渔用芽孢杆菌制剂中菌株的分离与鉴定

为了解不同剂型渔用芽孢杆菌制剂中优势菌株情况,本研究对市售4种不同类型、使用效果良好的芽孢杆菌制剂进行培养分离、革兰氏染色和16S r RNA测序鉴定。结果显示:酶制剂中地衣芽孢杆菌为优势菌群,饲料添加剂中枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌为主要菌群,复合菌中地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌为主要菌群,粬种中的主要菌群为地衣芽孢杆菌。据结果推测,地衣芽孢杆菌为目前水产养殖业较为普遍使用的芽孢杆菌。     

一株兔源地衣芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

利用厌氧菌分离技术从兔肠道中分离出1株芽孢杆菌,通过培养特征、形态观察及生化鉴定,结合16S r RNA基因序列测定与同源性分析,采用平板稀释法对分离株进行了耐酸、耐胆盐、耐高温及安全性检测等生物学特性研究。结果表明,分离株为一株地衣芽孢杆菌,并命名为Bacillus licheniformis WZ01,该菌株具有安全性及良好的耐高温、耐胆碱、耐酸良好的益生菌特性。     

猪生物发酵床保育期垫料中效应细菌的筛选及鉴定

本试验对猪生物发酵床保育期垫料样品中效应细菌的组成和作用进行了研究,共获得了6株效应细菌;经纯培养后观察其个体与群体形态,并进行生化特征鉴定以及16S rRNA基因分析.结果表明,所得的6株效应细菌中,芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细菌有4株,分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis);沙雷氏菌属(Serratia sp.)有1株,为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens);假单胞菌属(Pseudomonas sp.)有1株,为假单胞杆菌(Pseudomonas).     

酸奶生产环境中芽孢杆菌的调查与分析

通过对某厂酸奶生产环境微生物菌群分析,发现此环境中微生物以芽孢杆菌属(Bacillus.sp)的菌种居多.对各个采样点分离、纯化的芽孢杆菌进行生理生化和分子鉴定,结果为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)占所分离鉴定芽孢杆菌的30％,地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)占19％,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)占14％,其余7种菌共占37％.对它们进行溯源分析,发现有连通的车间存在交叉污染.     

一株双酶梭菌的鉴定及其生理特性分析

采用微生物分离技术从土壤中筛选出一株益生菌Lxiao,通过菌落和细胞形态观察、生理生化试验及16S rRNA基因序列分析,将Lxiao鉴定为双酶梭菌(Clostridium bifermentans)。在大分子水解试验中,双酶梭菌能够水解蛋白质。在药敏试验中,Lxiao对头孢他啶、链霉素和黏杆菌素具有耐受性。在人工胃液和人工肠液的耐受试验中,Lxiao在3 h后存活率分别为74.6%和78.2%。在胆盐耐受试验中,双酶梭菌能够在胆盐浓度为0.4%的培养基上生长。该研究可为双酶梭菌的生产应用提供参考依据。     

进口蜂蜜中幼虫芽孢杆菌的分离鉴定及调查

为调查分析进口蜂蜜中携带幼虫芽孢杆菌的情况和菌株特性,本研究对2017年度来自10个国家和地区的71份蜂蜜样品进行幼虫芽孢杆菌分离并纯化培养,将分离的菌株进行生化、16S r RNA基因鉴定和序列分析。结果显示:分离的31株均为幼虫芽孢杆菌,阳性率为43.6%(31/71);16S r RNA基因序列分析结果显示其与幼虫芽孢杆菌(ATCC9545)等同源性在97%以上。31株分离株16S r RNA基因保守性强,同源性达99.8%以上,遗传变异性较弱。本研究在国内首次为进口蜂蜜传播美洲幼虫腐臭病风险分析提供基础数据,为制定进口蜂蜜风险控制措施提供依据。     

鸡蛋污染致病菌分离及鉴定

为了研究污染鸡蛋的致病菌,试验采用微生物分离纯化在鸡蛋表面得到4株菌,用形态学观察和生理生化初步判定为芽孢杆菌和葡萄球菌,再结合16Sr RNA分子方法对4株菌进行分类分析,先用PCR对目的菌进行基因扩增,经克隆及质粒测序,再登录NCBI中Gen Bank数据库进行相似性分析。结果表明:1号菌为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus GXBC-1,2号和3号菌为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus NC7401,4号菌为金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus。这些菌是食源性致病菌,致病性强,传染率高,对食品安全风险大。     

桑园土壤芽孢杆菌分析

本文通过平皿分离培养及生理生化反应，对桑园土壤中的芽孢杆菌分布及种类进行了分析，结果表明，在上层土和下层土中的芽孢杆菌分布及种类存在较大的差异，在１～５ｃｍ、５～１０ｃｍ土层中，芽孢杆菌占细菌总数的百分比分别为１３．３７％和２．３２％。共检出芽孢杆菌１５种，并将其中１１种确定到种，在土壤分布中占优势的种为枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌。     

鹅肠道纤维素分解菌的分离与优化组合研究

本研究旨在从鹅肠道中分离、鉴定纤维素分解菌,并进行优化组合,通过平板法筛选纤维素分解菌,根据菌株形态、培养特征、生理生化试验和16S rDNA序列分析确定其种属,并利用菌株拮抗试验和交叉酶活力测定试验对优势纤维素分解菌进行优势组合。结果表明:从鹅肠道样品中分离出纤维分解菌29株,其中需氧菌19株、厌氧菌10株;8株纤维分解能力较强的菌株分别为胶质类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、解纤维梭菌、溶血性葡萄球菌、绿脓假单胞菌;蜡样芽孢杆菌与绿脓假单胞菌组合的酶活力最高,达到9.86 U/mL。     

玉米赤霉烯酮降解菌株的筛选及鉴定

本试验旨在从土壤中筛选出能降解玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的菌株。将土壤中分离的菌株接种至含2μg/m L ZEN的LB液体培养基中,37℃,180 r/min,培养24 h。采用间接竞争ELISA法检测ZEN的残留量,计算菌株的ZEN降解能力。并将降解ZEN能力较强的菌株进行形态学、生化特性和16S r DNA基因序列分析鉴定。结果显示:筛选出的菌株JM-1降解ZEN的能力可达26.27%,显著高于其他菌株(P0.05)。经形态学、生化特性和16S r DNA基因序列分析,菌株JM-1鉴定为蜡样芽孢杆菌。     

四株单菌及其复配后复合菌剂净水效果初步研究

本研究对目前水产养殖中常用的枯草(Bacillus subtilis,Bs)、蜡样(Bacillus cereus,Bc)、地衣(Bacillus licheniformis,Bl)三株芽孢杆菌和一株粪链球菌(Fecal streptococcus,Fs)进行净水效果初步比较,主要指降解氨氮、亚硝酸盐能力的比较。将菌粉定量添加到自配的模拟污水培养基中摇床培养,不加菌的模拟污水培养基作为对照。结果表明:枯草芽孢杆菌的降氨氮能力优于其他三种菌,5 d后氨氮去除率100%,蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和粪链球菌也均有一定的降解氨氮能力。降亚硝酸盐效果最好的单菌仍是枯草芽孢杆菌,亚硝酸盐去除率第二天为85.60%,第三天为100%。地衣芽孢杆菌和粪链球菌降亚硝酸盐的能力也很好,在第五天亚硝酸盐浓度基本为0。而蜡样芽孢杆菌降亚硝酸盐的效果不如其他3种菌,五天后降解率仅为61.10%。根据单株菌净水效果的结果,做菌种复配净水试验。共得出七种配方复合菌剂,同样在模拟污水培养基中进行培养。结果得出,配方E为最优配方,第三天氨氮去除率为81.33%,第六天时去除率达到93.58%,第五天时亚硝态氮基本降为0,净水效果突出。     

四种芽孢益生菌组合对仔猪生产性能影响的比较

选择40头长荣杂交断奶仔猪(起始重7 kg左右),随机分为5个组,每组8头,两个重复,研究4种芽孢益生菌组合(在乳酸菌和酵母菌的基础方上分别加入凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌)对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响.结果表明,ADG芽孢杆菌各组高于对照组,但其中蜡样芽孢杆菌组最优;较之对照组,蜡样芽孢杆菌组在前、后及全期ADG分别显著提高45.7%(P<0.01)、14.74%和23.92%(P<0.05);F/G分别降低18.8%(P<0.05),4.3%和7.2%(P>0.05);腹泻率(DR)降低79.97%;表明复合蜡样芽孢杆菌制剂优于其它芽孢杆菌组合,具有抗病与促生长作用.为开发无公害猪用微生物饲料添加剂奠定了基础.     

益生菌对白羽肉鸡生长性能及养殖效益的影响

试验旨在研究饲粮中添加丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、丁酸梭菌与地衣芽孢杆菌配伍（复合菌）、粪肠球菌对白羽肉鸡生长性能及养殖效益的影响。选用平均体重42 g左右的1日龄健康AA+白羽肉鸡1 360只，随机分成10组，试验组和对照组各5组。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中分别添加400 g/t丁酸梭菌制剂、1 000 g/t枯草芽孢杆菌制剂、1 000 g/t地衣芽孢杆菌制剂、400 g/t丁酸梭菌制剂+1 000 g/t地衣芽孢杆菌制剂、1 000 g/t粪肠球菌制剂。试验期43 d。结果表明：(1)与对照组相比，添加丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、复合菌能显著提高末重、平均日增重（P<0.05），显著降低料重比（P<0.05）；添加粪肠球菌降低末重、平均日增重（P>0.05），增加料重比（P>0.05）。(2)与对照组相比，添加丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、复合菌能提高白羽肉鸡毛利润，其增加值为枯草芽孢杆菌组>复合菌组>丁酸梭菌组>地衣芽孢杆菌组>粪肠球菌组。综上所述，饲粮中添加丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢...     

四株饲用芽孢杆菌的分离鉴定及其16S-rRNA的序列分析

芽孢杆菌是一类抗性强耐高温的细菌,部分芽孢杆菌有益生作用,在动物肠道内能有效抑制病原菌,促进肠道有益菌的繁殖,维持动物肠道内的微生态平衡。本试验从引进的饲料样品中分离出4株杆菌,分别命名为YB-1、YB-2、YB-3和YB-4,通过表型鉴定及16S-rRNA测序鉴定,YB-1为苏云金芽孢杆菌、YB-2、YB-4为枯草芽孢杆菌、YB-3为蜡样芽胞杆菌。16S-rRNA序列同源分析结果表明:YB-2、YB-4与枯草芽孢杆菌亚种的同源性分别为99.91%和100%;YB-1与苏云金芽孢杆菌亚种的同源性为99.17%,YB-3与蜡样芽胞杆菌亚种的同源性为100%,从样品中分离出两株枯草芽孢杆菌,一株苏云金芽孢杆菌和一株蜡样芽胞杆菌。     

基于宏基因测序的微生物饲料添加剂菌群结构及质量分析

随着饲料端全面禁抗，养殖端进入减抗、限抗时代，微生物饲料添加剂行业迎来了新的机遇。然而，如果在生产过程中控制不严，会造成产品的微生物污染，因此，需要对产品中的菌群结构进行分析，以保证产品质量。本文以4年采集的113个市售微生物饲料添加剂产品为研究对象，利用宏基因组测序、物种注释和统计学分析，研究微生物饲料添加剂产品的菌群结构和分布规律。结果表明：64.60%的微生物饲料添加剂样品存在非标识菌污染，主要表现在副地衣芽孢杆菌被误用为地衣芽孢杆菌、含有具有抑菌作用的贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌|污染菌中非致病菌主要是贝莱斯芽孢芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、副地衣芽孢杆菌、大肠杆菌、解淀粉芽孢杆菌、卷曲乳杆菌|致病菌主要是肺炎克雷伯菌，检出比例为5.98%|其次是蜡样芽孢杆菌，检出比例为12.82%。综上，宏基因测序技术可有效监测微生物饲料添加剂产品的菌群结构，非靶向检测产品中的污染菌。目前，产品存在检测菌种与标识不符、标识菌含量偏低、部分产品存在杂菌甚至致病菌的问题。本研究使用的非靶向研究方法和统计学得到的高频污染菌信息对微生物饲料添加剂产品的质量控制和行业监管具有重要参考意义。 [关键词] 微生物饲料添加剂|禁抗|宏基因组测序|菌群结构     

变质鸡蛋中蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定

从山东地区保存超过14 d大范围出现变质鸡蛋中分离到一株细菌,经过培养特性、生理生化鉴定和16S rDNA鉴定,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).分别将变质鸡蛋、煮熟的变质蛋、健康鸡蛋进行厌氧培养和细菌计数,发现健康鸡蛋和煮熟的变质蛋无蜡样芽孢杆菌,而变质鸡蛋中的细菌数量达到1.3×108CFU/g.本试验表明,蛋黄中过量的蜡样芽孢杆菌可能与鸡蛋变质有关,应注意过量添加蜡样芽孢杆菌可能影响蛋品的保鲜和食用安全性.     

一株高产α-淀粉酶的地衣芽孢杆菌的筛选及鉴定

芽孢杆菌属的一些菌株对动物和人类具有广泛的作用而被认为是益生菌,其中地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中较具有应用潜力的菌种之一。本文从健康的鸡、鸭、鹅、马、牛、羊粪便及周边土壤中分离出12株芽孢杆菌,并通过产总淀粉酶活性和α-淀粉酶活性筛选出6株产淀粉酶的芽孢杆菌,通过形态学分析、生理生化分析及分子鉴定,确定产酶性能最优的1株芽孢杆菌Bacillus6为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),这为后续饲料添加剂的应用提供重要的理论基础。     

健康反刍动物源饲用芽孢杆菌的分离筛选和鉴定

为筛选到性能良好的芽孢杆菌,笔者在呼和浩特郊区的几个健康牛羊养殖场采集了粪样、水样等28份样品进行芽孢杆菌资源调查。经分离和纯化培养,共分离出疑似芽孢杆菌35株,并通过16S r RNA及17项生化鉴定对其作进一步的确认和属种鉴定。经16S r RNA分析,有15株为芽孢杆菌属;再经染色镜检,生化试验结果与《常见细菌系统鉴定手册》对比,有枯草芽孢杆菌4株(占26.7%)、蜡状芽孢杆菌5株(占33.3%)、泛酸芽孢杆菌3株(占20.0%)、环状芽孢杆菌2株(占13.3%)、球形芽孢杆菌1株(占6.7%)。说明呼和浩特市郊区健康牛羊养殖场芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌为主,占60%。     

动物粪便中纤维素分解菌的分离和鉴定

纤维素分解菌可用于动物微生态添加剂和除臭剂。此试验采用羧甲基纤维素平板法及刚果红染色法,从鹅的粪便中初步分离筛选出7株能够降解纤维素的细菌,结合摇瓶发酵法进行复筛,最终选出3株羧甲基纤维素酶活性高的菌株,并对其进行形态学和16SrRNA鉴定。结果表明:3株纤维素分解菌的菌落形态不一,但其表面均微粗糙,革兰氏染色均呈阳性,短杆状或细杆状,有芽孢;结合16SrRNA鉴定结果,最终将分离到3个菌株鉴定为芽孢杆菌属的地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和沙福芽孢杆菌,分别命名为Bacillus licheniformis G-1、Bacillus cereus G-4和Bacillus safensis G-10。     

地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其抑菌活性分析

为了研究不同来源的地衣芽孢杆菌对常见致病菌的抑菌效果等生物学特性，试验采用细菌形态学、生理生化、16S rRNA基因测序、系统发育树分析、牛津杯抑菌试验等检测技术，对5株不同来源(鸡粪、羊粪、牛瘤胃内容物、猪肠内容物及土壤)的地衣芽孢杆菌进行了分离鉴定及体外抑菌活性检测。结果表明：5株分离株B₁₇(鸡粪)、B₃₀(羊粪)、B₃₂(牛瘤胃内容物)、B₃₅(猪肠内容物)和B₃₈(土壤)均可在LB固体培养基上生长，其中有3株不同来源的分离株B₃₀、B₃₅和B₃₈菌落形态相同；镜检可见分离株均为革兰氏阳性杆菌、均有近中生的孢子，符合芽孢杆菌的菌体特征；生理生化特性与芽孢杆菌相符；PCR扩增均得到约为1 500 bp的目的片段;所有分离株与GenBank中的地衣芽孢杆菌在同一簇，均鉴定为地衣芽孢杆菌；在5株地衣芽孢杆菌中，除猪源地衣芽孢杆菌B₃₅外，其余4株均有抑菌作用，羊源及牛源地衣芽孢杆菌B