鸡抗菌肽LEAP-2基因克隆及序列特征分析

Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,并具有较强的抗微生物活性.本研究旨在以艾维茵肉鸡为实验材料,提取鸡全血DNA,通过PCR方法扩增抗菌肽LEAP-2基因,将PCR产物回收后,转化至克隆载体进行DNA测序,并将测序结果与GenBank公布序列进行对比,用ScanProsite对其蛋白质序列进行生物学信息分析.结果表明:扩增产物为150 bp大小的片段,基因序列与GenBank公布序列同源性高达100％,编码48个氨基酸残基,具有3个结构功能区7个功能位点.本研究为进一步探讨LEAP-2的功能奠定了基础.     

黄曲霉毒素的检测方法研究进展

黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类有毒次生代谢物,毒性极强,主要毒害肝脏,导致肝细胞变性、坏死、出血,引起腹水,肝脾肿大及消化机能障碍。在世界不同地区都发现了这些真菌大量存在于供人类食用的食品中,黄曲霉毒素污染已导致严重的食品安全问题。因此,     

复方妥曲珠利缓释微囊的药效试验

为了探讨复方妥曲珠利缓释微囊对鸡球虫病的治疗效果及给药方案,确定首次给药剂量和给药频率。在鸡感染柔嫩艾美耳球虫后第3天(粪便变稀)开始给药,于饮水中添加复方妥曲珠利缓释微囊,期间分别以不同频率给予每组鸡药物,各组鸡给药总量相同。以抗球虫指数(ACI)、相对增重率、病变值等指标进行药效学考察研究。试验结果表明,与感染不给药组相比,各给药治疗组ACI均极显著(P<0.01);试验期间给药3次和2次组治疗效果均可达到高效抗球虫效果;发病后2次给药,且首次剂量加倍组抗球虫指数可达188.14,高于其它给药组的ACI(179.03、182.50、175.98),相对增重率达到90.80%,病变值为2.67,治疗效果显著,可作为最佳的推荐给药方案。     

猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析

畜禽粪便中含有大量微生物,在发生传染性疾病时,粪便常常会成为重要的传染源.通过从种猪场、奶牛场和种兔场粪便中分离鉴定致病性大肠杆菌,并对分离到的大肠杆菌进行LEE毒力岛上eaeA基因的PCR检测,鉴定出含有LEE毒力岛大肠杆菌,调查携带LEE毒力岛的大肠杆菌在猪、牛和兔粪便中的存在情况.实验结果表明,猪、牛、兔粪便样品中携带LEE毒力岛的大肠杆菌检出率分别为12.9％、14.0％、22.5％.eaeA阳性的大肠杆菌应是导致仔猪、10日龄以内的初生犊牛和兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原.LEE毒力岛的检测能够作为大肠杆菌的诊断和流行分子病学调查的主要手段.     

用套式PCR检测空气样品中的猪肺炎霉形体

用套式PCR在试验和野外条件下首次成功检测出空气传播的猪肺炎霉形体.空气是用安装在空气过滤器上的polyethersulfone膜(气孔大小为0.2μm)取样.过滤器经过溶解和直接提取DNA两步处理而用于PCR分析.在套式PCR反应中,两对寡核苷酸引物是根据猪肺炎霉形体特有的一段重复序列设计的.在试验中,从8个有呼吸问题的猪舍中采集样品而用于套式PCR分析.结果发现,套式PCR具有极高的特异性和灵敏度,其灵敏度相当于一般PCR的104倍.在野外条件下,若猪场中存在急性呼吸道疾病,则80%的猪场完全可用该方法检测到猪肺炎霉形体.若被感染猪场中无急性病例,则该方法检测不到空气中的猪肺炎霉形体.如果从猪舍的几个位置和较低湿度的空气中取样,那么检测灵敏度就会提高.     

霍阿基亚型羊驼显性白毛调控基因外显子2的克隆与序列分析

羊驼作为一种高品质毛皮经济动物,对其毛色的研究可以为提高羊驼经济价值提供理论依据。本试验应用RT-PCR技术克隆羊驼显性白位点基因(KIT)第2外显子(exon2),并与其他动物相应区域进行同源性比较,结果发现其序列与牛和山羊的同源性较高,可达到96%,其编码的氨基酸更高,达98%;而与人和家鼠的同源性较低,只有78%和57%。该研究结果为加快霍阿基亚型羊驼育种进展提供了理论依据。     

致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达

为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。     

一起番鸭细小病毒病的诊制

山西沁县某鸭场饲养的1500只3周龄番鸭，有200只鸭陆续出现精神萎靡，眼半闭，蝮泻，喘气现象，病情严重。小鸭已出现死亡，发病2天后，病鸭增加到450只，死亡70只。     

太原地区鸡源性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查太原市周边地区鸡源大肠杆菌(E.coli)的流行情况,本研究从规模化养鸡场采集患腹泻病鸡的粪便样品进行E.coli分离、血清型鉴定及耐药性检测,通过接合试验检测质粒在抗生素抗性水平转移中的作用.结果表明:分离到81株E.coli属于15种不同血清型,其中28株属于5种优势血清型,即O1、O8、O78、O84和O143;所有分离菌株对13种抗菌药物均有不同程度的耐药性,其中qnrA、tetM、tetA、sul2、strA、aadA、floR为检测到的主要耐药基因;分离菌株质粒携带的7种耐药基因可通过接合作用转移.该研究结果证明E.coli对常用抗生素的耐药已普遍存在,其携带的耐药基因可通过接合作用在细菌之间传递.     

高铜的生理功能及其影响

综述了高铜的生理功能的最新研究进展:①抑制肠道病原微生物的生长,促进有益菌的繁殖;②改变了仔猪肠道微观结构;④提高仔猪的采食量;④提高了体内相关酶的活性;⑤促进生长激素的分泌。并对大量在饲料中添加高铜所产生的负面影响做了分析。