杆菌;生化鉴定结果显示,分离菌具有运动性,能发酵葡萄糖产酸产气,精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶、M-R和V-P试验阳性;应用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增获得大小为1 421 bp的片段,测序发现,该分离菌与16株嗜水气单胞菌相应序列同源性达75.3%~100.0%;药敏试验结果显示,该分离菌对氟苯尼考、头孢曲松、妥布霉素、氧氟沙星、恩诺沙星5种药物呈现高度敏感,对复方新诺明、磺胺异噁唑、羧苄西林等药物呈现耐药,经耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带Sul1、Sul2和Intl1 3种耐药基因,与药敏表型相符;人工感染试验显示,该分离菌有致病力,经毒力基因检测显示,该分离菌携带aer、hly和act 3种毒力基因。上述试验结果表明,本研究分离得到了一株耐磺胺类药物的鲤源嗜水气单胞菌,为该鲤鱼养殖厂的鲤鱼疾病防治与合理用药提供了科学依据。     

紫花针茅内生细菌的分离与鉴定

从东祁连山高寒草地采集优势牧草紫花针茅并分离其内生细菌,以辣椒立枯丝核病菌、油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、玉米大斑病菌、小麦离蠕孢、甜瓜枯萎病菌和玉米小斑病菌8种植物病原真菌为指示菌,筛选拮抗菌,用阿须贝无氮培养基和PKO培养基筛选固氮菌和溶磷菌,采用传统生理生化测定法和16S rDNA基因序列同源性分析对...