外泌体的功能及其在临床应用中的研究进展

外泌体（exosome）是通过细胞内多泡体与细胞膜融合产生的纳米级细胞外膜泡,广泛分布在血清、尿液、唾液和其他生物液体中。外泌体作为细胞间通信和遗传物质的重要转移载体,可通过受体介导的相互作用或通过各种生物活性分子（如细胞膜受体、蛋白质、mRNA和miRNA）的转移直接刺激靶细胞,从而发挥其生物学功能。文章主要综述了外泌体内含蛋白质和miRNA的功能及外泌体在临床中的应用。外泌体内蛋白质和miRNA的功能包括生理状态下诱导机体免疫、递呈抗原、参与细胞间信号传导;病理状态下改变肿瘤微环境、促进癌细胞增殖、侵袭、加快血管生成、促进癌症发展;以及某些病毒可将其组分包装、整合到外泌体中来实现细胞间传播,或劫持外泌体,实现免疫逃避。作者主要介绍了其作为肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌等多种癌症早期诊断的生物性标志物,以及作为稳定性高、转运效率高、靶向性强的药物载体在临床中的应用。     

外泌体的功能及其在临床应用中的研究进展

外泌体(exosome)是通过细胞内多泡体与细胞膜融合产生的纳米级细胞外膜泡,广泛分布在血清、尿液、唾液和其他生物液体中。外泌体作为细胞间通信和遗传物质的重要转移载体,可通过受体介导的相互作用或通过各种生物活性分子(如细胞膜受体、蛋白质、mRNA和miRNA)的转移直接刺激靶细胞,从而发挥其生物学功能。文章主要综述了外泌体内含蛋白质和miRNA的功能及外泌体在临床中的应用。外泌体内蛋白质和miRNA的功能包括生理状态下诱导机体免疫、递呈抗原、参与细胞间信号传导;病理状态下改变肿瘤微环境、促进癌细胞增殖、侵袭、加快血管生成、促进癌症发展;以及某些病毒可将其组分包装、整合到外泌体中来实现细胞间传播,或劫持外泌体,实现免疫逃避。作者主要介绍了其作为肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌等多种癌症早期诊断的生物性标志物,以及作为稳定性高、转运效率高、靶向性强的药物载体在临床中的应用。     

外泌体在肿瘤及寄生虫病中的应用研究进展

外泌体(EVs)也称作胞外囊泡,是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的磷脂双分子层小囊泡。1983年,研究人员在绵羊网织红细胞中首次发现外泌体,最初认为外泌体只是细胞代谢废物,但随着对其生物来源、物质构成、运输、细胞间信号传导及在体液中分布等方面深入研究,发现外泌体具有多种功能。近年来研究发现,外泌体在肿瘤早期诊断、肿瘤转移和扩散等方面都扮演重要角色,并且有可能成为新型药物载体应用在肿瘤治疗方面。随着外泌体功能和生物学特点的深入研究,这种新型药物载体技术也有可能应用到抗寄生虫病,为寄生虫病的治疗提供新思路。     

外泌体的生物学功能和调控机制研究进展

外泌体是直径30~100 nm的小囊泡,内含多种蛋白与核酸,分布与来源广泛。目前,对于外泌体的研究涉及间充质干细胞、骨细胞、癌细胞、心、肝、肺等几乎机体全部组织,外泌体在机体免疫应答、细胞迁移、细胞增殖分化、细胞凋亡、肿瘤侵袭等过程具有重要功能作用,为疾病诊治、组织修复治疗提供了新思路。外泌体主要通过内含的多种mRNA与miRNA发挥众多功能,不同来源、不同环境下其发挥作用不同。本文主要对外泌体的发生、分离纯化及功能调控机制进行综述,为选择合适的外泌体提取方法与更深入研究外泌体提供参考。     

外泌体生物学功能及应用研究进展

外泌体是由细胞主动向外分泌的双层囊泡小体,可携带多种蛋白质、核酸和脂质等在体液中循环,具有物质"运输载体"的作用,能够将内含物质运输到周围细胞中进行细胞间的物质运输和信息交流,从而参与多种生理及病理学过程,如递呈抗原、促进肿瘤生长与迁移、修复损伤组织等。大量研究证实,外泌体对疾病治疗具有决定性帮助,特别是在疾病早期诊断和作为药物载体进行靶向治疗方面拥有广阔的应用前景。论文从外泌体的发生机制、主要成分和功能、外泌体与疾病发生以及外泌体的应用等方面进行综述。     

外泌体对动物肠道健康的影响及其研究方法

在无抗养殖的大背景下, 动物的肠道健康问题愈加引起关注。肠道是机体消化吸收营养物质的主要器官, 也是防止肠道微生物侵袭的先天屏障, 肠道屏障功能的完整性对机体的正常生长发育起着至关重要的作用。外泌体是一种内源性调节物质, 可作为解决肠道健康问题的切入点。外泌体是由多种类型细胞分泌的纳米级细胞外囊泡, 其广泛分布于各种体液中, 可携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性物质, 它们参与细胞之间的传递、细胞的迁移和增殖等进程, 在机体的生理和病理过程中发挥作用。近期研究表明, 外泌体可通过调节肠道菌群的组成、诱导小肠干细胞的增殖, 修复动物的肠道屏障功能。作者梳理了近年来外泌体对畜禽肠道健康影响及外泌体的研究方法, 为后续相关研究提供参考。     

外泌体在寄生原虫中的研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的囊状小体,内含大量的蛋白质、RNA和脂类等重要物质,在细胞间物质与信息的传递中起着重要作用。目前,对于外泌体的研究主要集中在肿瘤诊断和治疗等方面,而对于寄生虫领域外泌体的研究则刚刚起步。已有研究证明,寄生虫可利用外泌体作为细胞间通讯和与宿主联系的工具,通过多种机制产生外泌体,广泛传递其自身分子,调节宿主的免疫系统;还会利用外泌体相互转移传递毒力因子、药物抗性基因和分化因子,对疾病的发生发展具有重要作用。论文主要对外泌体在感染人类的多种寄生性原虫中的研究进展做一综述,为外泌体在寄生虫领域的研究提供新的思路。     

牛乳外泌体的分离鉴定及功能研究进展

外泌体是由细胞分泌的含有RNA等小分子和蛋白质的纳米级小囊泡,很多细胞在正常或者病理情况下都可以分泌外泌体,并通过细胞膜将外泌体释放到细胞外进而到达靶细胞后发挥作用.牛乳外泌体可作为"细胞信使"介导细胞间的信息转导,调节肠道屏障功能和肠道微生物菌群平衡及代谢.文章对牛乳外泌体的形态结构、分离与鉴定以及功能特性进行综述,...     

外泌体参与骨骼肌机能调控研究进展

骨骼肌与动物体健康及产肉动物的生产性能有着密切的联系。骨骼肌的生长发育是一个非常复杂的生物学过程,受到多种因素的调控。外泌体(exosomes)又称外泌小体,是一种由活细胞分泌的直径在30nm~100nm的膜性小囊泡,含有细胞特异性的蛋白质、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变受体细胞的功能,在细胞间物质和信息传递中起重要作用。论文就外泌体的发现与应用、分离与鉴定及其参与骨骼肌生长发育、再生和肌肉萎缩等过程中的调控作用的研究进展进行综述,以期为骨骼肌生长发育机制及相关疾病的研究提供参考。     

外泌体在寄生性原虫与宿主相互作用中的功能研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的大小均一的囊泡样小体,可携带蛋白质、脂质、核酸等生物活性成分,在细胞间物质与信息的传递中发挥重要作用.寄生性原虫可以利用多种机制产生外泌体并广泛传递其自身分子;当宿主细胞受到虫体入侵时,也会产生外泌体应对寄生虫感染.另外,寄生性原虫感染过程中虫体和宿主细胞产生的外泌体也可以参...     

外泌体对哺乳动物妊娠的调控作用

外泌体（exosome）广泛存在于各种体液中，其内部包含蛋白质、脂质、mRNA和miRNA等在细胞间进行物质和信息传递的多种生物活性成分，参与调节机体多种生理过程。近年来，研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体，且证明其可能参与配子发生、受精、胎盘发生、胚胎着床及胎儿发育等生殖过程，进一步加深了人们对哺乳动物妊娠过程的认识，为一些重要的生殖调控机理研究提供了新的思路。因此，本文主要阐述了外泌体的发现、外泌体在哺乳动物妊娠中的作用以及与妊娠疾病关系的最新进展，为进一步揭示外泌体在哺乳动物妊娠中的调控作用提供参考。     

乳源外泌体研究进展

外泌体(exosomes)是一种纳米级别的细胞外囊泡,广泛存在于多种动物的组织和体液中,在各种类型的细胞外囊泡中,外泌体作为一个载体可以携带多种具有生物活性的内含物,而这些内含物的分拣是一个受调控的、非随机的过程.近年来,有研究发现,哺乳动物的乳源外泌体通过消化道被吸收后,可以促进幼畜肠道和免疫系统的发育,同时还参与一...     

鸽毛滴虫外泌体的分离鉴定及蛋白质谱分析

旨在研究鸽毛滴虫是否分泌外泌体及虫源外泌体的蛋白组成和功能,为探索外泌体在鸽毛滴虫寄生过程中的作用奠定基础。采集鸽毛滴虫感染个体口腔及咽部病灶处样本,进行分离培养及纯化,使用显微镜鉴定虫体形态,提取DNA并比对其序列,确定培养物是否为鸽毛滴虫虫株;通过对培养液上清进行超速离心,透射电子显微镜、Western blot技术和纳米颗粒追踪分析（nanoparticle tracking analysis,NTA）鉴定培养液上清中是否含有虫源外泌体;最后通过Label-free技术分析虫源外泌体的蛋白质谱表达。结果显示,虫体具有明显的毛滴虫形态及特征,与鸽毛滴虫ITS1/5.8S/ITS2基因比对率达98%。从虫体培养液中提取的囊泡经透射电子显微镜观察具有明显的茶托样结构;NTA结果显示,粒径集中于125.1 nm,峰值粒径为132.3 nm,占比99.3%;CD63和TSG101等外泌体标记蛋白的条带明显,表明提取物为外泌体。质谱结果显示,烯醇酶、3-磷酸甘油醛-脱氢酶、磷酸甘油酸变位酶和延伸因子为表达量较高的蛋白质。GO功能注释显示外泌体蛋白富集到细胞内和胞浆等细胞组分,发挥GTP连接和GTP酶活性功能,参与小GTPase介导的信号转导与糖酵解等过程。KEGG通路富集表明,虫源外泌体蛋白主要富集于代谢途径、糖酵解/糖异生、抗生素的生物合成和次级代谢产物的生物合成等通路。本研究发现鸽毛滴虫可以分泌外泌体,并对虫源外泌体进行蛋白质谱分析,提示虫源外泌体中的蛋白质在寄生虫的能量代谢、信号转导及生物合成等过程中发挥重要作用。     

Comparative analysis of miRNAs in exosomes released by sheeppox virus-infected ovine testicular cells

Exosomes, secreted by various cells, are nanometer-scale vesicles with the functions in intercellular communication. To understand a role of exosomal miRNAs in the sheeppox virus infection, exosomes were isolated from sheeppox virus-infected sheep testicular cells 0 h, 24 h and 72 h post infection. The results of transmission electron microscopy and size distribution showed that all three exosome samples were spherical particles with negatively-stained membrane, ranging from 39 nm to 127 nm in diameter. A total of 106 known and 279 novel miRNAs were identified, and 78 known and 54 novel miRNAs were commonly detected in three exosome samples. Compared with the exosomes by the uninfected controls, a total of 34 known miRNAs were aberrantly expressed in the exosomes from infected cells. In agreement with the sequencing data, the expression of oar-miR-21 and oar-miR-10b was shown to be the highest in exosomes at 24 h after SPPV-infected, and the expression of oar-let-7f was the highest in exosomes at 72 h. Conversely, the expression of oar-let-7b and oar-miR-221 was significantly decreased 24 h and 72 h post infection compared with 0 h. The analysis results also revealed that differentially expressed miRNAs were mostly involved in an immune system process and stimulus response. These results provide rich data to further investigate a role of exosomal miRNAs in SPPV-host interactions.     

金黄色葡萄球菌处理对奶牛乳腺上皮细胞外泌体表征的影响

【目的】本研究旨在从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus,以下简称金葡菌)处理奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cell,BMEC)上清中分离外泌体,探究金葡菌与BMEC数量比值(MOI)和处理后培养时间对外泌体总浓度的影响,并对金葡菌诱导BMEC释放的外泌体进行分离和鉴定。【方法】采用金葡菌临床分离菌株以MOI＝1和MOI＝10分别处理BMEC 3 h,对已处理的BMEC继续无外泌体培养9、12、24 h,同时设空白对照组,通过扫描电镜观察金葡菌处理对BMEC造成的超微结构损伤。采用超速离心法分离金葡菌诱导的BMEC上清液中的外泌体,分别用透射电镜、纳米颗粒追踪分析技术及Western blotting法对外泌体形态、颗粒大小和特异性标志蛋白进行分析鉴定。通过检测外泌体总蛋白浓度评估不同MOI和处理后培养时间对外泌体总量的影响,明确金葡菌诱导BMEC释放外泌体的最佳条件。【结果】通过扫描电镜观察发现,金葡菌处理BMEC后,细胞微绒毛脱落,细胞骨架破坏。透射电镜观察分离的外泌体为圆形的双层膜囊泡,直径在30~150 nm,形态均一。通过检测外泌体总蛋白浓度显示,在MOI＝10时,培养9、12和24 h金葡菌诱导BMEC释放外泌体蛋白浓度均高于MOI＝1,而培养12 h时释放外泌体蛋白浓度最高。对金葡菌诱导BMEC释放的外泌体进一步鉴定,其平均直径约为116 nm;Western blotting检测结果显示外泌体标记物CD9、CD81和TSG101表达阳性。【结论】本研究从形态学和分子生物学特征等方面证实获得的分离物为外泌体;金葡菌可以诱导BMEC释放外泌体,当MOI＝10时,金葡菌处理细胞3 h后继续无外泌体培养12 h,收获的细胞上清中外泌体蛋白含量最高。     

鸡胚及禽类细胞系在生物医药领域的应用及研究进展

鸡胚因发育过程清楚，长久以来作为基础和应用科学研究领域重要的实验模型，尤其在鸡胚发育早期绒毛尿囊膜阶段，因其血管丰富，是天然的免疫缺陷宿主，是病理学、药理学和肿瘤学等研究领域的理想实验模型。作者简述了发育早期的鸡胚组织结构，并介绍了鸡胚绒毛尿囊膜在肿瘤研究、血管生成、器官移植、烧伤等疾病机理研究中的应用，以及在鸡胚病理模型基础上进行的抗肿瘤药物筛选的应用。重点介绍了鸡胚及禽类细胞系在病毒繁殖和疫苗生产、治疗性蛋白和单抗生产方面的应用研究进展。多种人源病毒、禽源病毒、支原体等可在鸡胚及禽类细胞上增殖，并用于疫苗生产。作者对常用的禽类纤维原细胞和多能干细胞的发展和特点进行了阐述，并总结了商业化的禽类细胞系来源以及部分易感病毒。鸡胚表达系统能够在目的蛋白特定位点产生人源化糖基，减少目的蛋白对人的过敏反应，且禽蛋廉价易得，可作为生产人用单克隆抗体和治疗性蛋白的合适供体。作者介绍了鸡胚及禽类细胞系在生物医药领域应用的最新进展，并对鸡胚作为动物模型在未来的应用进行了展望。     

The Application and Research Progress of Chicken Embryo and Avian Cell Lines in Biomedicine

Chicken embryo has long been an important experimental model in basic and applied science because of its clear development process,especially in the early development of chicken embryo chorioallantoic membrane stage,due to its abundant blood vessels,it is a natural immunodeficiency host and can be used as an ideal experimental model for pathology,pharmacology and oncology research.The authors briefly described the tissue structure of early stage of chicken embryo,the application of chick embryo chorioallantoic membrane model in tumor,angiogenesis,organ transplantation,burn and other diseases,and the application of anti-cancer drug screening based on the pathological model of chicken embryo.The advances in the application of chicken embryo and avian cell lines in virus reproduction,vaccine production,therapeutic protein production and monoclonal antibody production were reviewed.A variety of human viruses,avian viruses and mycoplasma can proliferate in chicken embryos and avian cell lines and be used in vaccine production.In this paper,the development and characteristics of commonly used avian fibroblasts and pluripotent stem cells were described,and the source of commercial avian cell lines and some susceptible viruses were summarized.Chicken embryo expression system can produce human glycosylates at specific sites of target proteins,reduce the allergic reaction of the target protein to human,and poultry eggs are cheap and easily available,so it can be used as a suitable donor for the production of human monoclonal antibodies and therapeutic proteins.In this paper,the recent progress in the application of chicken embryos and avian cell lines in the field of biomedicine was introduced,and the future application of chicken embryos as animal models was forecasted.