重庆荣昌县牛、羊附红细胞体感染情况调查及危险性因素分析

采用鲜血压片、瑞氏染色法、姬姆萨染色法和PCR法检测荣昌县牛、羊附红细胞体的感染情况,并选择比数比(OR)、相对危险性(RR)及95%可信限(95%CI)对附红细胞体病的流行进行危害性评估.结果显示:鲜血压片、瑞氏染色法、姬姆萨染色法和PCR法检测附红细胞体,牛的阳性率为33%、33%、33%和0,羊的阳性率分别为64.5%、57.3%、53.6%和11.8%.圈养羊相对于放养羊感染附红体的危险性OR= 1.27,RR=1.18,95%CI=0.91～1.53.表明在荣昌地区牛、羊存在着附红细胞体感染.     

重庆地区山羊嗜血支原体(附红细胞体)感染率调查及危险性因素评估

为调查山羊嗜血支原体(附红细胞体)在重庆地区的感染率并评估危害其感染的因素,本研究将采集于重庆14个区县的共1191份山羊血液样本,分别采用染色镜检和PCR方法进行检测,并对不同养殖方式和地理条件进行分析。结果显示:山羊嗜血支原体感染率为16.1%,其中丘陵地区感染率(13.7%)低于山区(18.6%),规模化养殖场感染率(14.3%)低于农户散养(17.1%)。危险性因素分析结果显示:山区山羊嗜血支原体感染率是丘陵地区的1.43倍(OR1.43,95%CI1.05-1.95;χ2=5.13,d.f.=1,p=0.02),并且差异显著;农户散养山羊嗜血支原体感染率是规模化养殖的1.23倍(OR1.23,95%CI0.88-1.71;χ2=1.51,d.f.=1,p=0.22),差异不显著。表明不同的地理条件与山羊嗜血支原体感染率密切相关。     

重庆荣昌县猪附红细胞体感染情况调查及危险度分析

采用鲜血压片镜检、姬姆萨染色镜捡与基于16SrRNA—PCR检测方法,对重庆市荣昌县部分农户散养和规模养猪场进行猪附红细胞体感染的调查,并进行不同养殖规模下猪附红细胞体感染的危险度分析。结果发现,鲜血压片镜检、姬姆萨染色镜检和PCR法检测猪的附红细胞体感染率分别为61％、67％和76％;农户散养猪附红细胞体感染率（83％）显著高于规模化养猪场（68％）。危险度分析表明,农户散养猪感染附红细胞体的危险度明显高于规模养猪场,养殖规模的差异与猪附红细胞体的感染具有中等的联系强度（OR=2．32;95CI=1．99～2．69）。     

吉林省延边地区猪附红细胞体病分子流行病学调查

为了解吉林省延边地区近三年猪附红细胞体病感染情况,本试验对不同靶基因建立的PCR方法进行了比较,应用敏感性最好的PCR方法对延边地区5个县市的237头份猪血液样本进行了检测,并对不同地区、年龄段、季节、饲养方式等采集的样本进行了比较。结果显示,延边地区5个县市猪附红细胞体病感染的平均阳性率为23.6%(56/237),统计学分析表明,猪附红细胞体感染率在不同地区、年龄之间差异不显著(P>0.05);而夏秋两季猪附红细胞体感染率显著高于冬春两季(P<0.05);猪附红细胞体病在个体农户饲养方式中的阳性率显著高于规模化养殖方式(P<0.01),说明猪附红细胞体感染受季节、饲养方式等因素的影响较大。本试验为吉林省延边地区猪附红细胞体病的防控提供了科学的理论依据。     

吉林省部分地区羊附红细胞体病的流行病学调查

为了解吉林省羊附红细胞体病的流行情况,试验以羊附红细胞体26.0 ku抗原蛋白为诊断抗原,采用ELISA方法对吉林省的乾安、延吉、珲春、龙井4个县市的296份放牧绵羊的血清样本进行了羊附红细胞体抗体的检测。结果表明:在检测的296份血清样本中,以平原为主的乾安县羊附红细胞体抗体的阳性率为40.2%(53/132),以山区为主的延吉、珲春、龙井市羊附红细胞体抗体的阳性率分别为60.9%(39/64)、62.5%(25/40)、61.7%(37/60),平原与山区羊附红细胞体抗体阳性率差异极显著(P<0.01);羔羊与成年羊附红细胞体抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。说明吉林省是羊附红细胞体病的流行地区,尤其在山区感染严重。     

猪附红细胞体病的诊治技术

猪附红细胞体病是由市克次氏体中猪附红细胞体引起的传染病.本病以高热、贫血、黄疸、消瘦为主要特征.附红细胞体病是猪、牛、羊、犬、猫以及其他哺乳动物共患的传染病,但是猪附红细胞体其有种属特异性,不感染牛、羊、犬等其他动物.此病的发病率和死亡率可分别达40%和75%以上,造成很大的损失.     

猪附红细胞体病的诊疗

猪附红细胞体病是由立克次氏体中猪附红细胞体引起的传染病.本病以高热、贫血、黄疸、消瘦为主要特征.附红细胞体病是猪、牛、羊、犬、猫以及其他哺乳动物共患的传染病,但是猪附红细胞体具有种属特异性,不感染牛、羊、犬等其他动物.     

梨形虫和附红细胞体病的鉴别诊断与防治

2007-2012年,笔者对密云县辖区内的牛、羊进行了流行病学调查和临床检测,结果显示,梨形虫和附红细胞体这两种病的混合感染对牛羊危害较大,牛发病率为33.3%,死淘率高达23.3%,感染梨形虫的奶牛产奶量可下降80%。5年来,密云县动物疫控中心实验室对来就诊的598户863份牛、羊血液样品进行梨型虫和附红细胞体检测,梨形虫阳性率为72.9%,附红细胞体阳性率为88.8%。通过检测结果统计分析,4月份牛、羊的梨形虫感染数量开始增加,7-9月达到高峰。在梨形虫病和附红细胞体病易发时期应进行筛查,及早采取防治措施,避免造成更大的经济损失。     

应用PCR方法调查东北三省部分地区猪附红细胞体病流行情况

为了解东北三省猪附红细胞体感染情况,应用血液压滴标本镜检法和PCR检测方法对东北三省部分地区600头份猪血液样本进行了检测。结果:血液压滴标本镜检法检测阳性率为87.3%(524/600),PCR检测方法检测阳性率为91.5%(549/600)。其中种母猪阳性率为87.2%(34/39),育肥猪阳性率为90.8%(347/382),断奶仔猪阳性率为92.9%(78/84),哺乳仔猪阳性率为94.7%(90/95);黑龙江省阳性率为93.5%(187/200),辽宁省阳性率为89.5%(179/200),吉林省阳性率为91.5%(183/200)。结果表明,东北三省猪附红细胞体感染情况严重。     

浅谈猪附红细胞体病

附红细胞体病最早发现于1928年,1950年确定为猪的附红细胞体病,我国于1981年首先在家兔中发现附红细胞体。1986年puntarie等正式描述了人类附红细胞体病。目前已有30多个国家和地区报告了附红细胞体的感染情况。附红细胞体的宿主范围广泛,已有鼠、犬、牛、绵羊、猪、猫、兔、山羊、马、驴、骡、鸡、骆驼、南美洲驼羊、北极驯鹿、银狐等动物及人感染附红细胞体的报道,其中猪感染附红细胞体最为严重,引起巨大的经济损失。     

重庆地区牛附红细胞体分子流行病学调查

根据重庆地区不同的地理条件以及不同的养殖模式,采用16S rRNA-PCR检测方法对重庆市进行了牛附红细胞体的分子流行病学调查。结果显示:重庆地区存在牛附红细胞体感染,平均感染率为11%。其中规模化养殖平均感染率(6%)低于散养(16.7%),丘陵地区平均感染率(2%)低于高山地区(25.6%)。     

温氏附红细胞体部分16S rRNA基因的序列测定和分析

从确诊为附红细胞体感染的黄牛无菌采集血样，抽提附红细胞体基因组DNA，用实验设计的能扩增多种动物血营养菌部分16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增，结果扩增出大小约为370bp的DNA片段。PCR产物序列测定和系统进化分析显示，实验获得的核苷酸序列为温氏附红细胞体的16SrRNA基因，与国外报道的温氏附红细胞体的同源性为97％。反映出不同地理株的温氏附红细胞体存在一定的遗传差异，为牛附红细胞体病的诊断和分子流行病学研究提供科学依据。     

Comparative sequence analysis of 16S rRNA gene of Pasteurella multocida serogroup B isolates from different animal species

The phylogenetic relationships of five isolates of Pasteurella multocida serotype B:2 belonging to buffalo, cattle, pig, sheep and goat were investigated by comparative sequence analysis of 16S rRNA gene. The 1468bp fragment of 16S rRNA gene sequence comparison showed that the isolates of cattle (PM75), pig (PM49) and sheep (PM82) shared 99.9% homology with the buffalo isolate (vaccine strain P52) whereas, the goat isolate (PM86) shared 99.8% homology with the vaccine strain. The 16S rRNA gene sequences of these isolates were also found monophyletic with type B reference strain NCTC 10323 of P. multocida subsp. multocida. The present study indicated the close relationships of haemorrhagic septicaemia causing P. multocida serotype B:2 isolates of buffalo and cattle with other uncommon hosts (pig, sheep and goat).     

猪附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和系统进化分析

从确诊为猪附红细胞体感染的猪场，无菌采集血样，抽提猪附红细胞体基因组DNA，采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增，对扩增产物进行克隆和测序。从3个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1469bp的核苷酸序列。系统进化分析表明，3个猪场样品所测序列一致性达99．52％以上，具有相同的基因型，但与国外报道的猪附红细胞体Illinois株同源性为95％，属于同一基因群，但基因型不同；所有种类的附红细胞体和血巴尔通氏体组成同一进化分支，这类血营养菌与支原体科，支原体属的病原最靠近(75％)，而与立克次氏体目的病原较远(70％)。上述研究证实，广东所流行的猪附红细胞体是一种新基因型的猪附红细胞体，建议命名为猪附红细胞体广东株型；为反映进化关系，猪附红细胞体和其它血营养菌应划归于支原体科的支原体属。     

Comparison of blood smear and indirect fluorescent antibody techniques in detection of haemoparasite infections in trade cattle in Nigeria

The incidence of blood parasites in trade cattle was surveyed with emphasis on tick-borne parasites, using blood smears and immunofluorescent antibody (IFA) techniques. With the blood smear method, about 9 and 8.9% of cattle examined were found positive for Babesia bigemina and Anaplasma marginale, respectively. Percentage infections with other parasites were 3.33, 1.92, 0.75, 0.75 and 0.58, respectively, for Babesia bovis, Trypanosoma brucei, Anaplasma centrale, Eperythrozoon and Theileria species as well as Trypanosoma congolense. The incidence of A. marginale infection was at its peak during the rainy season while B. bigemina was most prevalent during the dry season. There were mixed infections of Anaplasma and Babesia (1.42%); Babesia and trypanosomes (1.00%); Babesia and Eperythrozoon (0.75%) and Babesia and Theileria (0.75%). Using the indirect fluorescent antibody test, 93, 55 and 68% of cattle sera examined were found to be positive for B. bigemina, B. bovis and A. marginale, respectively. Forty-nine percent of the positive sera of B. bigemina had highest titres. The importance of using serological means for determining the endemic levels of tick-borne diseases in cattle in Nigeria is discussed.     

High infection rates of the tick Hyalomma anatolicum anatolicum with Trypanosoma theileri

A crossbred calf (3 months old) obtained from a farm where regular control of ticks was practised and found to be free of blood parasites was inoculated with 20 ml pooled blood collected from four field cattle which had very low Trypanosoma theileri parasitaemias (one parasite per 70 microl blood as determined by the haematocrit centrifugation technique). Trypanosoma theileri was present in the blood 6 days after injection and a peak parasitaemia of 42 parasites per 70 microl blood was recorded by day 12. Hyalomma anatolicum anatolicum nymphs were applied on the ears of the calf on day 8 and they dropped engorged by days 13 and 14. The resulting adult ticks were examined for the presence of T. theileri by severing a leg and making a smear of the clear haemolymph which exuded from the wound. The smear was fixed in methanol and stained with Giemsa stain. The infection rate with T. theileri in the ticks was 43.3% (26 out of 60). The intensity of infection was very high and various developmental stages of the flagellates were observed (epimastigotes, sphaeromastigotes, trypomastigotes and other intermediate stages). The haemolymph from 12 ticks was also collected in tissue culture medium and the trypanosomes survived for 25 weeks before eventually dying. The results demonstrated unequivocally the high vectorial capacity of the tick H. a. anatolicum for T. theileri.     

绵羊附红细胞体人工感染小鼠模型的建立

分别用绵羊附红细胞体自然感染病羊的全血及分离纯化的绵羊附红细胞体对小白鼠进行攻毒,以建立绵羊附红细胞体人工感染小鼠模型。通过攻毒后症状观察、血液涂片镜检和绵羊附红细胞体特异性PCR检测法,对建立的模型进行评价。结果显示,各试验组小鼠人工感染后3~6 d,血液中均可检测到绵羊附红细胞体,而对照组小鼠未出现异常症状,且血液附红细胞体检查结果为阴性。该研究成功地构建了绵羊附红细胞体小白鼠感染模型,创建的模型可用于附红细胞体的生物学特性、致病机制、药物筛选等方面的研究。     

羊附红细胞体病PCR检测方法的建立

根据羊附红细胞体的16S rRNA基因参考序列，设计1对特异性引物．建立了检测羊附红细胞体的PCR技术。用本方法从感染血样中特异扩增出1条预期大小为1169bp的片段。该方法灵敏、快速、特异性高．可用于羊附红细胞体病的早期快速诊断和流行病学调查。     

牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用

为建立特异、敏感、快速的二温式PCR诊断方法,根据牛环形泰勒虫裂殖子表面抗原(tams1)基因,设计了一对特异性引物,扩增出大小为154bp基因片段,经克隆、测序分析,与已知基因序列的相似性为96%。用建立的牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法,对从新疆牛环形泰勒虫病流行地区采集的50份全血样品进行诊断,阳性率为88%,而血涂片检出的阳性率只有58%。经试验验证,该方法具有特异性高、敏感性强、重复性和稳定性好等优点。表明本试验所建立的二温式PCR诊断方法可用于牛环形泰勒虫病的临床诊断、隐性感染检测和流行病学调查。