响应面法优化川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的提取工艺研究

对川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷抗炎活性成分进行提取工艺研究，建立快速高效的提取方法，提高药材的利用率。以川西獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷三种环烯醚萜苷为研究对象，考察提取次数、液料比、提取时间、乙醇浓度以及提取温度5个因素对川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷提取率的影响，通过响应面法和Box-Behnken优化得到最优工艺参数。结果表明：川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的最优提取工艺参数为：提取次数2次，提取时间60 min，液料比46 mL·g^-1，乙醇浓度73%，提取温度50℃；验证结果显示在该条件下川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的提取率为4.73 mg·g^-1，与预测值4.75 mg·g^-1相差0.0 255 mg·g^-1,RSD<5%。实验所采用的超声法提取川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的优化工艺可行，耗时短、效率高、简单易行，能够满足提取要求。     

鱼胆草提取物及其活性成分獐牙菜苦苷的药理学初探

为了初步考察鱼胆草提取物及其活性成分獐牙菜苦苷(含量为61%)的体外抑菌效果和安全性,以及獐牙菜苦苷对α-葡萄糖苷酶活性的影响,试验采用小鼠急性毒性试验的方法测定其安全浓度、试管二倍稀释法测定其体外最小抑菌浓度和紫外分光光度法检测獐牙菜苦苷对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果表明:鱼胆草提取物及獐牙菜苦苷以5 g/kg灌胃时,小鼠均无死亡发生;醇沉前后的鱼胆草提取物和獐牙菜苦苷对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)均为125 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC均为31.25 mg/mL;当獐牙菜苦苷浓度为1 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率为30.19%,浓度为100 mg/mL时抑制率为84.92%。说明可尝试用鱼胆草提取物及獐牙菜苦苷防治由金黄色葡萄球菌等细菌感染引起的疾病,獐牙菜苦苷无毒副作用,有望被研发成一种新的降糖药物。     

三峡库区獐牙菜提取物抑菌活性及稳定性研究

为了研究三峡库区獐牙菜的抑菌活性和稳定性,以纯化水、70%乙醇和乙酸乙酯作为提取溶剂对獐牙菜进行提取,通过测定抑菌圈直径大小和最低抑菌浓度(MIC)来比较不同溶剂提取物对5种常见食源性污染菌的抑制作用,同时考察热处理、pH值、紫外线照射、盐浓度对獐牙菜水提取物抑菌活性稳定性的影响。结果表明:3种溶剂提取物对测试菌均具有一定的抑菌活性,其中以纯化水提取物效果最好;热处理、pH值及紫外线照射对獐牙菜水提取物抑菌活性的稳定性影响较小,而增加盐浓度对獐牙菜水提取物的抑菌活性产生一定增效作用。     

川西獐牙菜等植物种子活力的比较研究

将川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch),椭圆叶花锚(Halenia elliptica Don),抱茎獐牙菜(Swertia frachetana H-Smith),湿生扁蕾Gentianopsis paludosa(mumro)Ma的种子贮存在(18℃±5℃)和(0～4℃)下18个月。用0.2%CaCl2和2%KNO-3-溶液浸泡24h,进行电导率,TTC还原量及发芽率测定,结果表明:①两种温度贮存的种子,除电导率差异极显著外(p0.01),其余各项指标均不显著(p0.05);②药剂处理除对湿生扁蕾外其它种子都有提高发芽率的作用,0.2%CaCl2-效果最好,发芽率平均提高20%;③同种温度下贮存的种子,药剂处理后TTC还原量、电导率差异不显著(p0.05)。     

双标线性校正结合PDA辅助色谱峰定性用于印度獐牙菜指纹图谱分析

目的 建立印度獐牙菜指纹图谱,探讨和验证双标线性校正法结合PDA辅助法用于色谱峰定性的可行性。方法 采用HPLC建立印度獐牙菜指纹图谱,使用相似度分析和二维聚类分析进行质量评价,并使用双标线性校正结合PDA辅助法进行色谱峰定性。结果 10批次印度獐牙菜药材选定10个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,经化学计量学评价,可对其质量进行初步评价;双标线性校正法预测保留时间的精度优于相对保留时间法;双标线性校正法结合PDA辅助法可更好的对色谱峰进行定性。结论 与相对保留时间法相比,双标线性校正法预测保留时间的准确度更高,色谱柱的适用范围更广。双标线性校正结合PDA对色谱法进行辅助定性可扩大双标线性校正的使用范围。     

炮制对甘肃道地药材甘草中甘草苷和甘草酸含量的影响

目的:考察不同炮制方法对甘肃道地药材甘草中甘草苷和甘草酸含量的影响。方法:用HPLC方法梯度洗脱,色谱条件为:Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速0.8 m L/min,柱温28℃,流动相A为乙腈;流动相B为磷酸水(pH值3),时间为25 min。结果:25%蜜炙甘草60℃烘制60 min(烘制法)炮制的炙甘草比其他炮制方法所得到的甘草苷和甘草酸含量高,色谱图显示甘肃道地药材甘草经过炮制后峰数目减少,即甘草中成分减少。结论:用HPLC方法测定甘草中甘草苷和甘草酸的含量,操作简单可靠,重现性好,可作为甘肃道地药材甘草质量控制的有效方法。     

微波干燥对党参中党参炔苷含量的影响

目的:考察微波干燥对党参中党参炔苷含量的影响,为科学评价及有效控制其质量提供依据。方法:采用HPLC法、梯度洗脱、超声提取法。所采用的色谱条件为:色谱柱:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速:1.0 m L/min,检测波长:267 nm,柱温:25℃,流动相:乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱系统。结果:测定条件相同时,不同微波时间(5 min、5.5 min、6 min,中火),25%蜜炙党参微波5 min时,党参炔苷的含量较高。结论:不同微波时间会影响党参中党参炔苷的含量,25%蜜炙、微波5 min时,党参中党参炔苷含量较高,同时,采用HPLC方法测定党参中党参炔苷的含量,操作简单,结果可靠,重现性好,可作为甘肃道地药材党参及其炮制品质量控制的有效方法。     

藿芪灌注液中淫羊藿苷和黄芪甲苷稳定性试验研究

为了研究藿芪灌注液的稳定性,采用HPLC法测定藿芪灌注液中淫羊藿苷与黄芪甲苷含量,使用Wonda Sil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水28∶72,柱温40℃,检测波长270 nm,进样量10μL,流速1.0 m L/min测定淫羊藿苷的含量;使用ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),漂移管温度为90℃,载气流速为2.5 L/min,流动相:甲醇-水65∶35,柱温:40℃,流速:1 m L/min,用蒸发光散射检测器检测测定黄芪甲苷的含量。藿芪灌注液于高温60℃放置10 d,高湿度90%±5%放置10 d,经强光照射4500±500LX放置10 d,加速试验在温度40℃±2℃、相对湿度75%±5%的条件下放置6个月,长期试验在温度25℃±2℃、相对湿度60%±10%的条件下放置12个月,考察藿芪灌注液在不同条件存放后的性状、鉴别、p H、淫羊藿苷含量、黄芪甲苷含量以及无菌检查等项目的变化。结果表明,藿芪灌注液性质稳定,在不同条件存放后所有指标均未有明显变化,符合质量标准要求。     

补血催乳口服液的质量标准研究

建立补血催乳口服液的定性与定量检测方法,并制定质量标准。对补血催乳口服液中黄芪、当归、穿山甲采用TLC定性鉴别;黄芪甲苷与丹参酮ⅡA含量用HPLC法检测,色谱柱均为Agilent Extend C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),进样量10μL;测定黄芪甲苷的流动相为乙腈-水(36∶64),柱温为30℃;流速1.0 mL/min,ELSD检测器,漂移管温度为100℃,气流速度为1.7 L/min。测定丹参酮ⅡA的流动相为甲醇-水(75∶25),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为270 nm。结果显示所建立TLC法斑点清晰,分离效果好,阴性无干扰;黄芪甲苷在0.107 1～3.213μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.03%,RSD为1.19%。丹参酮ⅡA在0.018 1～0.453 5μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.51%,RSD为1.22%。说明本研究方法简单易行,专属,准确,可用于补血催乳口服液质量控制。     

HPLC法同时测定武当山地区金银花中绿原酸和木犀草苷含量

目的:采用HPLC法同时测定武当山地区金银花中绿原酸和木犀草苷含量,为金银花生产适宜区的选择提供理论参考。方法:色谱柱为C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈为流动相A,0.5%冰醋酸水溶液为流动相B,采用梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为350 nm。结果:绿原酸、木犀草苷在5～100μg/mL范围内均呈良好的线性关系;精密度、稳定性、回收率试验结果均良好。武当山地区金银花中绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》标准。结论:所建方法适合金银花中绿原酸和木犀草苷含量测定,结果准确可靠。实验结果初步显示,武当山地区适宜金银花栽培。     

高效液相色谱法测定氟苯尼考悬浮乳剂含量

建立了测定氟苯尼考悬浮乳剂含量的高效液相色谱法。采用C18色谱柱（4.6 mm×250mm,5μm）,以乙腈-水（25∶75）为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长223 nm,进样量20μL,柱温为室温。氟苯尼考浓度在40～60μg/mL时,其峰面积与浓度的线性关系良好（r=0.999 9）;无杂质干扰,平均回收率为100.18%,平均批内变异系数为0.82%,批间变异系数为0.22%。本方法操作简便,分析快速,结果准确,适用于氟苯尼考悬浮乳剂的含量测定。     

高效液相色谱法测定银翘片中牛蒡苷含量的方法建立

为完善银翘片质量标准,采用高效液相色谱法对银翘片中牛蒡苷的含量测定进行了研究。色谱柱为C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0．1％冰乙酸溶液（25：75）,检测波长为280nm,流速1mL/min,柱温25℃,进样量10μL。牛蒡苷进样浓度在0．1～2mg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）;样品平均回收率为96．5％（n=6）,RSD为1．3％。本方法简便、准确度高、重复性好,为进一步控制银翘片的质量提供了依据。     

RP—HPLC法同时测定白头翁汤中盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀的含量

目的：建立反向高效液相色谱方法同时测定白头翁汤中盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀的含量。方法：色谱柱为XPODS—AC。。（250minx4．6mm,5I．Lm）;采用线性梯度洗脱方法,流动相：溶液A为乙腈,溶液B为O．05mol／L磷酸二氢钾（磷酸调pH值至3．0）。0—40min溶液A：溶液B为5：95—45：55;流速：1．0mL／min;柱温：室温;检测器：DAD检测器;检测波长：340nm;进样量：10μL。结果：盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀分别在62．5-l000μg／mL、46．875—750μg／mL和37．5—600μg／mL范围内线性良好;平均加样回收率分别为99．22％（RSD为3．25％）、98．46％（RSD为1．99％）和99．20％（RSD为1．69％）。结论：本方法简便、灵敏、准确,适用于白头翁汤的质量控制。     

HPLC法测定盐酸氯苯胍原粉含量

目的：采用高效液相色谱法测定盐酸氯苯胍的含量。方法：样品经1％盐酸甲醇萃取．以SHIMADZUC8色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）分离,甲醇和2．5％的磷酸溶液以体积比75比25的混合液为流动相,在检测波长为317nm处测定。结果：峰面积与盐酸氯苯胍的质量浓度在1—100．0mg·L^-1范围内呈线性关系。标准加入回收率为（n=6）95．2％,相对标准偏差（n=5）小于0．5％。     

高效液相色谱法同时测定白头翁汤中秦皮甲素和小檗碱的含量

目的：建立同时测定白头翁汤中秦皮甲素和小檗碱含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱：Agilent ZORBOX SB-C18柱（5μm,4.6 mm×150 mm）,流动相：乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,线性梯度洗脱[0-20 min,A-B（12∶88）→A-B（50∶50）],流速：1.00mL/min,柱温：30.0℃。检测器：紫外检测器,检测波长335.0 nm。结果：秦皮甲素和盐酸小檗碱的线性范围分别为0.14-1.12μg（r=0.999 8）、0.12-0.98μg（r=0.999 7）;平均加样回收率（n=9）分别为99.78%、100.18%。结论：本方法简捷快速,结果准确可靠,适用于白头翁汤的质量控制。     

高效液相色谱法测定猪血浆中氟苯尼考的含量

建立了猪血浆中氟苯尼考含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-水(24:76)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长223nm,进样量20μL,柱温为25℃。氟苯尼考浓度在0.1～16μg/mL时,标准曲线线性关系良好(r0.9998),无杂质干扰,回收率高于94%,批内变异系数和批间变异系数均低于5%。本方法操作简便,分析快速,结果准确,适用于猪血浆中氟苯尼考含量的测定及相关药代动力学研究。     

鸡蛋中环丙氨嗪及其代谢物三聚氰胺残留检测超高效液相色谱-串联质谱法研究

建立了鸡蛋中环丙氨嗪及其代谢物三聚氰胺残留检测的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS／MS）方法。液相色谱条件：色谱柱为Waters BEH HILIC柱（50mm×2．1mm,1．7μm）;流动相为乙腈-0．01mol／L乙酸铵溶液,梯度洗脱;柱温30℃;流速0．3mL／min;进样量10μL。质谱条件为：电喷雾离子源（ESI^＋）,多反应监测（MRM）方式进行采集。结果表明：在2．5-100μg／L的基质匹配系列混合标准溶液内环丙氨嗪和三聚氰胺的相关系数R^2〉0．998;方法检测限为1μg/L,定量限为2．5μg／L;从10、50、100μg／kg三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为74．6％～91．4％,批内批间RSD值均〈15％。     

正交设计法优化蒲公英中黄酮提取工艺

在510 nm最大吸收光时检测正交提取蒲公英中的黄酮含量,建立正交提取工艺,对提取物进行HPLC检测,色谱柱为Eclipse×DB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶1%冰醋酸=60∶40(v/v),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量20μL,在此色谱条件下测定黄酮含量。结果表明,各因素影响力大小为:pH值>浸泡时间>料液比;用HPLC测定蒲公英中的黄酮含量为9.26%。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药

建立了鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药物残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法（UPLC—MS／MS）。样品用乙腈提取,吹干后用50％甲醇溶解,正己烷去脂后,供液相色谱-串联质谱法分析。液相色谱条件为：色谱柱为WatersBEHC18柱（50mm×2．1mm,1．7μm）;流动相为乙腈-20mmol／L乙酸铵水溶液,梯度洗脱;柱温30℃;流速0．3mL／min;进样量10μL。质谱条件为：电喷雾离子源（ESI’）,多反应监测（MRM）方式采集。结果表明：在10～500μg／L的系列浓度范围内,五种抗球虫药物的相关系数R2〉0．990;方法检测限为5μg／kg,定量限为10μg/kg;从100、200、500μg／kg三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为75．4％～109％,批内、批间RSD均〈15％。本方法简便快捷、定性准确,可以满足兽药残留分析的求。     

甜地丁中槲皮素的薄层鉴别和含量测定

为完善甜地丁质量标准,采用薄层色谱法对甜地丁中槲皮素的鉴别进行了研究,并用高效液相色谱法测定其含量。薄层色谱以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（7：5：0．5）为展开剂,高效液相法色谱柱为C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-0．3％磷酸溶液（50：50）,检测波长为360nm,流速1mL／min,柱温25℃,进样量10μL。结果表明薄层色谱法能对槲皮素实现有效分离,高效液相色谱法槲皮素进样浓度在5。100μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=O．9997）;样品平均回收率为96．1％（n=6）,RSD为0．7％。本方法为进一步控制甜地丁的质量提供了依据。