外泌体在寄生原虫中的研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的囊状小体,内含大量的蛋白质、RNA和脂类等重要物质,在细胞间物质与信息的传递中起着重要作用。目前,对于外泌体的研究主要集中在肿瘤诊断和治疗等方面,而对于寄生虫领域外泌体的研究则刚刚起步。已有研究证明,寄生虫可利用外泌体作为细胞间通讯和与宿主联系的工具,通过多种机制产生外泌体,广泛传递其自身分子,调节宿主的免疫系统;还会利用外泌体相互转移传递毒力因子、药物抗性基因和分化因子,对疾病的发生发展具有重要作用。论文主要对外泌体在感染人类的多种寄生性原虫中的研究进展做一综述,为外泌体在寄生虫领域的研究提供新的思路。     

外泌体在寄生性原虫与宿主相互作用中的功能研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的大小均一的囊泡样小体,可携带蛋白质、脂质、核酸等生物活性成分,在细胞间物质与信息的传递中发挥重要作用.寄生性原虫可以利用多种机制产生外泌体并广泛传递其自身分子;当宿主细胞受到虫体入侵时,也会产生外泌体应对寄生虫感染.另外,寄生性原虫感染过程中虫体和宿主细胞产生的外泌体也可以参...     

外泌体调控寄生虫感染与免疫的研究进展

外泌体(exosomes)是一类由多种细胞分泌的纳米级的膜性小囊泡,内含蛋白质、脂质、核酸等生物活性成分,其在物质与信息的传递中起着重要作用。现有研究已经证实,在寄生虫感染过程中寄生虫及其感染的宿主细胞均能分泌外泌体,其携带有来自分泌细胞的多种特异性蛋白和iRNA等,在寄生虫感染和免疫调控中发挥着重要作用。而且,这些外泌体特异性分子在循环系统中能稳定存在,使其有望成为寄生虫病诊断与治疗的新靶标。本文概述了寄生虫来源的外泌体的生物学特征,重点阐述了外泌体在寄生虫感染与免疫中的作用,展望了其在寄生虫病诊断与治疗中的应用前景。     

外泌体介导细胞损伤的研究进展

外泌体作为一种胞外小囊泡，由不同细胞主动分泌。有证据表明外泌体能够参与并介导靶细胞的许多生理过程。外泌体中包含多种类型的microRNA(miRNA)、DNA和蛋白质，有助于细胞间信息的传递，能调节受体细胞相关基因的表达，还能影响靶细胞的功能。细胞损伤作为疾病发生的病理基础，其调节过程中有外泌体的参与，外泌体不仅能作用于细胞间信号通路，还能通过外泌体miRNA作用于靶向蛋白等对细胞损伤修复起到调节作用。对外泌体在细胞损伤中作用的研究进展进行总结，并对其在动物疾病中的应用进行了展望。     

外泌体在动物病毒感染中作用研究进展

外泌体是最小的细胞外囊泡,作为一种重要的细胞间通讯载体,广泛存在于体液中。外泌体本身可以携带复杂的核酸和蛋白质,越来越多的研究表明其在病毒感染中起着重要作用。因此,病毒利用外泌体产生感染的作用机制受到了国内外学者的广泛关注。作者通过对近年来外泌体在病毒感染中相关作用的研究进行总结,以期为外泌体在抗病毒方面的研究提供参考。     

外泌体在机体抗结核分枝杆菌感染中的作用及其应用

结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的严重危害人类健康的主要传染病之一,全球每年都会有数百万人死于结核病,但目前结核病的预防和治疗仍然未取得重大突破。外泌体(exosomes)是一种多种细胞均可分泌的囊泡结构,其内含有多种成分,它在细胞间的信息传递、机体免疫等生理过程中发挥着重要的作用。近年来的研究发现,外泌体与结核病的发生发展有密切的联系,外泌体与结核病的研究已经成为当前的研究热点之一,其在结核病的诊断和治疗中的潜在价值也越来越受到人们的关注。本文就外泌体在机体抗结核分枝杆菌感染中的作用及其应用的相关研究进展进行综述。     

外泌体携带miRNA进入邻近细胞能够促进新城疫病毒(NDV)感染

外泌体(Exosome)是一类由细胞主动分泌释放到胞外的小囊泡,直径大小约为30 nm^150 nm。它凭借自身能在细胞间传递蛋白、核糖核酸、脂类等小分子物质而在细胞间通讯中发挥着关键作用。近年来,关于外泌体与病毒感染的研究报道主要集中在人类病毒,尤其是外泌体在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)和丙型肝炎病毒(The Hepatitis C virus,HCV)感染中生物功能的研究。然而,禽类病毒外泌体的相关报道较为鲜见。     

外泌体对卵泡卵母细胞及胚胎发育影响的研究进展

外泌体是一种由多种细胞分泌的直径为40～100 nm的细胞外囊泡,参与细胞间的信息传递,在卵母细胞生长发育以及胚胎发育等方面起到非常重要的作用.本文介绍了外泌体组成、提取、鉴定和功能,并对外泌体在调控卵母细胞发育与胚胎发育中的作用进行阐述,以期为外泌体的进一步研究提供参考依据.     

外泌体的生物学功能及其在动物遗传育种中的应用

外泌体是一种广泛存在于多种细胞间质中的囊泡,多种细胞在正常情况下或在细胞外刺激等应激条件下都能产生外泌体,来自不同细胞类型的外泌体作用机制及功能有很大区别。外泌体可通过膜蛋白与靶细胞膜蛋白结合、膜蛋白碎片与细胞膜上受体结合、膜与靶细胞膜直接融合等方式传递生物活性分子,从而参与机体免疫、细胞分化等过程。由于外泌体具有来源天然、穿越屏障能力好、生物相容性强等特点,在许多研究领域均受到广泛的关注。作者介绍了外泌体的形态特点、形成过程、作用机制、分离纯化、生物学特性、功能及应用;总结了近年来外泌体在畜禽研究中的应用。外泌体不仅可应用于动物遗传育种中,还可作为工具或载体来研究动物体内各种生化途径。该综述可为外泌体的相关研究及应用提供参考。     

猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响

旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子（CD81、TSG101）;PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30~200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显（P<0.01）,外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖（P<0.01或P<0.05）;PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。     

小反刍兽疫病毒疫苗毒株N75-1感染细胞源外泌体对山羊SLAM表达的影响

淋巴细胞信号活化分子（SLAM）是小反刍兽疫病毒（PPRV）在淋巴细胞的主要受体。本研究旨在探索PPRV感染细胞源外泌体对山羊SLAM表达的影响。通过荧光定量PCR法、流式细胞术和Western blot技术检测PPRV疫苗毒株N75-1感染山羊外周血单核细胞（PBMCs）源外泌体（Exo-PPRV）共育对接纳细胞（正常山羊PBMCs）中SLAM表达水平和细胞因子分泌水平的影响。结果表明,与正常细胞分泌外泌体（Exo-Mock）共育组相比,Exo-PPRV共培养组细胞SLAM mRNA和细胞表面表达水平均显著上调（P<0.05）,TNF-α、IL-10和IFN-γ表达水平升高,而IFN-α水平降低（P<0.05）。进一步研究表明,Exo-PPRV中荷载高水平的PPRV H蛋白且可以将其传递至接纳细胞中,同时pcDNA3.1-H转染组中SLAM表达水平较pcDNA3.1对照转染组和未转染组明显升高。以上结果表明,PPRV感染PBMCs源外泌体对接纳细胞中SLAM表达水平具有显著正调控作用,外泌体中载荷高水平PPRV H蛋白是其调控接纳细胞SLAM表达的关键分子之一。     

猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响

旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG101);PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30～200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显(P0.01),外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖(P0.01或P0.05);PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。     

外泌体长链非编码RNA对脂代谢调控机制的研究进展

外泌体（exosomes）是一类由细胞分泌并且可远距离传递生物信息的纳米级胞外囊泡。它通过细胞分泌释放，在体液中传播，最后被其他细胞吞噬以达到传递生物信息的作用。脂类代谢一直是生命科学研究领域的热点，虽然影响脂质代谢的长链非编码RNA（lncRNA）很多，但外泌体中影响脂质代谢的lncRNA研究却相对较少。基于这个原因，对于外泌体源lncRNA的研究就十分必要。作为外泌体所携带的重要遗传物质之一，lncRNA是一类长度 > 200 nt的RNA分子，行使着诸如转录激活、染色质修饰等许多重要的生物功能。文章介绍了外泌体源lncRNA的生物学特点，列举了外泌体源lncRNA通过不同的分子机制来直接或间接的对脂质代谢产生影响的实例，分析了外泌体源lncRNA由于表达异常所导致的脂类代谢疾病，并且举例说明了外泌体源lncRNA作为生物标记的原理，最后对外泌体源lncRNA可作为家畜脂肪沉积生物标记功能的前景做了展望。如果在未来的研究中有更多的外泌体源lncRNA被检出，并足够对脂类代谢异常情况进行标记的话，那么对于预测和调控家畜脂肪沉积无疑会产生积极的意义。     

外泌体对哺乳动物妊娠的调控作用

外泌体（exosome）广泛存在于各种体液中，其内部包含蛋白质、脂质、mRNA和miRNA等在细胞间进行物质和信息传递的多种生物活性成分，参与调节机体多种生理过程。近年来，研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体，且证明其可能参与配子发生、受精、胎盘发生、胚胎着床及胎儿发育等生殖过程，进一步加深了人们对哺乳动物妊娠过程的认识，为一些重要的生殖调控机理研究提供了新的思路。因此，本文主要阐述了外泌体的发现、外泌体在哺乳动物妊娠中的作用以及与妊娠疾病关系的最新进展，为进一步揭示外泌体在哺乳动物妊娠中的调控作用提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定

旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。     

感染绵羊痘病毒的绵羊睾丸细胞外泌体源性蛋白组学分析

外泌体是细胞主动分泌的纳米级囊泡,参与机体多种生理和病理学过程,具有重要的生物学功能。为了探究外泌体源性相关蛋白在绵羊痘病毒感染过程中的作用机制,本试验利用绵羊痘病毒感染绵羊睾丸细胞,分离外泌体,并对分离的外泌体源性蛋白进行质谱和蛋白组分析。将获得的原始数据与蛋白质数据库进行匹配和质检筛选,共鉴别出453种宿主细胞相关蛋白和6种绵羊痘病毒蛋白。GO通路分析表明,感染绵羊痘病毒的绵羊睾丸细胞外泌体源性蛋白参与复杂的细胞生理过程,主要包括免疫反应、内吞途径、代谢及生物调控等过程,在绵羊痘病毒的感染和扩散过程中起着重要作用。这有望为绵羊痘疫病的诊断试剂、新型疫苗及治疗药物的研发提供理论基础和依据。     

畜牧兽医中外泌体的研究进展

外泌体(exosome)尺寸大小为30~100 nm,可由多种细胞分泌到胞外,如T细胞、B细胞、上皮细胞、树突状细胞和肿瘤细胞等,尿液、血液、乳液、唾液和精液等生物体液中也能分离到外泌体。外泌体作为一种新型的物质携带载体,被证明能够携带蛋白质、DNA、mRNA和miRNA等具有生物活性的物质,并将这些物质转运到受体细胞,改变受体细胞遗传信息。外泌体的研究从最开始的分离鉴定已经逐渐过渡到相关功能的验证。例如,外泌体能够携带病毒特异性结构蛋白参与病毒在细胞间的传递,病毒依靠外泌体逃避机体免疫监控;癌细胞分泌的外泌体能够影响癌细胞的转移和扩散;母乳中的外泌体能够通过自身携带的营养物质调节子代免疫系统发育等。因此,外泌体功能的研究与利用已成为当下研究的热点。     

外泌体对动物肠道健康的影响及其研究方法

在无抗养殖的大背景下, 动物的肠道健康问题愈加引起关注。肠道是机体消化吸收营养物质的主要器官, 也是防止肠道微生物侵袭的先天屏障, 肠道屏障功能的完整性对机体的正常生长发育起着至关重要的作用。外泌体是一种内源性调节物质, 可作为解决肠道健康问题的切入点。外泌体是由多种类型细胞分泌的纳米级细胞外囊泡, 其广泛分布于各种体液中, 可携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性物质, 它们参与细胞之间的传递、细胞的迁移和增殖等进程, 在机体的生理和病理过程中发挥作用。近期研究表明, 外泌体可通过调节肠道菌群的组成、诱导小肠干细胞的增殖, 修复动物的肠道屏障功能。作者梳理了近年来外泌体对畜禽肠道健康影响及外泌体的研究方法, 为后续相关研究提供参考。     

寄生虫来源的外泌体研究进展

外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡,包含蛋白质、脂质和核酸等物质,发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带,寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流,寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中,调控宿主免疫,介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体,可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力,为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机,进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状,减少药物残留,提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用,以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。     

外泌体的生成及其在畜禽繁殖中的作用

细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是一种由细胞分泌的膜性囊泡结构。外泌体是最小的细胞外囊泡，通过激活细胞特异性受体和信号通路来控制其生物发生，由转运所需的内体分选复合物(endosomal sorting complexes required for transport, ESCRT)依赖性或非依赖性途径调节。外泌体在免疫、中枢神经系统的发育、组织再生、妊娠、精子发育成熟等过程中发挥重要作用。哺乳动物的精浆中大量存在外泌体，参与调节精子活力、抗氧化、精子获能、精卵结合等生理学过程。在妊娠过程中，外泌体促进胚胎着床、母胎双向交流、血管生成，提高妊娠成功率。家禽的繁殖过程也受到外泌体的调控。目前研究表明，鸡的精液中已被证实外泌体的存在，与维持精子活力相关。进入母鸡生殖道的精子储存在母鸡的贮精囊中，贮精囊细胞会分泌外泌体样细胞外囊泡，并作用于精子，增加贮精囊中精子的存活率，保证精子活力，促进精卵结合。文章主要阐述了外泌体的生成机制及其在哺乳动物和禽类繁殖过程中的作用，为进一步推动畜禽繁殖工作的发展提供参考。