天坛株痘苗病毒基因缺失弱毒株的构建及鉴定

本研究旨在通过敲除部分与天坛株痘苗病毒(vaccinia virus Tiantan strain,VTT)毒力和宿主范围等相关的复制非必需基因,并结合双标记筛选及外源筛选标记敲除技术,构建多基因缺失VTT弱毒株。人工合成7对重组臂,结合痘病毒早晚期复合强启动子pE/L和外源筛选标记增强型绿色荧光蛋白(Enhance green fluorescent protein,EGFP),构建穿梭载体质粒pTC-EGFP、pTA35-EGFP、pTA66-EGFP、pTE-EGFP、pTB-EGFP、pTI-EGFP和pTJ-EGFP。将上述质粒依次与VTT或基因缺失VTT共转/感染BHK细胞,并通过同源重组和荧光蚀斑筛选方法,逐一敲除拟缺失基因片段(TC:TC7L^TK2L;TA35:TA35L;TA66:TA66R;TE:TE3L;TB:TB13RTK2L;TA35:TA35L;TA66:TA66R;TE:TE3L;TB:TB13R^TB14R;TI:TI4L;TJ:TJ2R)。利用Cre/Loxp系统实现对外源筛选标记的敲除,最终获得天坛株痘苗病毒基因缺失弱毒株TTVAC7,并运用PCR方法对TTVAC7进行鉴定和遗传稳定性检测。结果表明,本研究成功构建了缺失7个目的片段的天坛株痘苗病毒弱毒株TTVAC7,且该弱毒株具有良好的遗传稳定性。     

半干旱区造林技术初探

在半干旱地区植苗造林成活与否 ,取决于从选择良种壮苗到抗旱栽植管理整个过程中的苗木水分状况     

禽流感病毒H5HA、H7HA、H9HA亚型夹心ELISA方法的建立

将禽流感病毒(AIV)H5、H7、H9血凝素亚型标准血清中的IgG作为包被抗体,H5、H7、H9血凝素亚型单克隆抗体作为第二抗体,建立了双抗体夹心ELISA(AC-ELISA)方法,并优化了反应条件.结果表明:单抗和标准血清最适工作质量浓度分别为5、10 mg/L,标准阳性血清于4℃包被12 h,二抗作用条件为37℃作用1 h,封闭条件为37℃作用1 h,酶标抗体工作条件为1∶5 000稀释后,37℃作用1 h,底物作用条件为37℃作用10 min.阴阳性抗原临界值为0.274～0.332.本方法具有很高的特异性和敏感性.     

胶体金方法检测H3和H7亚型禽流感病毒

用微波法制备金溶胶,对禽流感病毒(AIV)H3和H7亚型单克隆抗体(H3-1D6和H7-1F7)用亲和层析法进行纯化,优化单抗与金溶胶的最佳结合条件后,喷涂于玻璃纤维上制成金标垫.将纯化的马抗H3和H7亚型AIV多克隆抗体和山羊抗鼠二抗分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,制备胶体金检测试纸条.用制备的试纸条对H3和H7亚型AIV标准抗原、毕赤酵母真核表达蛋白和已知样品进行检测,结果与血凝试验、血凝抑制试验、AC-ELISA和RT-PCR方法相符.同时用该方法对H5和H9亚型AIV标准抗原、病料以及传染性支气管炎、新城疫等抗原进行检测,结果均为阴性.该方法操作简单,肉眼于10 min内可判定结果,且达到了血凝试验和血凝抑制试验的敏感性.     

重组鸡痘病毒vFV282疫苗株在鸽体内的分布及毒性试验

采用翅内侧皮肤无血管处刺种途径给30日龄幼鸽接种重组鸡痘病毒vFV282疫苗株,利用PCR的方法检测其在鸽体内的分布及其动态并对其毒性进行了研究。结果显示,接种后6 h即在脾脏检测到病毒DNA;接种后1 d,脾、肺PCR检测阳性;3 d,在心、肝、脾、肺、肾、皮肤均检测到病毒DNA;7 d,心、肝、脾、肺、肾、脑PCR检测均呈阳性;10 d,除脑外所有内脏器官中均未检测到病毒DNA,15 d后所有内脏器官PCR检测结果均为阴性。而对照组在整个试验期间PCR检测结果均为阴性。毒性试验表明,重组鸡痘病毒vFV282疫苗株使用安全。     

3种抗氧化剂对黄粉虫油的氧化抑制作用

[目的]有效延长黄粉虫油的保质期.[方法]以过氧化值(POV)、酸价(AV)作为油脂品质的评价标准,在黄粉虫油中加入3种抗氧化剂(TBHQ、PG、BHA),探究其对黄粉虫油酸败的抑制效果.[结果]在黄粉虫油中加入不同浓度的单一抗氧化剂均可一定程度地抑制黄粉虫油的酸败,其中添加0.01％TBHQ时抑制效果最好;在真空条件下添加单一抗氧化剂对黄粉虫油酸败的抑制效果显著高于空气条件下.在黄粉虫油中添加复合抗氧化剂,抑制酸败的效果更明显,其中其他条件不变,添加TBHQ:BHA=3:1时试验样品AV最低,添加TBHQ:BHA=1:3时试验样品的POV最小.[结论]复合抗氧化剂抑制黄粉虫油酸败的效果更佳.     

猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响

通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖（PPS1），经纯化测定其糖含量，用红外光谱分析鉴定多糖，纯化鉴定的PPS1，通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用，同时与猪苓菌核多糖（PPS2）进行比较。试验数据经统计学分析显示，E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著（P〈0．05）；腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验覆EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著（P〈0.01）；5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明，PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。     

用中草药制剂提高犬繁殖率的研究

养犬业已成为新兴的一个特色产业。近几年来建立犬规模化圈养，出现了许多问题，特别是繁殖障碍巳成为养犬业发展的首要制约因素。由于在圈养的条件下，常影响犬的内分泌和繁殖机能，出现长期乏情、屡配不孕、假孕、产仔数少等问题导致繁殖率低下，严重影响养犬业的发展。从2002年开始，针对规模化圈养犬繁殖机能障碍的原因，用中药制剂对繁殖机能低下的犬进行了繁殖试验，使雌性犬的分娩率及产仔率逐年提高，取得了显著的效果。     

微生物富硒菌肥在叶用莴苣生产上的应用

【目的】为微生物富硒菌肥农业生产上实际应用寻找依据。【方法】以安妮、北紫生二号和北紫生三号为试验材料,采用田间小区裂区试验法,在叶面上喷施微生物富硒菌肥,分析营养品质及硒含量。【结果】叶面喷施微生物富硒菌肥可以有效增加叶用莴苣的单株质量和硒、维生素C、蛋白质含量,且不同品种的叶用莴苣外源施硒的最佳喷施浓度和喷施时间存在显著差异。【结论】本试验条件下,安妮喷施稀释25倍菌肥、北紫生二号和三号使用稀释30～60倍菌肥时效果最好。     

基于智能电网的配电自动化建设探讨

伴随着用电需求的日益增长与企业的快速发展,建设智能电网得到了政府部门的高度重视。同时,为更好的满足用电需求,保证系统稳定运行,需要加大智能电网配电自动化建设力度。现阶段,我国智能电网配电自动化建设存在诸多不足,加强配电自动化建设成为当务之急。本文就以此展开论述,供相关人员借鉴。