液体浅层培养对猪苓菌丝体生长及其多糖含量的影响

通过液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，在培养28d后，猪苓菌丝体的鲜重达到最高，而菌丝体干重在21d后增幅不大；培养28d后的培养液pH由接种前的3．9升高到5．0，菌丝体旺盛生长阶段的pH为4．0～4．6；菌丝体中总糖含量在培养14d后达到最大，浅层培养猪苓菌丝体生产猪苓多糖的适宜培养周期约为2周；对从猪苓菌丝体和猪苓菌核中提取的猪苓多糖进行红外吸收光谱比较分析，两者红外光谱图相似，表明多糖的主要组成成分相同，但含量上有差异。     

猪苓菌丝菌核的显微结构及其多糖含量研究

为了选择猪苓的最佳菌株及其采收的最佳发育阶段,研究了猪苓3个菌株菌丝体的形态结构、多糖含量,并对不同发育阶段菌核的显微结构和多糖累积进行了研究。结果表明,猪苓3个菌株在孢子形态和数量、菌索形成和草酸钙方晶上存在明显差异;菌株X2的菌丝生长快、长势旺,菌丝体浓密洁白,易形成菌索,菌丝体及发酵液的多糖含量最高,分别为30.4 mg/g和0.111 mg/mL,菌丝体生长速度最快,为0.2458 cm/d;人工白苓与野生白苓在形态和显微结构上相似;野生黑苓菌核的多糖含量最高,达56.41 mg/g,人工白苓最低,为15.95 mg/g。说明在3个菌株中,X2合成猪苓多糖的能力较强,药用价值高,质量最优;3种不同发育阶段的菌核中,野生黑苓的质量最优。     

不同发育阶段猪苓菌核显微结构和成分含量的比较

比较不同发育阶段猪苓菌丝、菌核显微结构和有效成分的含量.以卢氏县不同发育阶段的野生猪苓菌核为试验材料,用插片法和石蜡切片比较茵丝、茵核的显微结构;用超声提取和苯酚硫酸法测定菌丝菌核的多糖含量;用HPLC测定茵丝茵核的麦角甾醇含量.野生茵核随着生长年限的增加,茵丝的分化程度增高且结构致密,表皮木质化,同时多糖和麦角甾醇含量逐渐增高;蜜环菌的侵染诱导了菌核防御结构的发生,菌丝木质化并产生隔离腔,也有利于多糖和麦角甾醇的累积;液体发酵培养的菌丝体,其多糖和麦角甾醇的含量均高于各阶段的野生菌核.     

土壤微生物发酵液对猪苓菌丝生长的影响

【目的】研究土壤微生物发酵液对猪苓菌丝生长发育及胞外多糖质量浓度的影响,为其大规模人工栽培提供技术支持。【方法】从猪苓生活的土壤中分离微生物(细菌、放线菌、真菌),通过平板试验,筛选对猪苓菌丝或菌核生长有促进作用的菌株;用筛选出的微生物发酵液培养猪苓,以不添加发酵液的培养基为对照,比较不同发酵液处理对猪苓菌丝生物量及胞外多糖质量浓度的影响。【结果】平板培养中,细菌L2、L3、L5、L9处理菌丝均有分泌物出现;随着培养时间延长,菌丝颜色逐渐变黄变褐,除L2外,其余细菌菌株处理猪苓均有菌核生成;放线菌A14处理猪苓菌丝生长速度较快,但与对照差异不显著;真菌P3处理猪苓菌丝生长速度与对照相比显著提高。在液体培养基中,真菌P4发酵液可显著提高猪苓菌丝生物量,菌丝体干质量达7.67 g/L;放线菌A3发酵液处理猪苓菌丝胞外多糖质量浓度最高,达0.133 g/L。【结论】从土壤中筛选出了能够促进猪苓菌丝生长发育、提高猪苓胞外多糖质量浓度的菌株。     

猪苓菌丝体液体培养基配方的筛选研究初报

猪苓菌丝体液体培养是工业化生产猪苓多糖的有效途径。为了寻求高效的猪苓菌丝体液体培养工艺,对猪苓菌丝体液体培养基的配方进行了筛选研究。结果表明：以“葡萄糖＋马铃薯煮汁＋蜜环菌煮汁”、“麦芽糖＋蜜环菌煮汁＋麦麸煮汁”2种配方培养的猪苓菌丝生长最好,而成合培养基的猪苓菌丝长势最差。     

猪苓生物学特性的研究进展

总结了我国分布较广的药用真菌猪苓(Polyporus umbellatus)的生态学和生物学特性、菌丝的培养特性和猪苓菌与伴生菌和蜜环菌的相互关系等研究进展,其生长发育过程经过担孢子、菌丝体、菌核和子实体等阶段,伴生菌和碳源是影响猪苓菌核形成的决定性因素。固体培养中,25℃、黑暗和中性偏酸的条件适合菌丝的生长。蜜环菌和猪苓菌为复杂的共生关系。可为猪苓菌的深入研究和人工栽培提供参考。     

西北地区猪苓仿野生人工栽培技术

猪苓属高等专性寄生性真菌,而蜜环菌是猪苓专性寄主,其他高等植物（菌材）又是蜜环菌的寄主。结合西北地区自然条件和气候特点,根据猪苓和蜜环菌的生物学特性,人为创造适宜条件,建立起猪苓、蜜环菌、高等植物三者寄生链条关系,以鲜猪苓菌核为繁殖材料,以猪苓菌核或菌核组织培养的菌丝体做种,在猪苓休眠期,采用地面砌池连片双层栽培法,能有效提高猪苓人工栽培的成活率,并具有成本低、经济效益显著的特点,可在同类地区推广。     

应用均匀设计法优化猪苓菌丝体漆酶和蛋白酶的最适产酶条件

以长白山区野生猪苓菌核经组织分离得到的猪苓纯培养菌种为试材,运用均匀设计法对猪苓菌丝体产漆酶和蛋白酶的培养条件进行了优化研究,试验结果表明,猪苓菌丝体最适产漆酶和蛋白酶培养条件为:培养液初始pH值为7、培养温度30℃、培养时间29d;在最适产酶条件下培养猪苓菌丝体,实测得胞外漆酶及蛋白酶的活性分别为0.25、6.13 U/mL.     

适合于全长cDNA文库构建的猪苓菌核及菌丝体总RNA提取方法比较

[目的]筛选出适合于c DNA文库构建的猪苓菌核及菌丝体总RNA的提取方法。[方法]采用Trizol改良法和EASY Spin植物快速提取试剂盒法(简称试剂盒法)对猪苓菌丝及菌核的总RNA进行提取。[结果]经紫外分光光度计对所得总RNA的均一性及1%琼脂糖凝胶电泳对所得总RNA的完整性检测后发现,2种方法均可提出完整的总RNA,试剂盒法相较于Trizol改良法其所提取的总RNA质量和纯度都较好,但Trizol改良法所提取的总RNA产率比较高。[结论]LD-PCR成功合成了猪苓菌核和菌丝体的c DNA产物,呈弥散状分布在1 0005 000 bp和7502 500 bp,满足c DNA建库的要求。     

猪苓菌丝体胞外蛋白酶和漆酶的酶学性质

以采自长白山区野生猪苓菌核经组织分离得到的猪苓纯培养菌种为试材,对猪苓菌丝体胞外蛋白酶和漆酶反应的最适温度及最适pH值进行了研究,结果表明:猪苓菌丝体胞外蛋白酶的最适反应温度为45℃,适宜反应pH值范围是7.0 -8.0;猪苓菌丝体胞外漆酶反应的适宜温度范围为45～50℃,适宜pH值范围是4.5 -5.0.     

猪苓高产栽培方式试验初报

为提高猪苓单位面积产量和效益，通过深层增氧加湿和自然供养供湿及与单、双层菌材不同排列相结合的方式，进行不同栽培方式试验，寻找猪苓高产栽培技术因子的最佳组合。结果表明，以菌材双层排列与深层增氧加湿相结合的方式效果最佳，并在不同因素不同水平间存在极显著差异。     

多孔菌发酵代谢物的抑菌活性研究

用乙酸乙酯和正丁醇分别从多孔菌(Polyporus variusPers.:Fr.)摇瓶发酵液的上清液和菌丝体中提取生物活性物质,然后分别对不同细菌和植物病原菌进行抑菌活性的测定。试验结果表明,发酵液的乙酸乙酯提取物能显著抑制金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠杆菌;菌丝的乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的抑制作用较强;而菌丝的正丁醇提取物对5种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。     

猪苓栽培技术研究

由于猪苓的用途不断拓展,野生猪苓的资源濒临枯竭,造成猪苓供需矛盾尖锐。为保护野生资源和缓解猪苓供需矛盾,该文根据猪苓生长适宜条件,摸索猪苓栽培技术,为猪苓人工栽培提供参考。     

优质猪苓菌株的初步筛选

以不同来源的17个猪苓菌株为研究对象,基于菌丝干重、生长速度、多糖含量、菌丝细胞核数目以及菌丝颜色这5个筛选指标,用SPSS16.0对各个菌株进行聚类分析,结果表明,GU-02、GU-04、GU-06、GU-07-2、GU-15菌株的菌丝体纯白色,培养14 d后未见老化现象,双核菌丝较多,菌丝体多糖的含量明显高于其他菌株。     

长白山区猪苓半人工栽培技术体系的研究

通过对长白山区野生猪苓的系统研究，从栽培场地的选择、种核选取、栽培方法、栽后管理、采收加工等方面提出了适宜长白山区资源条件和气候特点的猪苓半人工栽培技术体系．     

猪苓的称谓及学名更替

对猪苓的中外称谓和学名更替进行了介绍,以期为猪芩的规范使用提供参考。     

不同氮源对长白山鸡爪苓菌丝体生长及几种胞外酶活性的影响

研究3种不同氮源（蛋白胨、硝酸钠、硫酸铵）对长白山鸡爪苓菌丝体生长及其胞外蛋白酶、多酚氧化酶及纤维素酶活性的影响.结果表明：3种不同氮源对鸡爪苓菌丝体生长有显著影响,在蛋白胨培养基中菌丝生长速度快、菌丝洁白、菌丝体生物量大;鸡爪苓菌丝体的胞外蛋白酶活性在蛋白胨培养基中达到最高;多酚氧化酶和纤维素酶的酶活性在3种不同培养基中亦表现出很大的差异.     

猪苓多糖对四氯化碳诱导建鲤肝损伤的保护作用

[目的]研究猪苓多糖对四氯化碳（CCl4）诱导建鲤急性肝损伤的保护作用,为鱼类肝胆综合征治疗药物的筛选提供理论依据.[方法]在基础饵料中添加不同比例（0.1％、0.5％和1.0％）的猪苓多糖连续饲喂建鲤8周后,采用CCl4进行急性肝损伤造模,72 h后采集血液分离血清,检测血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总抗氧化能力（T-AOC）及丙氨酸转氨酶（GPT）、天冬氨酸转氨酶（GOT）活性;采集肝脏组织匀浆上清液,检测匀浆上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量;同时采集肝脏组织制备组织切片,显微镜下观察组织结构变化.[结果]经CCl4诱导处理能引起建鲤血清肝功能指标、抗氧化指标显著变化,肝脏组织结构明显受损,肝细胞核仁大部分消失,呈核空泡化.但在基础饵料中添加1.0％猪苓多糖能极显著降低血清GOT、GPT活性（P＜0.01）,显著升高血清TP、ALB、T-AOC值（P＜0.05,下同）;显著升高肝脏组织匀浆上清液中SOD、GSH、GSH-Px活性,显著降低MDA含量;明显抑制CCl4对肝脏组织结构造成的损伤,肝脏组织结构基本恢复正常.[结论]在建鲤基础饵中添加1．0％猪苓多糖对CCl4所引起的肝脏损伤有明显的保护作用,可有效清除机体内自由基和抑制脂质过氧化。