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1.
2.
旨在探究脂肪酸氧化(fatty acid oxidation,FAO)对BCG介导的RAW264.7细胞自噬和促炎因子表达的调控作用。用BODIPY染色和游离脂肪酸定量试剂盒检测BCG感染后RAW264.7细胞中脂滴聚集情况以及脂肪酸含量;Western blot检测BCG感染对肉毒碱棕榈酰基转移酶1A (CPT-1A)表达的影响;Etomoxir (100 μmol·L-1)预处理细胞2 h后,BCG感染细胞6 h,检测RAW264.7细胞中BCG存留量,并用Western blot方法检测自噬相关蛋白(Beclin1、LC3-II)和溶酶体蛋白(Rab7)的表达情况;用免疫荧光方法和mRFP-GFP-LC3荧光双标腺病毒分别检测自噬小体聚集和自噬流;荧光定量PCR和ELISA分别检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达情况以及在细胞培养上清中的含量。结果显示,BCG感染促进RAW264.7细胞中脂滴聚集和CPT-1A的表达,而游离脂肪酸含量降低;Etomoxir预处理抑制了细胞中BCG存活,并上调了Beclin1、LC3-II和Rab7表达,且细胞中出现大量自噬小体聚集,自噬流增强,却抑制了促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达与分泌。综上表明,抑制FAO可促进BCG感染诱导的RAW264.7细胞自噬,并抑制BCG感染引起的炎症反应。 相似文献
3.
用从奶牛副伤寒疫区分离到的鼠伤寒沙门氏菌株配以标准菌株,制备鼠伤寒沙门氏菌菌苗,在疫区给临产母牛和青年育成牛免疫接种,共免疫牛1050头,均无不良反应,通过攻毒保护试验,接种菌苗的犊牛可抵抗300亿强毒活菌的攻击,免疫牛血清中抗鼠伤寒沙门氏菌体的效价达1:256。同时,利用自制的抗鼠伤寒沙门氏菌高免血清对未进行免疫接种的牛进行紧急预防和治疗,效果显著,由此表明,利用当地菌株制备菌苗,可有效地预防奶 相似文献
4.
用大肠杆菌K99-F41基因工程亚单位苗以两种剂量分别免疫接种怀孕母牛和怀孕母羊,待其所产幼畜吃过初乳后,经口灌服幼畜腹泻的强毒活菌,犊牛500亿/头,羔羊250亿只。结果,正常免疫剂量组,犊牛腹泻病率为19%,死亡率为零;羔羊腹泻发病率为15%,死亡率为5%。 相似文献
5.
6.
7.
绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)可引起绵羊(Ovis aries)及山羊(Capra hircus)的支原体性肺炎,分布广泛,危害严重.本实验在课题组前期完成MO Y98株基因组测序的基础上,通过基因注释、PCR等获得了该菌株可能的溶血素(hemolysin,hlyA)基因;依据大肠杆菌(Escherichia coli)优势密码子对hlyA基因进行优化,构建优化后hlyA原核表达质粒pET32a-hlyA;将该质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,获得了相应的重组菌株,并对重组菌株进行诱导表达;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western blot对表达的重组蛋白进行鉴定,并经Ni2+金属螯合柱纯化.克隆了MO hlyA基因序列(GenBank登录号:KT598390),片段大小为375 bp,编码125个氨基酸.优化后密码子适应指数为0.91,目的基因适于在大肠杆菌中表达.重组融合蛋白多以包涵体的形式存在,其相对分子质量约为31.6 kD,与预期大小一致.Western blot结果显示,上清中纯化出的目的蛋白能与一抗发生反应,重组蛋白特异性较好.溶血实验表明,当纯化后蛋白浓度稀释到0.125 μg/mL时,溶解红细胞的能力已经下降.该研究结果为后续绵羊肺炎支原体致病性研究提供了基础资料. 相似文献
8.
9.
荒漠植物柠条根瘤菌的抗逆性及其系统发育分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对分离自宁夏白芨滩国家级自然保护区的62株柠条根瘤菌的耐盐性、耐酸碱性、生长温度范围和抗生素抗性进行了测定,并采用16S rDNA PCR-RFLP和16S rDNA全序列分析方法对其进行了遗传多样性及系统发育分析.结果表明:柠条根瘤菌具有较强的耐受高温和耐盐、耐酸碱能力,抗逆性较强,但仍存在菌株间差异.70.8%的菌... 相似文献
10.
旨在探索产气荚膜梭菌外毒素造成机体炎性损伤及免疫调控紊乱的毒性机制,为产气荚膜梭菌病的致病机理研究提供理论基础。将C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2培养上清腹腔注射BALB/c小鼠,采集小肠样本进行转录组测序,筛选差异表达基因,并对其进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。结果显示,共获得40.99 Gb有效碱基,筛选后共得到795个差异表达基因,其中,229个基因表达上调,566个基因表达下调,对随机选取的10个基因进行q-PCR验证,其相对表达量与转录表达谱一致。GO功能注释主要涉及G蛋白偶联核苷酸受体活性和G蛋白偶联嘌呤核苷酸受体活性等。KEGG通路富集分析发现,主要富集在TNF信号通路、IL-17信号通路、p53信号通路、FOXO信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路等。产气荚膜梭菌外泌毒素侵入机体,会激活TNF等炎性信号通路,进而造成肠道发生炎性损伤甚至坏死。 相似文献