母乳乳清蛋白抗氧化活性肽的研究

母乳是婴幼儿的最佳食物来源,而乳清蛋白是营养和活性物质的基础,其中生物活性肽对人体健康具有重要促进作用.为研究母乳乳清蛋白抗氧化活性肽,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶4种酶制备抗氧化活性多肽,通过单因素试验和响应面分析对乳清蛋白酶解工艺进行优化.结果表明:中性蛋白酶最适于母乳乳清蛋白抗氧化肽的制备,此时的最佳工艺参数为pH 7.21、反应温度50.03℃、酶与底物比(E/S)4 486.68 U/g、酶解时间5h;影响1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率的因素大小为:酶与底物比＞温度＞pH值.利用大孔树脂、葡聚糖凝胶过滤色谱G-25、G-15分析得出组分峰Ⅰ抗氧化活性最强,其DPPH自由基清除率达到了60.31％.     

家蚕丝素蛋白的氨基酸组成与营养分析及酶消化产物的体外抗氧化活性

对家蚕丝素蛋白的氨基酸组成、食用营养价值,以及经酶处理的消化产物的体外抗氧化活性进行测试分析,为开发高附加值丝素蛋白产品提供理论依据。测定结果表明,甘氨酸和丙氨酸是丝素蛋白的主要组成部分,占总氨基酸质量的62.21%;丝素蛋白富含非极性氨基酸,占总氨基酸质量的69.08%。体外消化试验表明,丝素蛋白不易被胃蛋白酶消化,但易被肠道胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化。丝素蛋白的酶消化产物具有良好的体外清除DPPH自由基活性(IC50=151.6μg/m L)、螯合Fe2+能力(IC50=201.4μg/m L)和还原能力。以上结果提示:虽然丝素蛋白的氨基酸组成不均衡,食用营养价值低,但因其有极高的非极性氨基酸含量,是制备药用氨基酸和生物活性肽的理想原料。     

水牛乳抗氧化活性肽制备中蛋白酶的选择

本研究采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物复合蛋白酶、植物复合蛋白酶、Protamex 蛋白酶对水牛乳蛋白进行酶解试验,以水解度、DPPH自由基清除率为评价指标,筛选适合水牛乳蛋白活性肽制备的最佳蛋白酶.结果表明,采用碱性蛋白酶酶解水牛乳蛋白的水解度及DPPH自由基清除率为最高,分别为24.30％和66.63％.     

不同酶水解玉米黄浆蛋白抗氧化功能比较研究

研究不同酶对玉米黄浆蛋白水解度及水解后产物的生物活性影响,通过单酶水解及双酶同步与分步水解,对水解度及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除能力进行比较,研究玉米黄浆蛋白酶解方法与水解物的抗氧化功能的关系,筛选出最佳酶组合。结果表明:单酶水解时,碱性蛋白酶水解玉米黄浆蛋白的水解物清除自由基能力最好,清除DPPH自由基能力达71.38%;双酶分步水解的效果比双酶同步水解效果好,清除DPPH自由基能力最好在pH为7条件下进行,先加中性酶后加碱性酶的DPPH自由基清除能力强于其他加酶方法和加酶组合,清除率高达81.28%。因此选择先加中性蛋白酶再加碱性蛋白酶作为水解玉米黄浆蛋白的最佳工艺。     

发酵乳清蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

利用微生物发酵法制得的乳清蛋白抗氧化肽是一种天然抗氧化剂,副产物少,有发酵的芳香,安全无毒。主要利用微生物发酵法制备乳清蛋白抗氧化肽,通过菌株的筛选及乳清蛋白肽制备条件的优化,得到乳清蛋白肽最佳制备工艺。结果表明,选择瑞士乳杆菌CICC 22818发酵最终水解度为9.36%,菌株活力达到8.5 LogCFU/g,且产酸能力较强,因此选择瑞士乳杆菌CICC 22818作为最终发酵菌株。发酵乳清蛋白的最佳工艺为:乳清蛋白含量10%,发酵时间63 h、发酵温度43.3℃、接种量3.5%,此时DPPH自由基清除率为26.4%,同时乳清蛋白肽纯化后DPPH自由基清除率提高到35.62%,·OH自由基清除率达到20.58%。     

发酵牦牛乳蛋白肽的分离纯化及抗氧化活性研究

以牦牛乳为原料,从6株乳酸菌中筛选出对发酵牦牛乳具有较高水解度及肽得率的罗伊氏乳杆菌和约氏乳杆菌,并与保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和发酵乳杆菌按1:1:1:1:1复配发酵剂制备牦牛乳蛋白肽。通过离心提取发酵牦牛乳蛋白肽,经超滤和Sephadex-25柱层分离纯化蛋白肽,并测定各分离组分的体外抗氧化活性。结果表明,发酵牦牛乳蛋白肽的Sephadex-25分离纯化的最优工艺条件为:洗脱液浓度0.2mol/L,上样质量浓度50mg/mL,洗脱流速2mL/min,在此条件下一共分离出峰1、峰2两个组分。随着蛋白肽各分离组分浓度的增加,其抗氧化活性显著增强,分离组分峰1、峰2对ABTS自由基清除率的IC_(50)为1.778mg/mL、3.844mg/mL,对DPPH自由基清除率的IC_(50)为1.801mg/mL、3.286mg/mL,还原能力IC_(50)为0.571mg/mL、1.365mg/mL,对羟自由基清除率的IC_(50)为0.913mg/mL、2.466mg/mL。     

桑叶蛋白血管紧张素转换酶抑制肽的酶解制备

本研究旨在探讨桑叶蛋白血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶解制备方法,从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、芽孢杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶6种蛋白酶中筛选出最佳蛋白酶,并运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、加酶量、温度、pH、酶解时间进行参数优化.选取这6种常用蛋白酶,利用酶解法制备桑叶蛋白多肽,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,研究桑叶多肽对ACE抑制活性的影响.结果 表明,酶解效果最佳的酶为芽孢杆菌蛋白酶,最佳酶解参数为底物质量浓度20 g/L、加酶量7.5％、温度60℃、pH7.0和酶解时间50 min,此时酶解产物的ACE抑制率为81.51％,水解度为15.86％.     

复合酶水解法提取大豆抗氧化肽的工艺优化

为提高脱脂豆粕的利用率,试验选用碱性蛋白酶与风味蛋白酶的组合从脱脂豆粕中提取大豆抗氧化肽,以加酶量(E/S)、温度、p H及时间为自变量,以酶解液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上,采用Design-Expert软件,建立DPPH自由基清除率与各因素间的二次多项式模型,确定提取大豆抗氧化肽的最佳提取条件为加酶量(E/S)5%、温度58℃、p H 10及酶解时间3 h,在此条件下,大豆抗氧化肽对DPPH自由基的清除率达到89.94%,与预测值90.69%的相对误差小。回归方程的预测值与试验值差异不显著(P0.05),说明回归模型拟合情况较好。     

小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白的体外抗氧化活性研究

试验旨在研究小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白的分子质量分布和体外抗氧化活性。试验采用单因素完全随机设计,以维生素C为对照,分别测定小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白在0.625、1.25、2.5、5、10 mg/mL浓度下对DPPH自由基、羟自由基和2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基的清除率,并通过测定T-AOC吸光度值计算总还原力。结果表明：使用高效液相色谱测定小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白重均分子质量分别为513 u和551 u,二者分子质量小于1 000 u的比例分别为90.22%和86.93%。在一定浓度范围内,随小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白浓度的升高,其体外抗氧化性能线性增加（P<0.05）,且呈正相关关系。在10 mg/mL浓度时,小麦胚芽肽对DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基清除率和总还原力分别为90.39%、70.66%、96.24%和2.23,大豆酶解蛋白对DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基清除率和总还原力分别达到65.55%、68.21%、75.14%和0.51。综上,在本试验条件下,不同浓度小麦胚芽肽和大豆酶解蛋白均具有一定的抗氧化能力...     

酶解蚕蛹蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的工艺优化

采用碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白,制备血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,是蚕蛹蛋白深度开发的途径之一。以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶解温度、酶解pH和加酶量等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响,优化制备工艺。结果表明,各因素对制备ACE抑制肽的活性影响程度由大到小依次为酶解pH、酶解温度、加酶量。获得碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度50.8℃,酶解pH 9.0,加酶量3 500 U/g。在此条件下,蚕蛹蛋白酶解产物对ACE的理论抑制率最高可达96.67%,验证值为96.49%±1.75%,IC50值为0.102 mg/mL,预测模型可靠性高,可应用于蚕蛹ACE抑制肽的酶法制备。