高效利用秸秆的香菇新菌株选育

从香菇8号和香菇L26子实体中分离担孢子得到单核菌丝体,经紫外线诱变后进行配对杂交,通过镜检、拮抗试验以及利用玉米秸秆代料培养筛选高效利用秸秆的香菇新菌株,并对诱变杂交菌株的部分生物学特性进行研究。结果表明:试验所得香菇杂交菌株X2、X5、X6长势较好,其中,X6的产量比两亲本菌株高。     

对粤北山区4株香菇菌株的初步研究

探讨来自粤北不同地方香菇菌株的共性与差异,并研究香菇菌株的最佳培养条件。通过拮抗试验明确了各菌株之间的拮抗关系;通过组织培养研究了不同碳源、氮源、C/N、pH、维生素、温度、湿度和光照时间对香菇菌株生长的影响。4株香菇菌株都来自粤北不同地方,但相互之间表现出拮抗关系,表明4株菌株的亲缘关系较远。香菇的最佳碳源是葡萄糖或蔗糖,最佳氮源是酵母膏或黄豆粉,碳氮比为10~30∶1,初始pH值控制在5左右;在培养菌丝体时要注意避光培养,培养温度不宜过高或者过低,最适温度为25℃,在培养基中添加VB1或者Vc均可促进菌丝体的生长;培养基的湿度控制在60%最佳。4株菌株的亲缘关系较远,并且野生菌株具有较强的生长势,具有进一步开发利用的价值。     

运用SNP-CAPS分子标记定位香菇重要功能基因的研究

根据香菇单核菌丝体135A和135B的全基因组测序,通过生物信息学方法分析筛选出香菇功能基因CAP、GLA1、TLG1结构域中的非同义SNP位点,开发出3对SNP-CAPS分子标记。结果表明:这3对功能基因SNP-CAPS分子标记可将23个香菇单核体供试菌株分成135A型(分别为16株、20株、2株)和135B型(分别为7株、3株、21株),这些标记表现出的多态性为进一步研究香菇菌株的来源和功能基因的定位提供参考价值;并建立起可以简单、快速、准确地调查重要功能基因的SNP位点变异情况的方法。     

金针菇不同类型单核原生质体的分离及其差异比较

通过原生质体单核化技术处理18株金针菇菌丝体,获取其单核体材料,并进行比较。供试菌株中,9个菌株仅获得一种亲本交配型的单核体菌株,另9个菌株获得两种亲本型的单核体菌株,经x^2方法测算,有5个菌株的两种单核体菌株数目呈1：1,其余菌株的两种单核体菌株分布表现不同程度的偏离。通过观测不同菌株的单核体发现,一些出发菌株中分离的两种单核体在生长速度和菌落形态上比较相似,而另一些则表现明显差异,其中相同交配型的菌株间不表现差异。     

香菇单核菌丝多态性研究

本文研究了来自香菇不同菌株的单核菌丝的交配型、生长及生化特性。结果表明，单核菌丝在菌落形态、交配型及酯酶同工酶谱上存在着多态性，发现了１种以前未见报道的单核菌丝形态类型。在Ｌ２６菌株的单核菌丝交配试验中得到了白色子实体材料，对来自Ｌ２６和２４１－４的单核菌丝进行杂交，获得了２菌株的杂交材料。     

香菇单核原生质体杂交菌株JW系列的选育研究

以香菇菌株精选和武香作为亲本制备单核原生质体,将两个亲本的单核原生质体进行一一杂交。对杂交菌株与亲本菌丝长势和长速、产量、子实体形态、氨基酸含量等农艺性状比较,获得了农艺性状较优良的菌株JW1和JW3。     

磁场处理对香菇菌的生长影响

为了提高香菇菌株的生物效率，达到增产目的。以香菇菌为材料，研究稳恒磁场强度对香菇菌丝体生长发育的影响。从而加快香菇菌丝体的原基形成和分化。采用不同的磁场强度处理菌种，以及不同磁场强度的磁化水喷洒的方法。     

不同养料条件下香菇甲醛脱氢酶活性与甲醛含量的变化研究

[目的]以香农8号为实验菌株,研究香菇甲醛脱氢酶酶活(FADH)与甲醛含量的变化关系。[方法]通过测定不同培养料栽培下的香菇不同生长阶段甲醛脱氢酶的酶活和甲醛的含量,并进一步在液体培养基中加入不同来源甲醛脱氢酶初酶液培养香菇并测定菌体中甲醛的含量。[结果]香菇中甲醛含量受到甲醛脱氢酶的影响,经培养料一栽培下,菌丝体、菌柄和菌盖的甲醛含量分别为281.56、129.10和73.77 mg·g~(-1),甲醛脱氢酶的酶活分别为0.45、0.63和1.13 u·g~(-1);经培养料二栽培下,菌柄、菌盖和菌丝体的甲醛含量分别为221.81、212.22和123.88 mg·g~(-1),甲醛脱氢酶的酶活分别为0.80、0.94和1.71 u·g~(-1);经培养料三栽培下,菌柄、菌盖和菌丝体的甲醛含量分别为73.77、112.20和165.46 mg·g~(-1),甲醛脱氢酶的酶活分别为1.94、1.71和1.57 u·g~(-1);对香菇液体培养基中加入不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mL)的经甲醛诱导后香菇发酵所产的甲醛脱氢酶FADH1后,香菇菌丝体中甲醛的含量分别为195.32、173.25、139.29、126.49、73.25 mg·g~(-1),对香菇液体培养基中加入不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mL)的香菇自身子实体分离得到的FADH2后,香菇菌丝体中甲醛的含量分别为197.66、95.32、75.84、55.06、20.00 mg·g~(-1),香菇中甲醛脱氢酶活性与甲醛含量呈现一定的线性关系,甲醛脱氢酶酶活性越高,香菇中甲醛含量越低。[结论]在一定条件下,甲醛脱氢酶能显著降低香菇菌丝体中甲醛的含量。     

香菇单双核杂交菌株细胞的两种生化指标分析

应用生物化学技术，对香菇单双核杂交菌株进行细胞学分析，以细胞内可溶性蛋白质及酯酶同工酶为指标，对香菇单双核杂交的亲本以及杂交后代进行分析鉴定，认为在所选单双核菌株杂交过程中，单核与双核菌株可能发生了基因重组，单双核杂交技术可作为一种香菇品种改良的方法应用于香菇杂交育种的研究中。     

香菇[Lentinus edodes (Berk.)Sing.]高产优质菌株的选择及其子实体形态发生的细胞学观察

为了鉴定野生香菇的经济性状,探讨选育高产优质菌株的较快途径,本试验利用1979年在鄂西山区采集分离得到的35个野生香菇菌株,加上从国内外收集到的香九、7625等10个香菇品种作为试验材料,一共45个菌号,并以引进的7402为对照,采用木屑装瓶栽培香菇的方法,进行了四次以产量为主的选种出菇试验。结果指出,在45个供试材料中,单产高于7402的有9个菌株,其中包括4个野生香菇菌株(HML44、HML55、HML57、HML58)。这就表明,我国香菇资源丰富,大量采集野生香菇菌株,直接从中选择适应我国的优良品种,或将它们留作育种亲本,是一项快速而切合实际的工作。从结构和功能相联系的观点出发,开展香菇的细胞学研究,可以提高良种选育工作的科学性。试验采用盐酸吉姆萨(HCl Giemsa)染色压片的方法,观察香菇担子中的核行为和三级菌丝体(tertiary mycelium)细胞核的分裂过程。这一初步探讨,可为今后的香菇良种选育工作,以及深入进行其细胞生物学研究提供参考。     

香菇菌株出菇性状与产量的相关分析

[目的]探究不同香菇菌株各出菇性状间的关系,以期得出可推及香菇菌株性状间联系的一般性结论,为香菇栽培提供参考.[方法]以68支香菇菌株进行栽培出菇管理,测定20个性状指标,采用SPSS 17.0对数据进行因子分析和通径分析.[结果]对20个出菇指标的方差分析表明性状指标间差异极显著(P<0.01).通过因子分析将出菇性状指标按照因子得分归纳为6个因子成分,包括产效因子、单菇质量因子、结构因子、着生及潮次因子、营养生长因子和菌丝菌棒互作效应因子,可以解释73.223%的性状变量信息.通过通径分析得到单棒菇数、菌盖直径、污染率等3个出菇性状指标对单棒产量有直接作用和间接作用的量化结果,分析结果表明自变量与因变量关联程度大小为单棒菇数>菌盖直径>污染率.[结论]68支香菇菌株出菇性状的信息可以用6个因子成分表征,性状指标与单棒产量之间关系的多元回归方程为y=-96.616+5.389x1+3.087x2+ 131.744x3.     

灵芝单双核菌丝液体发酵产多糖量的比较研究

利用液体发酵技术对灵芝单双核菌丝产生多糖进行了研究。结果表明,单核菌丝产糖量最大值为1 321.0mg/L,双核菌丝产糖量最大值为1 024.0mg/L,单核菌丝产多糖量比双核菌丝高,为采用单核菌丝作为产灵芝多糖的育种材料提供了理论依据。     

黑木耳不同交配型的单倍体菌株RAPD/BSA分析

从黑木耳(Auricularia auricula)种内杂交子H2J3的子实体上单孢分离培养得到F1代52个单核体菌株，将F1子代及亲本(H2，J3)等所有供试单核体菌株的菌丝体两两配对培养，采用核荧光染色观察核相，和光学显微镜观察锁状联合，鉴别菌丝交配反应是否形成双核体菌丝，同时测定了亲本菌株所有F1子代的交配型。根据交配型表型将F1子代菌株分成两群(F1-A1，F1-A2)，将每群内各自菌株的DNA等量混合，构建交配型基因的等基因池，通过64个随机引物的RAPD分析，发现引物S126在2个等基因池间扩增出差异带S1261021，且在属于同一交配型的亲本及F1子代之间扩增结果基本一致，表明S1261021是与交配型基因连锁的分子标记。     

3种内生真菌诱导子对金钗石斛部分生化指标的影响

以石斛内生真菌菌丝体为诱导子,在不同浓度下对金钗石斛进行诱导,测定不同浓度诱导子对金钗石斛植物体内SOD、POD、PAL酶活性等生化指标。结果:不同内生真菌菌丝体对植物生理效应不同,菌株A菌丝体随着浓度的增大SOD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,POD、PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐减小;菌株B菌丝体随着浓度的增大SOD活性则逐渐减小,POD、PAL逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降;菌株C菌丝体随着浓度的增大SOD、POD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐增大。研究表明,不同类型不同浓度诱导子对植物体内酶生理生化代谢产生不同影响。     

真姬菇SIEF3136菌株单核体RAPD多态性分析

[目的]探讨真姬菇单核体间RAPD标记多态性,为育种材料的选择提供一定的分子水平依据。[方法]以真姬菇（Hypsizygus marmoreus）工厂化栽培白色菌株SIEF3136的原生质体单核体和不同孢子单核体为材料,进行RAPD分析。[结果]筛选到38条多态性引物,共扩增341条条带,其中253条表现多态性,多态率为74.2%。31个菌株的相似系数为0.34～0.90。除单核体S18-16,同一交配型的单核体间的相似系数都在0.60以上,表现出较高的相似性。在大约0.61的相似水平上,所有菌株分为2组。PM-01与T1、T3聚为第1大类,PM-02与T2、T4聚为第2大类。另外,在不到0.62的水平上S18-16聚为第3大类,显示出极大的差异,这很可能是该单核发生突变所致。[结论]真姬菇子实体上担子在减数分裂中染色体交换很高,RAPD标记可以用于真姬菇单核多态性研究,并可为交配型鉴定提供参考。     

中国被毛孢三种菌丝形态的超显微特征观察

为探究人工培养中国被毛孢Ophiocordyceps sinensis过程中出现的3种形态菌丝(基内菌丝、菌丝团与气生菌丝)的差别及产生机理,以分离自单子囊孢子的菌株为材料,分别用光学显微镜和扫描电子显微镜观察3种形态菌丝的显微与超显微形态。结果发现:菌丝直径和形态不同,表现为菌丝团>基内菌丝>气生菌丝;气生菌丝排列疏松,菌丝表面附着有大量分生孢子;菌丝团的菌丝褶皱明显、扭结且相互交联缠绕;基内菌丝排列密集,菌丝融合、分支现象明显。说明出现三种形态的菌丝是中国被毛孢的特性,与菌种和菌株纯度无关,且分生孢子在气生菌丝顶端或中部直接以出芽的方式形成。     

长根菇交配系统研究

[目的]研究长根菇交配系统,指导遗传育种工作。[方法]以长根菇子实体为材料,收集并分离单孢,以锁状联合为标记鉴别是否为单核茵丝体。采用三轮交配反应对110株孢子单核体进行三轮两两交配反应。[结果]110株单核体按交配型被分为4组,分别含有21、30、13和46个茵株。[结论]长根菇的交配型受双因子控制,属于四极性交配系统。     

灵芝原生质体单核化杂交子的评价

本研究对比分析了3个灵芝原生质体单核化杂交子及其亲本的菌丝生长速度、产量、出菇期、有效成分含量;评价了采用原生质体单核化技术进行灵芝杂交育种的可行性.测定结果表明,3个杂交菌株中,"杂交1号"分别比亲本"广东赤芝"和"灵芝5.75"提早22和3 d出菇,产量比"广东赤芝"高178.5%,比"灵芝5.75"高34.9%;"杂交2号"的菌丝生长速度明显快于2个亲本菌株,子实体三萜含量比"广东赤芝"高198%,比"灵芝5.75"高121.2%;这2个杂交子表现出明显的杂交优势,说明这种灵芝原生质体单核化杂交育种技术有实用价值,可用于灵芝新品种培育.     

番茄灰霉生防菌XF的筛选、鉴定及生防因子的初步探索

菌株XF是一株分离自甘肃省兴隆山原始森林土壤的对番茄灰霉病具有良好防治效果的拮抗细菌。通过对该菌株的形态学特征观察以及16S rDNA序列的分析鉴定,确定菌株XF为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。拮抗试验表明,菌株XF能显著抑制番茄灰霉菌菌丝的生长,抑制率可达66.35%,并使菌丝出现异常分枝,囊泡状畸形且伴有细胞壁破裂,内涵质外泄的现象。菌株XF发酵60 h,10%无菌滤液对番茄灰霉菌菌丝的抑制率为98.19%。生化分析测定结果表明,菌株XF的次生代谢物含有蛋白酶、葡聚糖酶、几丁质酶、铁载体以及生长素IAA,表明该菌株具有生物防治潜力。     

冬菇菌种分离与培养特性研究

[目的]研究一株野生高产冬菇菌种的培养特性。[方法]以新鲜野生冬菇子实体为材料,采用组织分离法获得冬菇菌种,研究其培养特性。[结果]冬菇在加富PDA培养基上菌丝生长良好,菌丝白色、呈细棉绒状或绒毡状,稍有爬壁现象。在显微镜下,菌丝粗细均匀,有锁状联合。菌丝在pH值5.5~7.5范围内均能生长,pH值6.0时生长最快,长势最好。菌丝在21~29℃范围内均能生长,25℃时生长最快。冬菇菌丝在棉籽壳、木屑培养基中的满袋时间分别为40、44 d,冬菇产量分别为1.47、1.15 kg,生物学效率分别为49.06%、38.33%。[结论]冬菇菌丝生长的最适pH值为6.0,最适温度为25℃,人工栽培的最适培养基是棉籽壳培养基。