桑叶蛋白血管紧张素转换酶抑制肽的酶解制备

本研究旨在探讨桑叶蛋白血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶解制备方法,从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、芽孢杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶6种蛋白酶中筛选出最佳蛋白酶,并运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、加酶量、温度、pH、酶解时间进行参数优化.选取这6种常用蛋白酶,利用酶解法制备桑叶蛋白多肽,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,研究桑叶多肽对ACE抑制活性的影响.结果 表明,酶解效果最佳的酶为芽孢杆菌蛋白酶,最佳酶解参数为底物质量浓度20 g/L、加酶量7.5％、温度60℃、pH7.0和酶解时间50 min,此时酶解产物的ACE抑制率为81.51％,水解度为15.86％.     

纤维素酶水解甘草废渣产糖条件的研究

采用稀硫酸预处理甘草废渣,结合生物酶酶解法,分别从纤维素酶用量、温度、时间、p H因素及摇床转速考察纤维素酶水解的最优条件。在摇床转速150 r/min,p H 5.2,纤维素酶用量90 mg/g,温度52℃,水解时间12 h的条件下,纤维素酶水解甘草废渣的最大产糖量为70.93 mg/g。通过单因素试验考察,由正交试验确定纤维素酶酶解的最佳工艺,经验证试验确证可行。     

微波-酶法制备壳寡糖工艺优化

壳寡糖具有抗菌、抗癌和提高免疫力等功能,可溶于水,在饲料、食品和医药行业应用前景广泛,提高壳寡糖产率是其工业化的前提,为优化壳聚糖制备工艺,试验利用微波与果胶酶相结合的方法制备壳寡糖,通过单因素试验和正交试验确定壳寡糖最佳制备工艺条件为:果胶酶用量2 000 U/g,酶解温度45℃,pH值4.5,微波功率550 W,在此工艺条件下,微波辅助果胶酶酶解壳聚糖所得产物还原糖含量达1.755 mg/mL。     

酶解荷叶制备荷叶小分子多肽的研究

本试验以荷叶为原料,利用超声波辅助碱性蛋白酶酶解荷叶制备小分子多肽。选用底物浓度、酶解温度、酶解pH、酶解时间四个因素进行单因素试验。再通过响应面试验对提取荷叶多肽工艺进行优化。最后以多肽浓度为标准,得到最佳酶解得荷叶多肽的条件为：底物浓度4.07%、酶解温度54.96℃、酶解pH 8.88、酶解时间5.19 h。在上述条件下,得到多肽浓度为8.98×10^-3mg/mL。     

家蚕丝素蛋白抗氧化肽的制备及其稳定性研究

利用碱性蛋白酶水解家蚕丝素蛋白制备抗氧化肽,考察水解pH、水解时间、加酶量、底物浓度、水解温度5个因素对水解产物DPPH自由基清除率的影响,在此基础上采用响应面试验优化水解工艺条件,并调查家蚕丝素蛋白抗氧化肽对热、酸、碱和体外肠道消化的稳定性,测定不同分子质量范围的家蚕丝素蛋白水解产物组分的抗氧化活性.结果 表明,碱性蛋白酶水解制备家蚕丝素蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为水解pH 8.69、水解时间60 min、加酶量3035 U/g、底物(丝素蛋白)质量浓度26.80 g/L、水解温度53.89℃,在此条件下制备获得的家蚕丝素蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为55.16％.家蚕丝素蛋白抗氧化肽具有良好的热稳定性;在中性环境中抗氧化活性很稳定,但在强酸和强碱环境中抗氧化活性明显降低;经体外模拟胃肠道消化后,对DPPH自由基的清除率比未消化处理对照组提高了9.43百分点.分子质量小于5 kD组分是家蚕丝素蛋白抗氧化肽的主要活性组分.研究结果为家蚕丝素蛋白功能产品的开发提供了试验依据.     

脱脂柞蚕蛹蛋白用复合中性蛋白酶水解制备多肽的工艺条件优化试验

利用蛋白酶对脱脂柞蚕蛹蛋白进行酶解制备具有活性的多肽,可以提高柞蚕蛹蛋白的应用价值。为了建立适合工业化应用的脱脂柞蚕蛹蛋白的酶解工艺条件,首先采用单因素试验考察料液质量浓度、复合中性蛋白酶种类与使用浓度、酶解温度和时间4个因素对脱脂柞蚕蛹蛋白水解度的影响,得出较适合的工艺条件是:料液质量浓度60 g/L,3 g/L复合中性蛋白酶中的风味蛋白酶与蚕蛹专用复配蛋白酶按1∶1质量比混合,酶解温度55℃,酶解时间10 h。进一步采用Box-Behnken设计及响应面分析法对工艺条件进行优化,在复合中性蛋白酶质量浓度4.85 g/L、料液质量浓度41 g/L、酶解温度55℃、酶解时间10.66 h的最佳酶解条件下,脱脂柞蚕蛹蛋白的理论水解度为45.82%,实际水解度为45.75%。利用优化的酶解工艺条件制备柞蚕蛹蛋白活性肽,具有酶解效率高、稳定性好、操作简单、生产成本低的特点。     

以豆粕为原料制备反刍动物饲用肽的研究

本文通过正交试验,选用碱性微生物蛋白酶,研究得出酶解法制备大豆肽的最佳工艺参数:豆粕预处理条件为90℃水浴加热10min,酶解条件为底物浓度5%(W/V)、加酶量5万单位/g蛋白质、温度50℃、pH值10、酶解时间5.5h。蛋白质水解率达到25%,平均肽链长度为4.0。制得大豆肽粗蛋白质含量66.83%(DM)。并对制得大豆肽和原料豆粕的氨基酸含量进行分析。     

耐热木聚糖酶水解法制备木寡糖的研究

为探讨耐热木聚糖酶水解自制甘蔗渣木聚糖制备木寡糖的工艺条件和分析水解液的寡糖成分,试验以产耐热木聚糖酶的基因工程菌1020为原料,水解自制的甘蔗渣木聚糖,分别研究水解过程中酶的用量、木聚糖的浓度及酶解温度对酶解反应的影响,并采用高压液相色谱和质谱联用技术对水解液成分进行分析。试验结果表明,2%的木聚糖浓度,水解温度95℃,酶液用量100U/g,酶解3h后DP值可降至2.94,满足生产木寡糖对聚合度的要求;并且水解液的成分主要为木糖、木二糖和木三糖,没能检测到木四糖。耐热木聚糖酶在高温下酶解木聚糖对酶法制备木寡糖具有重要的应用价值。     

猪小肠黏膜加工下脚料酶解工艺的研究

以猪小肠黏膜提取肝素后的下脚料为原料,利用木瓜蛋白酶对肠黏膜蛋白质进行水解。在单因素分析的基础上采用正交实验对水解条件进行优化,得出最适酶解条件为:酶加量3000 U/g底物蛋白,底物浓度6%,pH值7.5,温度45℃,水解时间3h。在此条件下的水解度为20.63%。     

双酶分步水解制备棉籽多肽工艺条件优化

为高效制备棉籽多肽,采用Alcalase酶和Flavourzyme酶对棉籽蛋白进行双酶分步水解.在前期单因素试验的基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其多肽得率的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素,然后通过三因素三水平的 Box-Behnken 响应面分析法确定双酶分步水解棉籽蛋白的最优操作条件为:底物浓度(w/v)8.36%,先用Alcalase 酶在温度59.9℃、pH值8.0、酶用量25000 U/g的条件下水解150 min,再用Flavourzyme酶在温度50℃、pH值6.0、酶用量27430 U/g的条件下水解120 min,多肽得率可达到65.07%.     

猪肠膜双酶分步磕解工艺的研究

以猪小肠黏膜提取肝素后的滤渣为原料,利用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对猪肠膜进行双酶分阶段水解.在单因素试验的基础上采用正交试验对水解条件进行优化.结果表明木瓜蛋白酶和中性蛋白酶双酶分阶段水解的最佳酶解工艺为木瓜蛋白酶-中性酶的加酶量比为1∶2,总酶量8000U/g蛋白,底物浓度为5%,pH7.0,温度55℃,酶解时间3h.通过喷雾干燥生产出成品,其蛋白质含量为37.5%.     

稀硫酸预处理王草的研究

本研究采用稀硫酸对热研4号王草进行预处理,结合3,5-二硝基水杨酸法测定水解液中还原糖含量的方法,对稀硫酸浓度(v/v)、固液比(g/mL)、水解温度、水解时间和不同粒径5个因素进行单因素实验分析,在单因素试验的基础上通过二次回归正交旋转组合设计进行工艺参数优化.实验结果表明,最佳预处理条件,水解温度为117℃,水解时...     

酶解猪血红蛋白工艺条件的研究

试验选用中性蛋白酶水解猪血红蛋白。通过单因素试验,研究水解温度、pH值、酶加量、底物浓度、水解时间对水解效果的影响。通过正交试验,得出最佳的水解条件为:温度55℃、pH值7.5、酶加量5000U/g蛋白、底物浓度10%、水解时间3h,在此条件下的水解度为22.03%、三氯乙酸可溶性氮含量(SN-TCA指数)为63.83%。     

牛乳酪蛋白初级抗菌肽粉乳基料的制备

为制备抗菌活性较好的肽粉乳基料,以新鲜牛乳为原料提取酪蛋白,以酪蛋白酶解物对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为指标,从木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出一种蛋白酶水解牛乳酪蛋白,并通过单因素试验和正交试验确定该酶水解牛乳酪蛋白优化水解条件。结果表明：木瓜蛋白酶水解牛乳酪蛋白,其酶解物对3种菌均有较好的抑制作用;优化水解工艺条件为：酶解温度50℃、酶解时间4.5h、加酶量4500U/g、pH5.5、底物质量浓度6g/100mL;牛乳酪蛋白酶解物及初级肽粉乳基料稳定性均较好。     

卵转铁蛋白制备抗菌活性肽的研究

本试验以卵转铁蛋白为原料,利用胃蛋白酶酶解技术制备抗菌活性肽,优化实验条件,确定分子量范围。结果表明,胃蛋白酶酶解卵转铁蛋白制备抗菌肽在温度为40℃,pH值为2.0,底物浓度为4%,酶的加入量为1%,水解时间为2 h时,抑菌率达到90.36%;通过正交试验得出底物浓度及酶与底物浓度比对抑菌率的影响显著性水平达到0.05。并对在最优条件下得到的抗菌活性肽进行HPLC分析,确定相对分子质量范围主要在5 000～9 000之间。     

谷朊粉的胰蛋白酶水解工艺研究

选用胰蛋白酶水解谷朊粉,用甲醛滴定法测定其水解度。在对温度、时间、pH值、底物浓度(固液比)和酶浓度(酶与底物的比值)等单因素试验的基础上做4因素3水平正交试验。试验结果表明:胰蛋白酶水解谷朊粉的最佳条件为温度40℃、时间4h、pH值8.5、底物浓度(固液比)1.5%、酶浓度8%(酶与底物的比值),得到的水解度为15.34%。     

猪肠膜双酶分步酶解工艺的研究

以猪小肠黏膜提取肝素后的滤渣为原料,利用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对猪肠膜进行双酶分阶段水解。在单因素试验的基础上采用正交试验对水解条件进行优化。结果表明:木瓜蛋白酶和中性蛋白酶双酶分阶段水解的最佳酶解工艺为:木瓜蛋白酶-中性酶的加酶量比为1:2,总酶量8000U/g蛋白,底物浓度为5%,pH7.0,温度55℃,酶解时间3h。通过喷雾干燥生产出成品,其蛋白质含量为37.5%。     

正交结合熵权TOPSIS法优化酶解棕榈粕的条件

为改善棕榈粕的营养价值，本试验利用正交结合熵权TOPSIS法对甘露聚糖酶、酸性蛋白酶和纤维素酶组成的复合酶水解棕榈粕的条件进行了优化。以棕榈粕为原料，还原糖、三氯乙酸可溶蛋白含量为指标，筛选了复合酶的组成和各酶的最适浓度；采用单因素试验获得料水比、复合酶酶解时间、酶解pH值以及酶解温度的最适条件；在单因素试验基础上，利用正交试验结合熵权TOPSIS方法获得最佳酶解条件。结果：复合酶组成和含量分别为酸性蛋白酶250 U/g、甘露聚糖酶45 U/g、纤维素酶160 U/g;各因素最适条件为料水比1∶3、酶解时间24 h、pH值4.8、温度37℃;最佳酶解条件为料水比1∶2、酶解时间24 h、pH值4.8、温度42℃。结论：复合酶在料水比1∶2、时间24 h、pH值4.8、温度42℃条件下水解棕榈粕，反应后还原糖含量达到65.29 mg/g,酸溶蛋白含量达到3.86%,粗纤维降解至8.58%。     

纤维素酶酶解小麦麸皮技术初步研究

本实验采用还原糖法研究了不同酶解时间、温度、pH值及酶浓度条件对纤维素酶酶解小麦麸皮效果的影响。结果表明,纤维素酶酶解小麦麸皮的最适条件为:酶解时间15min,温度37℃,pH值6,最适酶浓度0.04IU/mL。     

检测饲料添加剂中木聚糖酶活力

测定木聚糖酶活力的方法主要有黏度法、底物染色法、还原糖法。大量实践证明．影响木聚糖酶实际使用效果的因素很多．从目前的研究进展分析．采用还原糖法．分析影响酶活测定值的因素并结合生产实际．制定相对公正的评判标准是可行的．也是科学的。测定饲料添加剂中木聚糖酶活力应注意：固定反应体系，即固定反应温度、pH值、反应时间、底物浓度和要求的产物浓度范围。建议以燕麦木聚糖为标准底物．反应液中底物的浓度为5mg／mL：配制的木聚糖底物溶液的存放时间不超过12h．存放温度应在4℃下避光保存；反应体系的pH值为5．5；反应温度为37℃：反应体系的缓冲液中盐浓度为0．1mol／L：反应时间为30min．