光、氮和半连续培养更新率对微绿球藻生长与采收量的影响

对水产养殖中的主要饵料微绿球藻(Nannochloropsis oculata (Droop) Hibberd)进行了5×3×2析因试验,培养液NO-3-N水平分别设置为0、3、6、12、24 mg/L,光照强度分别为22.9 μmol/(m2·s)、43.2 μmol/(m2·s)、80.4 μmol/(m2·s),更新率分别为10%和25%,研究了光、氮和半连续培养更新率对微绿球藻生长、采收量的影响.协方差分析结果显示,NO-3-N水平、光照强度、更新率及其交互作用对细胞密度、生长率和采收量的影响均存在显著差异(P<0.001),以更新率影响最大,其次是光照强度,影响最弱为NO-3-N水平.更新率25%时,平均细胞密度(753.2×104/mL)显著低于10%更新率下的细胞密度(1 737.5×104/mL),但平均生长率和采收量都显著高于更新率10%时的生长率和采收量,分别为0.349/d和4.69×108/d.在光照强度22.9 μmol/(m2·s)下,细胞密度、生长率和采收量都显著低于其他组,其最大值均在80.4 μmol/(m2·s)光照强度组,该组细胞密度、生长率和采收量分别为1 721.1×104/mL、0.283/d和6.51/×108/d.在不同NO-3-N水平处理下,不添加NO-3-N时的细胞密度、生长率和采收量都最低,3 mg/L时次之,6 mg/L以上组(包括6 mg/L组)最高.研究结果还表明,更新率增加时,不仅光衰减变小,生长率随之变大,而且培养液中NO-3-N浓度也随之增加,从而促进了光、氮间的平衡利用,使采收量相应增加;但更新率增加细胞密度下降.显然,更新率是影响采收量的最主要因素,且存在一个最适更新率使采收量最大,这些结果对微藻半连续培养的合理更新与科学施肥有一定的应用价值.     

不同氮磷硅含量和接种密度对三角褐指藻生长的影响

通过均匀设计试验研究N、P、Si含量与接种密度对三角褐指藻生长的动态关系。结果显示 ,8d藻生长率和 8d密度差不受N含量 (质量浓度 1.0～ 89.4mg/L)影响 ,但随P含量 (质量浓度 0 .1～ 2 8.6mg/L)和Si含量 (质量浓度 0 .5～ 2 0 .1mg/L)增加而增加。当P质量浓度 2 8.6mg/L、Si质量浓度 2 0 .1mg/L ,接种密度分别为 8.4× 10 4 ml- 1和 143.1× 10 4 ml- 1时 ,藻生长率和密度差可达 0 .778d- 1和 869.7× 10 4ml- 1。 11d藻生长率主要受接种密度的影响 ,N质量浓度起次要作用 ,P和Si质量浓度对藻生长率无影响。当N质量浓度 89.4mg/L ,接种密度 8.4× 10 4 ml- 1时 ,藻生长率可达 0 .4 92d- 1。     

枯草芽孢杆菌的培养条件及对水质的净化作用

研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis Cohn,1872)(菌株编号:LB-B3)的培养条件及其在净化对虾养殖池水样方面的效果。实验分别设置了9个不同的pH值梯度(pH 2～10)和6个不同接种量梯度(0.3%、0.5%、1%、3%、5%和7%),以吸光值(OD)为生长指标,进行了枯草芽孢杆菌培养条件的优化实验;同时又设置了5个不同接种浓度(0 CFU/mL、5.2×104CFU/mL、1.04×105CFU/mL、1.56×105CFU/mL和2.08×105CFU/mL)接种待处理水样,测定了96 h内化学耗氧量、亚硝酸氮、氨态氮和溶氧等4个水质指标的变化情况。结果表明:pH=7.0、接种量为7.0%时,OD值最大;枯草芽孢杆菌能显著净化水质,但使用后会暂时性增加耗氧。     

提高室内精养褶皱臂尾轮虫增殖率的技术要点

从褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)的基础环境因子和控制因子等各方面阐述如何提高轮虫增殖率。褶皱臂尾轮虫的适宜繁殖条件:最适pH值7~8,最适温度35℃,最适盐度18‰,比重1.016,光照4 400~10 000lx,溶氧1.5mg/L以上。轮虫接种密度以1个/mL为宜,池中轮虫繁殖密度以100个/mL为宜。提倡用光合细菌+扁藻投喂轮虫,慎用酵母培养褶皱臂尾轮虫。在适宜条件下,经10d的培养,褶皱臂尾轮虫可由原来的1个/mL增殖到1 500~2 000个/mL。     

不同精子密度冷冻猪5mL细管精液效果比较

采集上海白猪精液进行5mL细管冷冻,比较冷冻密度分别为0.5×109个/mL、0.7×109个/mL、1.0×109个/mL的冻后精子质量。结果表明:3种密度冷冻猪精子,解冻后精子质量差异不显著(P﹥0.05)。     

多因子交互作用对菊花江蓠氮、磷吸收速率的影响

在单因子试验的基础上,从各因子的生长适宜区间内分别选取10个盐度梯度、10个光照梯度和10个温度梯度,以及10个NO3-N浓度梯度、10个NH4-N浓度梯度和10个PO4-P梯度,采用均匀设计方法,考察各因子及其交互作用对菊花江蓠N、P吸收速率的影响,通过回归分析得到:温度、光照与NO3-N、NH4-N间存在着很明显的交互作用关系,它们共同作用影响着海藻对NO3-N、NH4-N的吸收速率;对PO4-P的吸收速率,仅受到温度及PO4-P共同作用的影响;而对TIN及PO4-P的吸收却都受到N×P交互作用的影响。     

假交替单胞菌对哈维氏弧菌拮抗作用初探

以2216E作为培养基,通过补加氮源和碳源,可使假交替单胞菌WCPW15003的菌悬液中菌体密度由2.31×10~8 cfu/mL升至3.36×10~9 cfu/mL。在pH 7.6、温度30℃、盐度30条件下,当哈维氏弧菌PBVH3311分别为10~3、10~4、10~5、10~6、10~7、10~8 cfu/mL时,假交替单胞菌WCPW15003最小抑菌密度分别为10~3、10~5、10~5、10~7、10~8、10~8 cfu/mL,对应抑菌圈直径分别为(8.40±0.16)、(9.64±0.07)、(8.24±0.22)、(18.15±0.09)、(18.53±1.34)、(11.68±2.58) mm。当哈维氏弧菌PBVH3311密度为10~3～10~5 cfu/mL时,实现100%拮抗作用的方程为:6.06=9.09-0.3339x+0.02325y+0.00267x~2-0.0002273xy+0.0002477y~2;当哈维氏弧菌PBVH3311密度为10~6～10~8 cfu/mL时,实现100%拮抗作用的方程为:6.25=8.395-0.1682x+0.1161y+0.00106x~2-0.00000675xy-0.0001026y~2。本研究结果将为今后开发防治热带海水养殖哈维氏弧菌病原的益生菌制剂及其施用技术奠定良好基础。     

光合细菌Ⅰ的分离及其培养条件的优化

从虾塘淤泥中分离出1株能降解亚硝酸盐的光合细菌I,初步鉴定其为球形红假单胞菌。利用Plackett-Barman设计法,对影响光合细菌I生长量的11个因素进行了筛选,确定影响该菌生长的培养基的主要因素为NH_4Cl、NaHCO_3、温度和接种量;采用响应面法对其中的4个显著因子的最佳水平进行研究,结果表明,当NH_4Cl为0.99 g/L、NaHCO_3为1.68 g/L、温度30.18℃、接种量8.90%时,经过5 d培养,菌体密度显著提高,培养液OD_(660)可以从0.972提高至1.343。     

等鞭金藻3011的半连续密封培养

对等鞭金藻 3 0 1 1在不同的光照、温度和接种浓度条件下进行培养 ,分为两组 :实验组是用密封袋半连续培养 ,对照组是用大型玻璃缸槽进行培养。根据其相对生长常数K′、平均日增量X和平均倍增时间G ,筛选出最佳生长条件 :光照 6 0 0 0～ 80 0 0Lx ,水温 2 0℃ ,pH 8.2～ 8.6 ,接种浓度 3 0× 1 0 4个 mL。结果表明 ,在同样条件下 ,半连续密封培养等鞭金藻 3 0 1 1相比常规玻璃缸培养 ,达到 2 0 0× 1 0 4个 mL以上的收获浓度快 2～ 3d ,日增量和倍增时间均快 3倍左右     

温度和培养基对蒜头藻生长的影响

用BG-11、HB-4和f/2培养基,温度25±1℃和28±1℃,分别对蒜头藻进行培养。结果表明:蒜头藻在27±1℃下、BG-11培养基中生长最好,25 d后最高密度可达1.31×108ind/mL,相对生长常数为0.089。蒜头藻直接在f/2培养基中生长情况不理想,而通过海水驯化的蒜头藻在f/2培养基中生长良好,27±1℃下经15 d培养密度可达3.05×107ind/mL。     

雨生红球藻的优化培养研究

以MAV为基本培养基，分别研究了光照、氮、磷、铁、碳等对红球藻生长的影响，并用正交试验研究了光照、温度、接种密度对红球藻生长的影响。结果表明：红球藻生长所需适宜的氮、磷、铁、碳的体积质量分别为KNO3 0.1g/L,KH2PO4 0.02-0.04g/L,FeSO4 0.5mg/L,NaHCO3 0.2g/L。多因子正交试验结果表明，在光照强度为700 lx、培养温度30℃、接种密度为5000/mL时，生长最佳。     

接种密度和面包酵母投喂量对蒙古裸腹溞种群变动和生产量的影响

在室内水槽中进行蒙古裸腹(Moinamongolica)的大量培养,研究不同接种密度和面包酵母投喂水平对该种群变动和生产量的影响。所用蒙古裸腹为20世纪90年代采自山西省晋南半咸水湖、在海水中长期培养保存下的种。实验1中,接种密度分别设为338ind/L、145ind/L和88ind/L3个水平,面包酵母投喂量为5mg/L,每天4次,各设3个重复。实验2中,面包酵母投喂量分别为30mg/(L·d)、20mg/(L·d)和10mg/(L·d)3个水平,蒙古裸腹接种密度为900ind/L,各设3个重复。实验结果表明:(1)在一定范围内蒙古裸腹培养产量随接种密度增加而增加,当接种密度低于88ind/L时,接种的蒙古裸腹较难形成稳定的种群。(2)当使用面包酵母(Bakeryeast)作为培养蒙古裸腹的惟一食物时,食物需要量随种群密度的变化而变化。当密度低于1500ind/L时,适宜的面包酵母投喂水平为20mg/(L·d);当密度超过5000ind/L时为30mg/(L·d)。上述结果显示,接种密度和面包酵母投喂量对蒙古裸腹种群变动和生产量具有重要影响。建议在蒙古裸腹培养生产中接种密度高于150ind/L,面包酵母投喂量为0 8×10-5～1 3×10-5g/(ind·d)。     

碳源对藻、菌及其共培养系统水处理效果的影响

水体富营养化越来越严重影响水生态系统的结构和功能,甚至威胁人类健康,相比于传统的理化处理方法,利用藻菌共培养系统处理污水是一种绿色环保的水处理方式,合适的碳源可以提高藻菌共培养系统的污水处理效率。为探究不同碳源对藻、菌及其共培养系统污水处理效果的影响,分别使用葡萄糖、乙酸钠和柠檬酸三钠为碳源进行小球藻和地衣芽孢杆菌纯培养和藻菌共培养试验,每组试验设置3个平行,小球藻和地衣芽孢杆菌的初始接种量分别为2.0×10~6个/mL和1.0×10~7CFU/mL。结果显示,柠檬酸三钠是地衣芽孢杆菌纯培养时的适宜碳源,葡萄糖是藻菌共培养系统最适宜碳源,且地衣芽孢杆菌可促进小球藻生长。以葡萄糖为碳源,藻菌共培养系统的总氮、总磷和总有机碳去除率最高可达86.05%、93.71%和82.19%。研究表明,为提高污水处理效率并获得最大的微藻生物量,需要选择适合微藻生长并满足细菌代谢的碳源。     

大竹蛏生产性人工繁育试验

2007年对大竹蛏进行了生产性人工繁育试验。对亲本不同批次催产效果、不同规格亲本产卵差异、孵化密度进行了比较,研究了D形幼虫发育与温度的关系以及幼虫发育各阶段生长规律等,结果显示,大竹蛏属分批成熟、分批产卵的潜居性贝类,不同批次个体平均产卵量(36~118)×104cell,个体总产卵量294×104cell。壳长8~10 cm的亲贝产卵量大,催产效果好。受精卵适宜的孵化密度为5~10 cell/mL。在水温21~24.5℃条件下,D形幼虫经8~5 d生长,发育变态为附着稚贝。D形幼虫壳长日生长33.33±4.22μm,1 mm前的稚贝壳长日生长108.33±22.57μm,1~10 mm的稚贝平均旬生长量2.12 mm,10.4~30.6 mm的苗种平均旬生长量为2.02 mm。当水温下降到15℃后,大竹蛏苗种生长滞缓。2007年培育出壳长11.52±0.27 mm的稚贝2 165×104cfu,平均成活率12.1%。     

褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis O.F.Müller)土池大面积培养技术

本文就褶皱臂尾轮虫在土池大面积培养的技术进行研究。结果表明:在适宜的温度、良好的水质条件下,通过接种在室外24000m~3水体土池中褶皱臂尾轮虫密度可达到20～35只/ml,日平均采收374.6～692.5×10~8只,为育苗生产提供了充足的饵料生物。     

文蛤CDK1基因在选育与自然群体早期生长阶段中的表达特征

为探究细胞周期素依赖性激酶1（CDK1）在选育群体红文蛤和自然群体黄文蛤（）的cDNA序列，该基因cDNA序列全长为1623 bp，其中包括353 bp的5''末端非翻译区（UTR），370 bp的3''UTR，900 bp的开放阅读框（ORF），共编码299个氨基酸。预测氨基酸序列具有较高的保守性，包含STKc-CDK1-euk结构域、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族特征序列DLKPQN和G/V-T/S-X-X-Y/F-X-A-P-E、与cyclin B结合相关的保守序列PSTAIRE，以及与ATP相结合的保守序列GXGXXG和K33。组织表达结果显示，基因在各个组织中广泛表达，其中性腺中的表达量最高，其次是外套膜。不同条件（光照、饵料）培育实验中，光照强度分别为2.16~778 Lux和1.48~70.6 Lux，饵料密度分别为20×10⁴ ind/mL和5×10⁴ ind/mL，结果显示，红文蛤苗种表现出比黄文蛤苗种更快的生长速度；各养殖条件下<0.05）。由此推测，基因在文蛤苗种生长中发挥重要作用，且选育后的红文蛤较黄文蛤拥有更好的生长性能。本实验将为进一步研究文蛤生长发育相关机制提供参考，也为文蛤新品种选育奠定理论基础。     

分光光度法测定俄罗斯鲟精子密度标准的研究

为了标准化精子超低温冷冻保存和人工授精程序,建立了分光光度法测定俄罗斯鲟精子密度的方法,比较了不同波长(380 nm、530 nm、780 nm)下吸光度(A)与精子密度(C)的关系。结果表明,分光光度法的检测下限为3×106cells/mL,且检测上限随波长的增加而上升,当精子密度为3×106~1.5×109cells/mL时,530 nm为最适检测波长,吸光度与精子密度呈对数回归关系,其回归方程为:A530=-8.560+1.323 lgC(R2=0.971)。     

碳氮营养和培养条件对芽孢杆菌(Bacillus sp.) A4生长的影响

芽孢杆菌(Bacillus sp.) A4是一株具有溶甲藻能力的菌株，为探究营养条件与培养条件对A4生长的影响，明确在多因素共同作用下菌株的生长特性，先以单因素方法比较不同碳、氮营养因子对其生长的影响，再以Plackett-Burman方法综合比较碳源、氮源、pH、接种菌量、温度、转速、装液量等因子对其生长的协同影响效应。结果显示，A4菌对有机碳源玉米浆和有机氮源大豆蛋白利用效果最好，培养24 h后菌量分别达到3.58×108、3.19×108 CFU/ml。各因子的重要性排序依次为大豆蛋白、温度、玉米浆、转速、接种菌量、pH、装液量，且大豆蛋白和温度对A4菌的生长影响显著(P<0.05)。研究表明，培养条件对菌株生长调控也有重要意义，在评估相关因素对菌株生长或生态功能的影响时，须将营养条件和培养条件协同分析。     

浅析褶皱臂尾轮虫室内人工海水的培育方法

对室内人工海水培养褶皱臂尾轮虫的用水、盐度、温度、接种密度、饵料等方面问题进行探讨。结果表明:人工海水尽可能采用无机盐全面的配方,盐度1.5%左右,温度25~30℃,接种密度20~50个/mL,每100万轮虫投喂酵母0.5~1.0g。     

溴氰菊酯对4种海水养殖生物的毒性及其积累

以海水养殖的2种甲壳类动物(远海梭子蟹Portunus pelagicus、日本囊对虾Marsupenaeus japonicus)和2种双壳类动物(文蛤Meretrix meretrix、菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum)为材料，进行了溴氰菊酯对4种海水养殖生物的急性毒性及其积累实验研究。结果显示，4种海水养殖生物的死亡率与溴氰菊酯浓度及其暴露时间成显著正相关。溴氰菊酯对远海梭子蟹和日本囊对虾的24 h LC50、48 h LC50、96 h LC50分别为2.07×10–4、1.70×10–4、1.10×10–4 mg/L和7.32×10–4、3.90×10–4、1.43×10–4 mg/L，安全浓度分别为3.44×10–5 mg/L和3.32×10–5 mg/L；溴氰菊酯对文蛤和菲律宾蛤仔的24 h LC50、48 h LC50、96 h LC50分别为1.52、0.30、0.27 mg/L和0.67、0.11、0.06 mg/L，安全浓度分别为3.51×10–3 mg/L和9.50×10–4 mg/L。溴氰菊酯对远海梭子蟹、日本囊对虾的毒性明显大于文蛤和菲律宾蛤仔。文蛤和菲律宾蛤仔在溴氰菊酯平均浓度分别为0.86–0.05 mg/L和0.37– 0.03 mg/L的水体中暴露24–96 h时，其对溴氰菊酯的积累系数分别为2.57–12.40和3.03–27.85，文蛤和菲律宾蛤对溴氰菊酯的积累率与暴露时间成正相关，与暴露浓度成负相关。不同种类的海水养殖生物对溴氰菊酯的敏感性及其积累率存在显著差异。