核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。     

猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响

通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖（PPS1），经纯化测定其糖含量，用红外光谱分析鉴定多糖，纯化鉴定的PPS1，通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用，同时与猪苓菌核多糖（PPS2）进行比较。试验数据经统计学分析显示，E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著（P〈0．05）；腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验覆EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著（P〈0.01）；5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明，PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。     

用中草药制剂提高犬繁殖率的研究

养犬业已成为新兴的一个特色产业。近几年来建立犬规模化圈养，出现了许多问题，特别是繁殖障碍巳成为养犬业发展的首要制约因素。由于在圈养的条件下，常影响犬的内分泌和繁殖机能，出现长期乏情、屡配不孕、假孕、产仔数少等问题导致繁殖率低下，严重影响养犬业的发展。从2002年开始，针对规模化圈养犬繁殖机能障碍的原因，用中药制剂对繁殖机能低下的犬进行了繁殖试验，使雌性犬的分娩率及产仔率逐年提高，取得了显著的效果。     

林蛙红腿病病原分离及鉴定

林蛙红腿病是由嗜水气单胞菌引起的 ,主要危害体质瘦弱的幼蛙及成蛙。每年 5～ 9月为发病高峰。本病传染非常快 ,死亡率高 ,特别是近年来随着林蛙人工养殖业的兴起 ,发病较多严重影响林蛙养殖业的发展。本试验对引起林蛙红腿病的病原体进行了分离、鉴定及药敏试验。为防治林蛙红腿病提供理论依据 ,现将试验结果报告如下。1　材料和方法1.1　材料病料 (来自龙井市某林蛙养殖场的发病林蛙 ) ,培养基 (普通琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、ＲＭ琼脂培养基等 ,自制 ) ,生化试剂 (上海医学化验所产品 ) ,药敏试纸 (上海医学化验所产品 ,木醋液 (Ｍ…     

液体浅层培养对猪苓菌丝体生长及其多糖含量的影响

通过液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，在培养28d后，猪苓菌丝体的鲜重达到最高，而菌丝体干重在21d后增幅不大；培养28d后的培养液pH由接种前的3．9升高到5．0，菌丝体旺盛生长阶段的pH为4．0～4．6；菌丝体中总糖含量在培养14d后达到最大，浅层培养猪苓菌丝体生产猪苓多糖的适宜培养周期约为2周；对从猪苓菌丝体和猪苓菌核中提取的猪苓多糖进行红外吸收光谱比较分析，两者红外光谱图相似，表明多糖的主要组成成分相同，但含量上有差异。     

基于侧向层析原理的赭曲霉毒素A快速检测试纸条的研制

针对霉菌毒素精准检测技术的开发对于保障食品安全至关重要。利用胶体金与赭曲霉毒素A单抗偶联物和赭曲霉毒素A-BSA偶联物（OTA-BSA）,开发了一种快速检测赭曲霉毒素A的方法。研究结果表明:①当OTA-BSA配制终质量浓度为4.8 g·L-1,质控线用羊抗鼠IgG配制终质量浓度为1.5 g·L-1,硝酸纤维素（NC）膜的包被量为1.0 μL·cm-1时呈现最清晰、最均匀的条带。②赭曲霉毒素A胶体金快速检测试纸条的灵敏度达到1.0 μg·L-1,检测时间仅为5 min,非常适合现场快速检测。该检测试纸条具有携带方便、灵敏度高、特异性强等优点。由于本方法检测时间短,灵敏度高,与传统的仪器和酶联免疫检测方法相比,在野外和临床检测中更具有推广应用价值。图5表1参12     

塔里木河下游植被非生长季火灾风险等级遥感评估

以塔里木河下游地区为例,利用已知火灾发生点前后时段卫星遥感数据,计算干枯燃料指数(dead fuel index, DFI)和2种燃烧指数,即归一化燃烧指数(normalized burn ratio, NBR)和燃烧面积指数(burn area index, BAI),分析干枯燃料指数和燃烧指数的相关性,并评估研究区的火灾风险等级。结果表明：燃烧指数可以较为准确地得到过火区域的位置;干枯燃料指数(DFI)与燃烧指数存在一定的相关性,R分别为0.53(NBR)、0.51(BAI);2021年2月发生的火灾处于高风险区域,说明干枯燃料指数可以作为火灾风险等级评估指标,并利用2020—2021年秋冬季分析,得到火灾风险等级图。     

利用PicoGreen作为检测探针建立基于核酸适配体识别的玉米赤霉烯酮快速检测方法

玉米赤霉烯酮(ZEN)是一种能对动物和人类产生毒性的真菌毒素。研发灵敏而准确的玉米赤霉烯酮快速检测技术对于保障食品动物安全至关重要。该研究以PicoGree荧光染料为检测探针,利用其仅与dsDNA结合后才发出荧光的特性(激发波长:480nm,发射波长:520nm),当ZEN不存在时,适配体能够与其互补链结合而形成dsDNA,导致荧光强度增强;当ZEN存在时,适配体与ZEN结合而不能形成dsDNA,导致荧光强度减弱。建立了一种基于核酸适配体识别的ZEN快速检测方法。灵敏度试验表明:该方法的最低检测限为0.1μg/L(0.1ppb),线性范围为0.1~1μg/L(0.1~1ppb)。检测时间可以控制在40min内。特异性试验结果表明:ZEN核酸适配体与桔青毒素(CTN)、赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B_1(AFB_1)和伏马毒素B_1(FB_1)等真菌毒素不会出现交叉反应。本研究与传统的基于抗体识别的ELISA快检方法进行比较,Kappa值为0.805,表明二者一致性相当。由于核酸适配体价廉,检测时间短,因此本文开发的ZEN检测方法较常用的ELISA方法更具有推广和应用价值。     

猪苓菌核与猪苓菌丝体中提取多糖对小鼠免疫器官重量影响的比较研究

通过人工液体浅层培养的方法成功培养出猪苓菌丝体．用热水浸提法分别提取猪苓菌核和猪苓菌丝体中的多糖，并用3，5一二硝基水杨酸法测定其糖含量，进一步纯化处理后，用傅里叶红外吸收光谱仪进行比较分析表明，两者红外光谱图相似．通过对小鼠免疫器官重量的免疫学检测，表明从猪苓菌丝体中提取的多糖和从猪苓菌核中提取的多糖均有提高机体免疫器官重量的作用，统计学分析表明差异不显著。     

塔里木河上游典型河岸稳定性分析

以BSTEM(Excel中的宏计算)为基础对塔里木河上游典型河岸阿拉尔大桥断面和沙雅大桥断面河岸进行稳定性分析,主要得出以下结论:1,阿拉尔大桥断面和沙雅大桥断面在枯水期时河岸稳定系数Fs最低均为1.36,在枯水期时河岸稳定系数最高分别为2.43和2.25,表明河岸在枯水期时稳定性最强,退水期时稳定性最差;2,两断面河岸在洪水期时冲刷后退最为严重,最大侵蚀宽度为2.36 m和2.51 m,分别占全年侵蚀宽度的45.7%和45.9%。