加工方式对刀额新对虾主要过敏原免疫原性的影响

选取冻干、烘干、虾丸化以及油炸4种加工方式处理刀额新对虾,通过检测可溶性蛋白、主要过敏原含量和免疫活性的变化以及体外模拟胃液消化实验,分析加工方式对虾类过敏原免疫活性及抗酶解能力的影响。结果表明经过不同的加工处理后,分子量为35 ku左右的主要过敏原蛋白仍然存在,免疫印迹显示其免疫活性有不同程度的下降,其中虾丸化处理对免疫活性的降低程度最大,达87%,冻干处理的影响最小,仅达6.8%;而主要过敏原蛋白抗酶解能力变化不明显。结论:不同的加工方式对虾过敏原活性的降低有比较大的差异,但对于抗酶解能力影响不大。     

不同烹饪方式及体外模拟消化对凡纳滨对虾主要过敏原原肌球蛋白免疫活性的影响

本研究选用水煮、油炸和红烧3种烹饪方式分别处理凡纳滨对虾,并且对烹饪后的虾肉进行体外模拟唾—胃—肠液连续消化,以调查烹饪处理后过敏原原肌球蛋白的免疫活性变化状况。采用电泳、免疫印迹和间接ELISA方法评价样品中主要过敏原原肌球蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示,3种烹饪处理虾肉样品中TM条带无明显变化,表明TM在烹饪处理时基本不发生降解;免疫印迹和间接ELISA结果显示,水煮、油炸和红烧3种烹饪处理虾肉中TM免疫活性分别降低2.08%、11.33%、15.56%;而烹饪后虾肉的体外模拟消化产物的免疫活性丢失显著,水煮、油炸和红烧处理的免疫活性分别下降86.90%、88.94%、97.39%。研究表明,虾类TM免疫活性的降低主要发生在肠液消化阶段,3种方式烹饪处理能够使TM免疫活性降低,并且红烧处理可明显降低TM的免疫活性。本实验为过敏原消减机制的研究和低致敏性水产品的开发提供了理论依据。     

冻融循环过程中虾过敏原的免疫原性变化

采用凡纳滨对虾为研究对象，分别将过敏原提取物在-3，-20和-80 ℃的贮存条件下反复冻融1~5次，通过测定每次冻融后的蛋白浓度，过敏原免疫原性等探讨过敏原在不同温度循环下的变化，分析冻融循环对过敏原提取物活性的影响。结果表明,虾过敏原提取物在-80、-20、-3 ℃冻融循环5次时，蛋白浓度分别下降33.1%、30.0%和24.2%；在-80和-20 ℃冻融循环4次时，主要过敏原条带发生降解，-3 ℃冻融循环5次，主要过敏原条带不会发生变化。在-80和-20 ℃冻融循环5次以及在-3 ℃冻融3次时，过敏活性降低；在-80和-20 ℃冻融5次，主要过敏原的免疫印迹条带消失，在-3 ℃冻融的免疫印迹条带没有变化。因此,应尽量减少过敏原蛋白冻融次数，保证贮存在-80和-20 ℃的过敏原冻融循环4次以内以及-3 ℃冻融循环2次以内，以保证实验结果的准确性。     

加工处理对鲢小清蛋白免疫活性的影响

采用鱼丸加工、烘烤、油炸、高压4种方式对鲢进行加工,并比较在这4种鲢制品中小清蛋白的含量、免疫活性以及体外模拟胃液消化稳定性的变化情况.通过Tricine-SDS-PAGE和Western-blotting分析表明,鱼丸加工、烘烤、油炸、高压等方式处理可降低鲢制品中小清蛋白的含量,但在一定程度上提高了小清蛋白的胃液消化稳定性;高压几乎可完全破坏小清蛋白的IgG结合能力,是较为理想的降低食物过敏原免疫活性的加工方式之一.     

不同加工处理方式对南极磷虾体内氟含量的影响

采用氟离子选择性电极法对船上不同方式加工处理后南极磷虾不同部位的氟含量进行了分析。结果表明,新鲜南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量具有明显差异,其中虾壳中含量最高,为538.67 mg/kg,虾头中含量为395.20 mg/kg,虾肉中含量最少,为50.33 mg/kg,约为虾壳中的十分之一;不同体长的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著;总体上环境温度为4℃时,南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量随放置时间的延长逐渐下降,但4 h内南极磷虾虾肉中氟含量上升,达到最大值59.67 mg/kg,之后开始下降。经70℃和沸水热处理后的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著,热处理后放置1和4 h南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量差异不显著,但热处理后虾肉中氟含量高于新鲜虾肉中氟含量。冷冻熟南极磷虾虾肉与冷冻南极磷虾虾肉中氟含量都高于新鲜虾肉中氟含量,但冷冻熟南极磷虾虾肉氟含量比冷冻南极磷虾虾肉低23%。实验结果表明,在船上对南极磷虾进行适当加工处理可以明显减少虾肉中的氟含量。     

青岛地区常见鱼类过敏原的鉴定及其交叉反应研究

选择青岛地区喜食的阿拉斯加狭鳕、蓝点马鲛、大黄鱼、真鲷、鲑、大菱鲆、鲤 等7种鱼为研究对象,利用鱼类过敏患者血清,通过SDS-PAGE及免疫印迹方法对每种鱼的过敏原蛋白进行鉴定。利用兔抗鲅鱼小清蛋白多克隆抗体,通过间接ELISA和抑制性ELISA等对7种鱼的小清蛋白之间的交叉反应进行探讨。结果表明,青岛地区居民鱼类过敏原主要为48~57、33~41、28 及17 ku的蛋白,和传统公认的小清蛋白为主要过敏原的共识不同。而针对小清蛋白的交叉反应研究也表明,不同鱼类蛋白之间存在强烈的交叉反应。因此,虽然鱼类过敏原可能不同,但如果对以上7种鱼中的一种鱼过敏,最好不要食用其他任何一种鱼。     

高密度CO2与热处理对凡纳滨对虾肉品质的影响

高密度CO₂(DPCD)是未来非常具有前景的非热加工技术之一,可以实现对食品的杀菌和钝酶,并对其品质产生影响。为了探讨高密度CO₂对凡纳滨对虾肉品质的影响,实验以凡纳滨对虾为研究对象,采用DPCD和热处理,测定虾肉营养成分、质量损失、pH值、持水力、质构、蛋白质组成和呈味成分等的变化。结果显示:与鲜虾相比,DPCD处理会造成虾肉水分和粗脂肪含量显著降低(P<0.05),但粗蛋白含量无显著变化(P>0.05),而经热处理会使虾肉粗蛋白和粗脂肪含量都显著减少(P<0.05);DPCD处理造成虾肉质量损失达16.02%±1.90%,但对虾肉pH值无显著影响(P>0.05);DPCD和热处理都能使虾肉蛋白质发生变性,造成持水力显著下降(P<0.05),从(84.79±5.25) g/100 g分别下降至(65.18±2.06)和(65.58±2.08) g/100 g;DPCD处理对虾肉硬度无显著影响(P>0.05),而热处理则造成虾肉硬度显著升高(P<0.05),从(3.48±0.49) N上升到(7.37±0.76) N,DPCD处理和热处理都显著降低了虾肉弹性(P<0.05),从0.88±0.08分别下降到0.71±0.03和0.78±0.03;除甜菜碱、PO^3-₄、Cl^-,DPCD处理对虾肉主要呈味成分(游离氨基酸、ATP及关联化合物、有机酸、糖原等)无显著影响(P>0.05),而热处理则会造成大部分呈味成分的损失。实验表明,DPCD处理对虾肉品质的影响要小于热处理对虾肉品质的影响。     

鲢鱼骨骼肌过敏原小清蛋白的分离纯化及多克隆抗体制备与应用

小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对该蛋白的研究不仅有利于过敏原检测方法的建立也可为低致敏性水产品的开发提供理论依据。通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Superdex75凝胶过滤等方法从鲢白色肉中纯化得到过敏原小清蛋白。Tricine-SDS-PAGE显示,在非还原条件下,该蛋白呈分子量分别为12ku、14ku、24ku的3个条带。而在还原条件下,仅有分子量为12ku的条带。Western-blotting分析表明,分子量为12ku、14ku和24ku的这3个条带都与小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)发生特异性反应,提示它们均为小清蛋白的不同形态。用纯化的小清蛋白制备多克隆抗体,经Protein A Sepharose亲和层析纯化得到高纯度的免疫球蛋白G(IgG)。Dot-blot检测发现,抗体稀释至1/51200时仍能与纯化的小清蛋白有显色反应。用制备的多克隆抗体进行Western-blotting分析,能特异地检测4种鱼(鲤、鲢、鲫、黄鳍鲷)中的小清蛋白。     

不同煮制条件对斑点叉尾鮰鱼肉食用品质的影响

<正>斑点叉尾鮰肉质细嫩,经过蒸、煮等热加工熟化处理,鱼肉中的脂肪酸、氨基酸、核苷酸等风味物质或风味前体物通过热诱导转化,赋予产品独特的风味、质地和色泽。鱼肉在热处理过程中,各项指标的变化在很大程度上会影响最终产品的质量和得率,并且由于蛋白质变性对蛋白质的消化率有不利影响,因此会降低食材的风味和营养价值。本研究选择70℃和100℃热处理温度,经过不同的煮制时间,比较熟制产品的色泽、得率、基础营养成分、氨基酸含量、风味轮廓等指标,为鮰鱼煮制熟化提供理论依据。     

5种南极磷虾产品增强肠黏膜免疫的作用比较

为研究不同加工方式对南极磷虾(Euphausia superba)产品增强肠黏膜免疫作用的影响,将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为6组,分别饲喂以酪蛋白、虾肉、虾糜、普通虾粉、脱脂虾粉和脱脂脱氟虾粉为蛋白质来源的饲料。饲养4周后,统计小肠绒毛(villus)长度、隐窝(crypt)深度及二者比值(V/C),采用实时荧光定量PCR法检测紧密连接相关蛋白(occludin、claudin-1和ZO-1)mRNA表达水平。酶联免疫法检测小肠黏膜中sIgA、IL-6和IL-10的含量,免疫印迹法检测小肠IgA的蛋白表达量。结果显示,与对照组相比,5种产品均可增强大鼠肠道机械屏障,提高IL-10/IL-6水平,调节炎性细胞因子水平。虾肉和脱脂脱氟虾粉使小肠IgA表达分别上调30.24%和7.64%;同时促进肠黏膜sIgA的产生,分别增加21.97%和30.36%。研究表明,5种磷虾产品均可增强大鼠肠黏膜免疫功能,且以虾肉组效果最为显著,脱脂脱氟虾粉效果次之。本研究可为南极磷虾产品的开发利用提供理论依据。[中国渔业质量与标准,2020,10(4):37-44]     

日本囊对虾原肌球蛋白的原核表达、抗体制备以及组织表达分析

食物过敏是人类常见的一种过敏性疾病,主要由食物中的蛋白质引起。原肌球蛋白(tropomyosin,TPM)是食用虾蟹等甲壳动物引起过敏反应的主要致敏物质。研究从日本囊对虾肌肉组织中克隆了TPM基因,进行了原核表达和蛋白质纯化,并进一步制备了相应的抗体。Western-blotting分析表明原肌球蛋白在日本囊对虾组织中普遍表达,并且肌肉组织中表达量最高而鳃和皮肤组织中表达量最低。研究结果为对虾过敏性疾病的诊断和治疗以及脱敏食品开发等奠定了理论基础。     

不同养殖模式的凡纳滨对虾品质的比较

仪器分析法(营养成份分析和质构分析)与感官评价法有机结合,以对虾口感为主要考核指标,建立对虾品质鉴定体系,并以此法对无公害海水养殖、传统海水养殖及传统淡水养殖对虾3种不同养殖模式下生产的对虾品质进行比较.结果表明:3种对虾的机体营养成分组成差异不大,只有无公害虾肌苷酸含量明显高于其余两组,达2.76 mg·g-1.氨基酸分析中表明:无公害海水养殖对虾的必需氨基酸、非必需氨基酸、鲜味氨基酸及氨基酸总量等指标优于其余样品;无公害虾的感官指标基本上与海水虾相似,3种虾的色泽和气味指标差异不明显(P＞0.05),无公害虾的滋味及口感均比其它两组对照好;多汁性指标则以淡水虾最佳.在质构分析方面,3种虾硬度指标差异显著(P＜0.05),无公害虾与海水虾在肌肉的弹性及咀嚼性无显著性差异(P＞0.05),与淡水虾差异显著(P＜0.05),其结果与感官评价基本一致.本文全面比较3种对虾品质上差异,揭示对虾口感差异内在因素,为对虾品质评价提供了方法和手段.     

Effects of Decomposing Rhizophora apiculata Leaves on Larvae of the Shrimp Penaeus monodon

We studied the effects of different concentrations of decomposing Rhizophora apiculata leaves and their leachates on larvae of the shrimp Penaeus monodon under laboratory conditions. Shrimp mortality was highly dependent on the concentration of oxygen in the water, which in turn was strongly correlated to the amount of decomposing leaves in the same water. Shrimps died after 5 min when placed in water containing the highest concentration of mangrove leachates (15 g l⁻¹) tested in our experiments. Shrimp survival and biomass decreased significantly when the shrimp were cultured at the relatively higher concentrations of leaves and leachates (10 and 15 g l⁻¹); in contrast, moderate amounts of leaves or their leachates (2.5–5 g l⁻¹) had positive effects on shrimps. The survival and biomass of shrimps cultured with plastic leaves was lower than those of shrimps cultured with mangrove leaves, indicating that food derived from mangrove leaves contributed to a higher shrimp survival and biomass. These results have important implications for the culture of shrimps in extensive mangrove-shrimp systems. While litter may promote shrimp production, high leaf concentrations may have negative effects due to the drop in the oxygen concentration. Water circulation may help to prevent low oxygen conditions and reduce local accumulations of mangrove leaves.     

七种不同结构糖源对凡纳滨对虾三大营养物质代谢的影响

本实验研究了不同结构糖源饲料对初始体质量为(0.14±0.01)g的凡纳滨对虾生长、体组成及相关代谢的影响。实验共设7个处理,基础饲料中分别添加7种结构不同的糖源:葡萄糖、果糖、葡萄糖+果糖(1∶1)、蔗糖、麦芽糖、玉米淀粉和糊精,添加水平为20%。每处理设3个平行,每个平行放50尾虾,实验期56 d。结果表明,实验饲料对凡纳滨对虾的特定生长率和蛋白质效率有显著影响,呈现多糖蔗糖其他,其中葡萄糖组最低;实验饲料对凡纳滨对虾的全虾水分、灰分、蛋白质无显著影响,但对脂肪、肝糖原、肌糖原的影响显著。不同结构的糖源饲料对糖代谢相关酶及产物产生显著影响,对脂肪和蛋白代谢酶及产物影响不显著。     

Virulence status,viral accommodation and structural protein profiles of white spot syndrome virus isolates in farmed Penaeus monodon from the southeast coast of India

The objective of this study was to investigate the reason for variation in the virulence of white spot syndrome virus (WSSV) from different shrimp farms in the Southeast coast of India. Six isolates of WSSV from farms experiencing outbreaks (virulent WSSV; vWSSV) and three isolates of WSSV from farms that had infected shrimps but no outbreaks (non‐virulent WSSV; nvWSSV) were collected from different farms in the Southeast coast of India. The sampled animals were all positive for WSSV by first‐step PCR. The viral isolates were compared using histopathology, electron microscopy, SDS‐PAGE analysis of viral structural proteins, an in vivo infectivity experiment and sequence comparison of major structural protein VP28; there were no differences between isolates in these analyses. A significant observation was that the haemolymph protein profile of nvWSSV‐infected shrimps showed three extra polypeptide bands at 41, 33 and 24 kDa that were not found in the haemolymph protein profile of vWSSV‐infected shrimps. The data obtained in this study suggest that the observed difference in the virulence of WSSV may not be due to any change in the virus, rather it could be due to the shrimp defence system producing certain factors that help it to accommodate the virus without causing any mortality.     

Proteomic Analysis of Mechanisms Responsible for the Waterless Preservation of Fenneropenaeus chinensis Based on Cold-Forced Hibernation

ABSTRACT

In this study, the comparative proteomic approach was used to identify the proteins that were changed significantly during the waterless preservation of Chinese white shrimp (Fenneropenaeus chinensis). Approximately 380–430 protein spots were observed in the two-dimensional protein electrophoresis (2-DE) gels. Among them, 14 altered proteins from hemolymph were excised and subjected to matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) analysis. Eleven protein spots were successfully identified—including hemocyanin, hemolymph clottable protein, myosin light chain, and sarcoplasmic calcium-binding protein. It could be speculated that the combined action of decreased hemocyanin, increased hemolymph clottable protein, and myosin light chain forced Chinese white shrimp into a temporary state of hibernation under cold temperature and could keep the hibernated shrimps alive during the waterless preservation. Moreover, increased expression of sarcoplasmic calcium-binding protein ensured that hibernated shrimps could be aroused at warm temperature. On the basis of these findings, it is believed that a protein-protein networking mechanism of hemocyanin, hemolymph clottable protein, myosin, and sarcoplasmic calcium-binding protein could interpret the cold-forced hibernation and warm-arousal of Chinese white shrimp.     

Elimination of the major allergen tropomyosin from shrimp muscle by boiling treatment

Fisheries Science - Tropomyosin (TM) is the major allergen found in invertebrates, including shrimp. To reduce the allergenicity of shrimp muscle, attempts were made to eliminate TM from the muscle...