NDVLaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒（NDV）特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明，V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前3天左右出现，但除高峰期（1周左右）外，其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota免疫鸡。LaSota疫羁免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgGr抗体高峰较V4免疫鸡提前约2周出现，攻毒后，LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著，而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。     

鸡新城疫和鸡痘疫苗口服接种的免疫应答

用鸡新城疫F毒株和鸡痘HP_1毒株对鸡单独和联合经口免疫,比较其体液免疫反应和免疫原性。两个鸡群各自的抗新城疫病毒血凝抑制(HI)抗体滴度和抗鸡痘病毒的被动血凝(PHA)抗体滴度相似。各组鸡经第二次接种后血清中IgG浓度显著增高,新城疫疫苗诱发产生的IgG量显著高于鸡痘疫苗。两种疫苗联合免疫和新城疫F毒株疫苗单独免疫,血清中产生的IgG浓度无明显区别。用新城疫和鸡痘强毒,在不同日龄经联合和单独免疫获得的保护力并无显著差异。     

某复方中药抗禽流感病毒的免疫机制

通过SPF鸡服用某复方中药后,了解免疫器官指数、外周血液中CD 3、CD 4、CD 8及TCR 1T淋巴细胞百分比含量及IgG的变化,探索某复方中药对禽流感病毒作用的免疫机理.结果表明:给药组免疫器官指数、外周血液中CD 3、CD 4、CD 8及TCR 1 T淋巴细胞百分比含量及IgG均比对照组高.所以,该复方中药可促进SPF雏鸡免疫器官的发育和迅速成熟,提高SPF鸡的细胞免疫及体液免疫功能.     

大围山微型鸡与科宝肉鸡免疫球蛋白含量及CATH-2基因表达差异研究

试验以相同条件下饲养的4、8、12周龄的大围山微型鸡和科宝肉鸡为研究对象,分别测定其免疫球蛋白含量(IgA、IgG、IgM)及胸肌、肝脏、小肠中的CATH-2 mRNA表达量,比较二者之间的差异。结果显示:大围山微型鸡血液中免疫球蛋白含量总体上低于科宝肉鸡,两个鸡种随着日龄的增加IgA、IgG含量均呈现先下降后上升趋势,IgM含量呈现下降趋势,且两个试验鸡种在4周龄时IgA、IgM、IgG含量均不同程度的高于8、12周龄。CATH-2 mRNA表达量在两个鸡种间存在差异,大围山微型鸡胸肌和肝脏中CATH-2 mRNA表达量均低于科宝肉鸡,而小肠中CATH-2 mRNA表达量显著高于科宝肉鸡。结果表明:在相同饲养条件下,大围山微型鸡免疫机能强于科宝肉鸡,具有潜在的较强的抗感染能力。     

兔抗鸡IgG-HRP酶标抗体的制备与检测

将经多种方法提纯的鸡IgG与从美国Sigma公司购买的纯鸡IgG产品进行对比研究证实 ,用辛酸沉淀 50 %SAS 离子交换层析方法可获得纯度很好的鸡IgG产物。运用该产物成功制备了兔抗鸡IgG抗血清以及抗鸡IgG重链抗血清。用辛酸沉淀 50 %SAS 35 %SAS盐析提纯的兔抗鸡IgG与用NaIO4 作用 1 6～ 2 0min的已氧化辣根过氧化物酶 (HRP)结合 6h,获得了优质可靠的兔抗鸡IgG HRP酶标抗体     

如皋鸡NLRC5基因外显子8多态性及其与部分免疫指标的关联分析

采用PCR-SSCP技术对中国地方鸡种如皋鸡NLRC5基因外显子8多态性进行检测,结果检测到AA和AB2种基因型,基因型频率分别为0.867 9和0.132 1,X2适合性检验表明如皋鸡NLRC5基因外显子8等位基因的分布处于Hardy-Weinberg平衡状态。序列分析结果显示,NLRC5基因外显子8存在G43A同义突变。测定部分免疫指标,分析不同周龄如皋鸡个体免疫指标的差异以及12周龄如皋鸡2种基因型与免疫指标间的关联性,结果表明：IgM含量和IgG含量变化比较一致,随周龄不断降低;2周龄IgM含量显著高于4、6、8、10、12周龄（P〈0.05）;12、10、8周龄IgG含量极显著低于2、4、6周龄（P〈0.01）;淋巴细胞转化率在12周龄达到最大值为33.742%,极显著高于其他周龄（P〈0.01）;12周龄AA型个体的IgM和IgG含量、淋巴细胞转化率均高于AB型个体,但差异并不显著（P〉0.05）。     

同时及分段接种对鸡痘免疫效果的观察

在养鸡实践中,笔者了解到给青年蛋用鸡同时接种鸡新城疫Ⅰ系苗和鸡痘苗后,鸡的反应较重,而且有部分鸡只仍会出痘.为了确切弄清这一现象,以便采取相应对策,指导以后的防疫工作,笔者于1992年8月有意识的对一批青年鸡作了一次用新城疫Ⅰ系苗和鸡痘苗同时及分段接种免疫对比试验.结果发现试验鸡只对新城疫的免疫应答良好,对鸡痘的免疫出现了异常现象.现把试验经过和笔者的初步分析等报道如下. 一、材料与方法: 1.选鸡分组:试验分别在三家养鸡户进行,三群罗斯鸡因进鸡时间不同有三月龄和四月龄的不等.试验前,给所有鸡只都按要求接种过马立克氏病苗,新城疫Ⅱ系苗,法氏囊苗.并严格淘汰病弱鸡只,最后参试只数为650只,按自然群编为试验组400只,试验二组200只,对照组50只. 2.疫苗稀释:①新城疫Ⅰ系苗:选用陕西生物     

GC02鸡球虫病疫苗免疫效果的观察

试验研究了GC02鸡球虫病疫苗免疫预防鸡球虫病的效果.试验一选择100只肉杂鸡,饲养至21日龄时,随机分为A、B、C、D四组,其中A组免疫肉鸡球虫病疫苗,B组免疫GC02鸡球虫病疫苗,C组为不免疫攻虫组,D组为不免疫不攻虫组,A、B组于21日龄口服免疫球虫苗,A、B、C三组于28日龄时口服接种1×105个孢子化卵囊攻虫,于36日龄捕杀A、B、C、D组全部鸡只,以比较肉鸡球虫病疫苗与GC02鸡球虫病疫苗的预防效果.结果表明两种球虫病疫苗均能有效的抗雏鸡艾美耳球虫感染,且是安全有效的.试验二选择100只肉杂鸡,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五组.研究了GC02鸡球虫病疫苗不同免疫次数的保护作用,Ⅰ组于14日龄免疫GC02鸡球虫病疫苗(4 000个卵囊),Ⅱ组分别于7日龄(4 000个卵囊)、21日龄(8 000个卵囊)免疫GC02鸡球虫病疫苗,Ⅲ组分别于7日龄(4 000个卵囊)、14日龄(8 000个卵囊)、21日龄(12 000个卵囊)免疫GC02鸡球虫病疫苗,Ⅳ组为不免疫攻虫组,Ⅴ组为不免疫不攻虫组,于28日龄时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均口服接种1×105个孢子化卵囊攻虫,36日龄捕杀全部鸡只,观察GC02鸡球虫病疫苗不同免疫次数的免疫效果.结果表明2次免疫的效果优于1次免疫和3次免疫,2次免疫能有效的控制球虫病的发生,对雏鸡有明显的促生长作用.     

鸡传染性法氏囊病模拟抗原苗免疫作用的探讨

用鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）免疫雏鸡，纯化其IgG(Ab1)免疫兔制备Ab2,Ab2经正常鸡IgG(NC-IgG）和IBD抗原（Ag）吸收后，加佐剂免疫雏鸡，免疫保护指数：Ab2组分别为：100％、100％、90％；对照组：0％。重复实验：50只雏鸡接种3次Ab2免疫，能抵抗IBD强毒攻击，该试验证实：IBD模拟抗原苗在IBD免疫中的应用价值。     

硒对镉中毒鸡免疫功能的保护效应

饲料中添加45ppm镉的鸡,在整个实验期间(120d),ANAE+淋巴细胞百分率、B淋巴细胞EAC花环形成百分率、血清γ-球蛋白含量及血清IgG含量均降低。镉对鸡细胞免疫和体液免疫的抑制程度与接触镉的时间长短有关。饲料中添加镉的同时,分别添加5ppm、10ppm、15ppm硒,在实验第60～90d期间能(?)抗镉的免疫毒性,基本维持鸡的正常免疫功能,其中以加10ppm硒的保护效应为佳。     

雏鸡中枢免疫器官内B淋巴细胞变化规律

为了研究雏鸡在正常发育过程中免疫器官内B淋巴细胞的变化规律,以不同日龄的SPF鸡为研究对象,用流式细胞术检测鸡脾脏、胸腺及法氏囊内IgA+、IgG+及IgM+B淋巴细胞含量的变化情况。结果显示,在脾脏中,4日龄时B淋巴细胞含量比较多,7日龄时B淋巴细胞含量下降,随后,7至21日龄细胞含量逐渐升高;胸腺内则是在4日龄时IgM+B淋巴细胞含量相对较高,而IgA+、IgG+B淋巴细胞几乎没有;在法氏囊中,IgA+、IgG+及IgM+B淋巴细胞含量在4至14日龄时逐渐升高,并且IgA+和IgG+细胞含量在21日龄时基本趋于稳定,但是IgM+B细胞含量则在21日龄时有所下降。试验结果表明,雏鸡出壳后各免疫器官B淋巴细胞始终以IgM+细胞含量最多。     

鸡免疫球蛋白G Fc(IgG Fc)片段的分离纯化及其抗血清的制备 Ⅱ.豚鼠抗鸡IgG Fc片段血清的制备

经硫酸铵盐析、DEAE 32-纤维素和Sephadex G 200柱色谱法分离得到纯化的鸡血清IgG。然后用木瓜蛋白酶水解IgG,再经DEAE 32-纤维素柱色谱纯化制得IgG Fc片段,并以IgG Fc片段免疫豚鼠制备豚鼠抗鸡IgG Fc血清。     

鸡免疫球蛋白(GIgG)轻链的分离纯化及其抗血清的制备

经硫酸铵盐析、柱色谱分离得到纯化的鸡血清IgG。继用2-巯基乙醇还原、碘乙酰胶烷化拆开IgG的轻、重链,再经Sephadex G100凝胶过滤柱色谱分离得到IgG轻链。以IgG轻链免疫家兔制得兔抗鸡IgG轻链抗血清。     

鸡IgG快速分离纯化和纯度鉴定

随着免疫学实验技术的普及和发展,从鸡高免血清中提纯IgG已成为常用的免疫化学技术. 在提纯鸡IgG过程中,不但要保证除去绝大多数杂蛋白和白蛋白,保留大多数免疫球蛋白,包括各种IgG亚类,而且又不影响IgG生物活性.这就需要一种好的提纯方法,既要保证IgG纯度,又要保证其生物活性. IgG的经典提纯法是先用硫酸铵盐析,得到粗制的Ig(Immoun-globulin)然后再经分子筛层析,离子交换层析,亲和层析等方法进一步分离纯化IgG.这些纯化方法需要一定的仪器、设备,操作复杂,工艺流程较长,且试剂昂贵,在一般实验室难以推广使用.而且辛酸-硫酸铵两步法提纯的IgG同样能得到高纯度、高生物活性的IgG.     

鸡贫血病—法氏囊病疫苗免疫母鸡后子代雏鸡的免疫学变化

本项目应用现代免疫学新技术对鸡传染性贫血病（CIA）-传染性法氏囊病（IBD）疫苗联合免疫母鸡后,其子代雏鸡外周血液T、B细胞数量和IgG、IgM、IgA含量法及法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺的T细胞和IgG、IgM、IgA抗体生成细胞数量以及泪液、气管液、胆汁、肠液的IgA、IgM、IgG含量的变化进行了动态研究。结果发现,CIA-IBD疫苗联合免疫母鸡后,其子代雏鸡外周血液、免疫器官组织和局部体液的上述各项指标均不同程度地高于未免疫的相应对照雏鸡。表明CIA-IBD疫苗免疫母鸡后,其子代雏鸡的体液免疫和细胞免疫功能明显增强,而CIAV-IBDV强毒攻击后,未免疫的子代雏鸡,其外周血液,免疫器官组织和局部体液的各项免疫学指标均明显低于疫苗免疫攻毒的子代雏鸡,这与未免疫雏鸡缺乏特异性抗体,强毒攻击后,雏鸡免疫器官组织广泛损害,淋巴细胞变性坏死等有关。     

抗鸡IgG单克隆抗体的研究

利用小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞系与纯化鸡IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,成功地建立了5株能持续分泌抗鸡IgG单克隆抗体(McAbs)的杂交瘤细胞株。选择产生抗体效价高、生长快的C_(44)株,扩大培养后注射于小鼠制备腹水,经硫酸铵盐析粗提后,用HRP标记,制备出McAbs酶结合物。将制备的McAbs酶结合物和多克隆抗体(PcAbs)酶结合物,采用间接ELISA,对35份鸡血清中鸡新城疫病毒(NDV)抗体以及19份鸡血清中鸡嗜血杆菌(HG)抗体进行检测,McAbs和PcAbs两者的相关系数分别为0.928和0.921,证明制备的抗鸡IgG McAbs具有特异性强、效价高的特点.     

鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用

为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。     

鸡新城疫免疫失败的原因及防制措施

1 免疫失败的原因1.1 免疫方式不当。鸡的新城疫(ND)保护性抗体可分为粘膜表面的IgA和血清中的IgG,只有呼吸道粘膜抗体和血清抗体都达到一定滴度时才能有效防止新城疫发生。由于免疫方法选择不当(如饮水免疫),致使鸡的呼吸道粘膜抗体未达到保护水平,或使血清中新城疫抗体不高,都可引起鸡发生新城疫。     

感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后局部粘膜免疫功能的变化

雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒（CAV），8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测其哈德尔腺和盲肠扁桃体T细胞及IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度的动态变化。揭示了感染CAV雏鸡接种ND疫苗免疫后哈德尔腺、盲肠扁桃体的T细胞和IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度，均较未感染免疫雏鸡明显减少。表明眼部、呼吸道和消化道局部粘膜免疫防御能力减弱。     

蚯蚓提取液对彭县黄鸡生产性能、血清免疫指标和抗氧化指标的影响

为比较添加不同浓度蚯蚓提取液对彭县黄鸡生产性能、血清免疫指标和抗氧化指标的影响,选取健康且体重相近的100日龄彭县黄鸡(母鸡)288只,随机分成4个组,每组4个重复,每个重复18只。4个组均饲喂基础日粮,蚯蚓提取液饮水添加的稀释倍数分别为0、300、600、900倍。预饲期5 d,正试期47 d。每周记录采食量,记录生产性能。分别在105日龄和152日龄时全群称重,152日龄时检测血清免疫性能和抗氧化性能指标。结果显示:饮水添加300倍蚯蚓提取液时,能提高彭县黄鸡活重、105~152日龄阶段重、日增重、日采食量(P<0.05),血清C3、IgA、IgG、IgM和IL-6水平显著升高(P<0.05);添加300倍和600倍时,料重比显著降低(P<0.05);添加600倍时,C3、IgA和IgG水平显著升高(P<0.05),T-AOC水平显著降低(P<0.05);添加900倍时,IgA和IgG水平显著升高(P<0.05)。研究表明,本试验条件下饮水添加蚯蚓提取液的适宜稀释倍数为300倍。