高效液相紫外法检测河鲀毒素

采用高效液相色谱法，用紫外检测器来检测TTX，有快速、简单和精确的优点。主要色谱条件为：Waters pico Tag^TM FAA色谱柱，0．01mol／L(NH4)3PO4溶液为流动相，紫外检测波长为205nm。该法在0．01～100μg／mL范围内，峰响应值与其浓度呈良好的线性关系，Y=11977x 11406，R^2=0．9997。最低检测限为6ng／mL。     

水产品中噁喹酸残留量的检测技术研究

采用高效液相色谱荧光检测器研究了牙鲆、罗非鱼和对虾肌肉组织中噁喹酸残留的检测技术。样品前处理方法为：以无水乙酸乙酯作为提取液,样品经均质、离心后,将提取液旋转蒸发浓缩,用流动相溶解定容,正己烷除去脂肪。高效液相色谱条件为：色谱柱采用反相C18柱,荧光检测器激发波长为325nm,发射波长为369nm,流动相为0．02mol／L磷酸＋乙腈＋四氢呋喃（69：16：15）,流速为0．8ml／min。噁喹酸标准曲线线性范围在10～200ng／ml。不同浓度水平下,噁喹酸的回收率为79％～93％,变异系数小于10％,检测限为10μg／kg。     

河鲀毒素的色谱检测法

河■毒素是一种重要的天然海生毒素。１９０９年日本学者田原纯首先从河■鱼中发现，并定名Ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ。１９５０年～１９５７年间，横尾晃、津田藤介等人首先从红鳍东方■，紫色东方■卵巢中独立地分离到了结晶态的河■毒素。其为无臭、易潮解的白色结晶体，分子式Ｃ１１Ｈ１７Ｎ３Ｏ８，相对分子量为３１９．２７。该毒素结构的测定由Ｗｏｏｄｗａｒｄ（哈佛大学）、平田和后藤（名古屋大学）及津田小组（东京大学—三共中央研究所）等分别完成。其结构如下图所示： 河■毒素在发现之初人们就在不断寻找其更好的检测方法。…     

暗纹东方豚TTX的微量,快速检测

采用高效液相色谱法建立快速,微量检测河豚毒素方法,使用ＷａｔｅｒｓｐｉｃｏＴａｇ＾ＴＭＦＡＡ色谱柱,以５％乙腈中含０．００５Ｎ三氟乙酸和０．００５Ｎ乙酸为流动相;荧光检测波长,激发波工为３６５ｎｍ,发射波长为５１０ｎｍ,该方法在２５ｎｇ／ｍｌ～３００ｎｇ／ｍｌ线性范围内峰面积响应值与其深度呈良好的线性关系,ｒ＝０．９９９４,最低检测线为１ｎｇ,该方法可简便,快速,微量,准确定性,定量检测河豚毒素。     

新型柱前衍生-高效液相荧光检测法检测水产品中河豚毒素

在稀碱条件下,河鲀毒素(TTX)与次溴酸钠和尿素于一定温度下反应生成具有荧光性能的物质,该反应与已报道的TTX在强碱下生成C-9碱的碱解不同。本研究拟对该衍生反应所需条件进行详细研究,并尝试依据该反应建立一种新型的河鲀毒素荧光检测方法。荧光扫描光谱显示,产物最大激发波长(EX)为233 nm,最大发射波长(EM)为370 nm。该反应对p H要求比较严格,反应最适p H在11.6~11.9之间。对样品进行衍生检测获得最强荧光信号的条件为:次溴酸钠0.036~0.09 mol/L、尿素10~50 g/L、碳酸钠0.2~0.3 mol/L,温度75℃。样品检测结果显示,此衍生反应具有高度专一性,信号强度与TTX含量成正比,在0.01~10μg/m L质量浓度范围内线性方程为y=109.17x+0.3965,线性相关系数为0.999。依据该衍生反应建立柱前衍生–高效液相色谱荧光检测法检测水产品中河鲀毒素含量,检测限达到20μg/kg,平行样品检测相对标准偏差为0.44%~7.25%,准确度高。对河鲀、虾虎鱼和织纹螺产品检测表明,该反应特异性强,不易出现假阳性,可用于河鲀毒素检测的确证。     

小鼠生物法快速定量检测河鲀毒素

以 13～ 2 2g体重的ICR小鼠作为实验对象 ,用不同浓度的河毒素 (TTX)溶液注射小鼠后 ,观察其中毒过程 ,探讨了小鼠死亡时间与性别、质量、注射的河毒素溶液浓度三者之间的关系 ,并对有效实验数据进行了统计分析。结果表明 :ICR小鼠从中毒到死亡均出现呼吸困难和挣扎的中毒症状 ;中毒程度与小鼠的性别、质量差异无显著相关 ,而与其所注射的河毒素溶液浓度密切相关 ,毒素溶液浓度是引起小鼠中毒的关键因子。该结论采用经验方程Y =e(a/x -b) 进行了验证 ,在此基础上 ,对常规的小鼠生物法定量检测程序进行了改进 ,改进后的检测方法提高了检测的稳定性和精确性 ,可作基层的水产品安全检测。     

恩诺沙星、氧氟沙星在鲤鱼体内的血药浓度测定

应用高效液相色谱(HPLC)法建立广谱抗菌药物恩诺沙星、氧氟沙星在鲤鱼体内的血药浓度测定方法。采用C18反相校，流动相为甲醇：0．01mol／L四丁基溴化铵(20：80)，磷酸调节pH至3．0，紫外检测，流动相流速为1．0ml／min，检测波长278nm，按外标法计算得出恩诺沙星、氧氟沙星在鲤鱼体内血浆中的药物含量。     

酶联免疫(ELISA)法测定水产品中呋喃唑酮代谢物AOZ的残留

采用MaxsignalTM AOZ快速检测试剂盒检测水产品中呋喃唑酮代谢物。通过对精密度、回收率和检测限等项目的测定，验证了方法的可行性。呋喃唑酮代谢物标准液在0．05ng／mL～4．5ng／mL范围内具有良好的线性，微孔板孔间变异系数为3．2％～7．7％。样品批内变异系数为5．2％～8．4％，批间变异系数为6．3％～8．9％，平均回收率为94．5％～98．4％。试剂盒的理论检测下限为0．05μg／Kg。该方法灵敏度高，重复性好，适用于水产品中呋喃唑酮代谢物残留的检测。     

酶联免疫（ELISA）法测定水产品中氯霉素残留量

建立水产品中氯霉素残留量的酶联免疫检测方法。比较不同样品处理方法对检测结果的影响，通过对检测范围、精密度、回收率等项目的测定，验证了方法的可靠性。氯霉素标准在0．05ng／ml-4．05ng／ml范围内具有良好的线性，板问变异系数小于16．4％，样品测定的变异系数为9．4％-13.8％，乙腈水提取方法的回收率在84％-116％之间。     

河鲀毒素提取技术及检测方法的研究进展

河纯毒素(TTX)具有高效的医用价值,河鲀毒素的提取、分离、提纯以及检测技术已成为当今的研究热点.文章介绍了河鲀毒素的理化性质、提取和提纯技术以及生物测定法、色谱法、色谱质谱联用法等多种检测分析方法,并提出了今后的研究方向.     

免疫荧光层析快速检测河豚毒素的研究

本研究利用自制的河豚毒素荧光免疫层析检测卡对河豚毒素进行快速定量检测,并分析其稳定性、灵敏度、趋势线拟合程度及检测范围。研究结果表明,自制的河豚毒素荧光免疫层析检测卡变异系数为0.124,拟合方程相关系数r~2值为0.995 5,检测卡的检测范围为2~600 ng/m L,可以满足对河豚毒素快速定量检测的要求。     

气相色谱法快速测定水产品中硫丹和溴氰菊酯残留量

建立了气相色谱法快速检测水产品中硫丹和溴氰菊酯残留量的分析方法.样品用乙腈水提取,正己烷除脂,提取液经液液萃取和反萃取,电子捕获检测器检测,外标法定量.通过优化前处理和上机条件,硫丹的检出限为0.004 mg/kg,溴氰菊酯的检出限为0.01 mg/kg.2种农药在检出限1、2、5倍加标水平下,回收率64.6%～88.9%,相对标准偏差4.1%～9.5%.此方法操作简便快速、重现性好且成本低,可以达到日本肯定列表中对2种农药的检测低限,满足水产品进出口检测要求.     

高效液相色谱法测定水产品中ATP关联化合物

建立了水产品中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黄嘌呤核苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)6种ATP关联化合物的高效液相色谱检测方法。样品中的ATP关联物经高氯酸提取并用氢氧化钠调节pH值至6.0-6.4后,以AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱为分析柱,0.02 mol/L KH2PO41-0.02 mol/L K2HPO4(V/V=1/1)的缓冲液为流动相进行洗脱,在254 nm波长下用高效液相色谱进行检测,外标法定量。研究表明,ATP、ADP、AMP、IMP和HxR线性范围为0.2-40.0μg/ml,Hx线性范围为0.1-20.0μg/ml,相关系数均大于0.999 0;ATP、ADP、AMP、IMP和HxR检出限为5.00 mg/kg,Hx检出限为2.5 mg/kg(S/N=3);对真鲷、鱼师鱼、鲑鱼、凡纳滨对虾和梭子蟹5种水产品进行3个浓度水平的加标实验,回收率在85.5%-105%之间,相对标准偏差(RSD)小于12.9%。实验结果表明,该方法简便、准确,适合于水产品中ATP关联物的测定。     

氨氮和亚硝酸氮快速准确测定方法研究

本研究提出了用液体标准色阶快速准确测定氨氮和亚硝酸氮的比色方法。研究的液体标准色阶的稳定时间在一年以上，氨氮和亚硝酸氮的测定误差分别为0．2mg／L和0．02mg／L。用本方法对名种类型的水样进行测定，结果表明，本方法与传统的分光光度法测定结果一致，适于海淡水养殖单位的现场使用。     

河豚毒素的分离纯化研究

本实验根据河豚毒素的理化性质,分别采用去除河豚内脏油脂、除蛋白、活性炭吸附、阳离子交换、分子筛层析、乙醇沉淀等方法得到纯度较高的河豚毒素。本方法生产河豚毒素具有对人体无毒无害、操作工艺简单、生产成本低廉、易于工业化批量生产等特点,并且生产出的河豚毒素可以基本满足各种对河豚毒素应用的需求,是较为可行的生产河豚毒素的方法。     

水中硝基苯的快速检测方法探讨

本文研究了一种快速、简便、有效的测定水中硝基苯的前处理方法,用苯萃取离心分离,处理后样品用气相色谱检测,回收率为84.5%～98.5%,便于样品批量处理,效果较好。     

Real-time PCR for the detection and quantitative analysis of IHNV in salmonids

The rapid identification and quantification of virus in diseased fish is a goal both conservationists and commercial aquaculturists have struggled to attain. Recently a technique for the detection of viral mRNA particles that uses fluorescent tagging and amplification has been developed. Utilizing primers and fluorescent labelled probes generated for the specific identification of the nucleocapsid (N) and glycoprotein (G) genes of infectious haematopoietic necrosis virus (IHNV), and an instrument that measures cyclic emittance of fluorescence, the presence or absence of virus can be easily and rapidly confirmed. This method is not only useful in confirming viral presence but is effective in measuring the relative or absolute quantity of virus present within the sample. This allows for the determination of the health status of a carrier fish by measuring the quantity of viral genomes or transcribed viral genes present. Because this method is based on sequence detection, instead of virus isolation in cell culture, it is also effective in determining the presence of pathogenic organisms from water, fish feeds, or other potential reservoirs of infection.     

胶体金免疫层析法快速检测水产品中呋喃妥因代谢物残留

采用胶体金免疫层析技术(GICA)测定水产品中的呋喃妥因代谢物残留,并用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对实验结果进行确证。结果显示,胶体金免疫层析法的检测限为1.0μg/kg,假阳性率不大于5%,假阴性率为0;对实际样本的检测结果与LC-MS/MS法一致。研究表明,胶体金试纸条法操作简便、快速,成本低,为水产品中呋喃妥因代谢物的残留检测提供了快速筛选方法,而LC-MS/MS法灵敏度高,结果准确,适用于阳性样本的确证和精确定量。     

渔业海水中铅的快速定量检测方法

以导电炭黑糊电极（CCBPE）为工作电极,建立了海水中重金属铅的阳极溶出伏安检测新方法.实验研究了支持电解质种类、pH、富集电位、富集时间、干扰物质等相关影响参数.结果表明,在最优条件下铅的检测限为0.1 μg/L.据之建立了海水中重金属铅的快速检测方法,并将其应用于青岛近海渔业海水样品中铅含量的检测.检测结果与原子吸收光谱法所测结果一致,表明这种操作简单、快速、免汞、低费用的检测模式具有潜在的应用价值.     

动物携带河豚毒素的分子机制与生态作用

河豚毒素在自然界中分布广泛,从微生物到植物、动物都有发现.除河豚外,河豚毒素还在节肢动物、棘皮动物、软体动物、蠕虫、蝾螈、青蛙等其他物种中都有不同含量的分布.不同动物产生、富集河豚毒素的机制可能存在很大差别,但是河豚毒素对其携带动物在自然选择进化中发挥着重大的作用.目前中国对河豚毒素的研究主要集中在河豚毒素的分离纯化、检测分析及抗体制备等方面,而对河豚毒素产生的分子机制及生态作用的研究还很少,文章通过综述国外对河豚毒素分子机制及生态作用的研究,进一步阐释动物携带河豚毒素的分子机制及河豚毒素对动物的重要生态作用.