奶山羊非手术采胚和移胚技术的研究

将蘸有２％盐酸丁卡因溶液的纱布块填塞在奶山羊子宫颈外口处松弛子宫颈，用自制的采胚管和移胚管进行非手术采胚和移胚。８只超排羊中有６只采出胚胎，采胚成功率为７５％（６／８），采胚率为３５．８（２４／６７），头均采胚４．００±３．４１枚（１～１０）。非手术移植２只受体羊，有１只怀孕。     

奶山羊非手术采胚和移胚技术的研究

将蘸有２％盐酸丁卡因溶液的纱布块填塞在奶山羊子宫颈外口处松弛子宫颈，用自制的采胚管和移胚管进行非手术采胚和移胚。８只超排羊中有６只采出胚胎，采胚成功率为７５％（６／８），采胚率为３５．８（２４／６７），头均采胚４．００±３．４１枚（１￣１０）。非手术移植２只受体羊，有１只怀孕。     

化学培养液对小鼠原核胚体外发育的影响

本试验用０．１ｍＬ培养液在３７℃，５％ＣＯ２条件下培养昆明小鼠原核胚。结果表明，用ｍＳＯＦ和ＰＬ３培养小鼠原核胚，４－细胞发育率分别为１０％和７７％。以后停止发育；ＰＬ３和ＰＬ３培养小鼠原核胚，每２４ｈ换１次培养液，结果发育到桑椹胚和囊胚的百分离分别是２７．５％和３８．５％；用ｍＭＴＦ，ｍＭＴＦ＋２０ＡＡ，ｍＭＴＦ＋Ｎｏｎ＋Ｇｌｎ，ｍＭＴＦ＋Ｎｏｎ，ｍＭＴＦ＋Ｅｓｓ＋Ｇｌｎ培养小鼠原核胚，发育率分     

转人血清白蛋白基因小鼠胚胎的体外培养

探讨了获取受精卵的时间、显微注射和培养液等因素对显微注射胚胎体外发育的影响。结果表明：在注射HCG后24～26h和18～22h时获得的受精卵的囊胚率分别为45％和20％，二者差异显著；注射胚和非注射胚卵裂率差异显著(56／80 VS 74／76)，但显微注射对2-细胞以后阶段的发育没有显著影响；mWM1培养液和mWM2培养液都能有效克服受精卵体外发育阻断。mWM2培养液更支持早期转基因胚胎体外发育。     

组织切片法观察昆明白小鼠卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系①

本实验应用组织切片法探讨了体内正常生理条件下昆明白小鼠卵巢内卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系。初情期前小鼠注射孕马血清促性腺激素（PMSG）,48 h后注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）,于注射HCG后不同时间取出卵巢进行组织切片。注射HCG后1 h,卵丘细胞开始扩展,此时卵母细胞核膜完整,即未发生生发泡破裂（GVBD）;注射HCG后3 h,大部分(＞70%)大有腔卵泡中卵母细胞发生GVBD,此时卵丘处于2级扩展状态。卵丘完全扩展发生在注射HCG后9 h,而PB1的排出是从12　h开始的。结果表明在小鼠体内,卵丘开始扩展先于卵母细胞成熟,但卵母细胞成熟并不需要卵丘完全扩展;促性腺激素能促进卵泡发育及卵母细胞成熟,同时也具有促使卵泡退化的功能。     

小鼠卵母细胞去核时间对卵丘细胞核移植的影响

对超数排卵的小鼠分别在注射HCG后14~16,16~18,18~20和20~22h采小鼠卵母细胞用于核移植,观察小鼠卵母细胞的去核时间在体细胞核移植中的作用。结果显示,在注射hCG后14~16,16~18,18~20和20~22h,小鼠卵母细胞去核效率分别为80.09%(338/422),73.12%(283/387),55.02%(230/418)和48.74%(193/396);重构胚激活率分别为66.20%(190/287),75.43%(175/232),84.78%(156/184)和85.14%(126/148);重构胚的囊胚发育率分别为13.94%(40/287),7.33%(17/232),3.80%(7/184)和1.35%(2/148)。试验证实小鼠卵母细胞在注射hCG后14~16h进行去核较为适宜。     

金黄仓鼠超排程序的研究

本研究用PMSG和HCG对金黄仓鼠超数排卵程序进行了4因子3水平多重复的正文试验,得出最佳超排程序为:在发情周期的第1d和第4d19∶30(间隔72h)分别注射25IU的PMSG和HCG,注射HCG16h后手术冲卵,所得平均排卵数为58.58±9.27(n=19),比正交试验中的9个程序分别多排4.52～23.29个卵子。     

汉白猪同期发情和超数排卵的研究

猪发情周期第13～15d,肌注PGF_(2)和肌注FSH+PGF_(2)进行同期发情处理。两组分别于注射后57.23±12.15h(n=13)和62.06±11.95h(n=17)发情,同期化都在±1d内,两组间差异不显著。用FSH+PGF_(2)+hcG方法超数排卵,FSH总剂量分别为440和360IU。两组头均采卵数为35.00±28.02枚(n=4);而总剂量 200IU组仅为4.00±1.41枚(n=2)。未进行超数排卵处理,而是自然发情配种的,头均采卵数为6.88±4.02枚(n=8)。第一次配种后18～30h(26.33±4.04)采卵为原核期卵。     

供体细胞核对山羊重构胚发育能力的影响

选择不同品种的山羊交配所获的８细胞期至桑椹胚期的胚胎或重构胚发育至相同胚期的卵裂球，以ＬＲＨ注射后２６～２８ｈ回收的白山羊去核成熟卵作受体组建重构胚或再重构胚，经琼脂糖包埋，移入山羊输卵管内，培养５～６ｄ后观察发育状态。实验结果表明，杂种胚供核组建的重构胚和再重构胚发育能力明显优于纯种胚供核组建的重构胚和再重构胚，因此从细胞水平证明了杂种优势；母型ｍＲＮＡ对重构胚和再重构胚的发育起一定的调控作用。     

牛输卵管蛋白对小鼠原核胚体外发育的影响

本实验通过添加１～４ｍｇ／ｍｌ牛输卵管蛋白至ＴＣＭ－１９９培养液中，对小鼠原核胚进行体外培养，观察原核胚的分裂和发育情况。小鼠原核胚很少分裂，远低于对照组原核胚分裂和发育水平。牛输卵管蛋白对小鼠原核胚的发育起明显的抑制作用，同时这种抑制作用随牛输卵管蛋白浓度的降低．似乎有减轻的趋势，表明牛输卵管蛋白中，存在抑制小鼠胚胎分裂和发育的蛋白质，对小鼠原核胚的抑制作用具有剂量效应。     

周龄·初始注射时间对小鼠超数排卵的影响

[目的]探讨不同周龄、不同初始注射时间对小鼠超数排卵效果的影响。[方法]用10 IU PMSG+10 IU HCG间隔48 h处理C57BL/6J小鼠,收集并统计合子数。[结果]4周龄超排效果优于于8周龄,可达26.86枚∕只;4周龄C57BL/6J小鼠PMSG和HCG注射时间为12:00—13:00,超排后收集合子数可达30枚∕只以上,而且体外培养的发育状况良好。[结论]4周龄C57BL/6J小鼠适宜超数排卵;PMSG和HCG注射时间为12:00—13:00,超排效果相对理想。     

不同因素对牛卵母细胞胞质内精子注射效果的影响

采用胞质内精子注射法（ICSI）构建牛显微受精胚胎,探讨卵母细胞成熟培养时间、精子状态及精子操作液中聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浓度对牛卵母细胞胞质内显微受精（ICSI）卵体外发育的影响。结果显示：成熟培养20 h、24 h和28 h的卵母细胞用于ICSI时,ICSI卵的形态完整率分别为94.6%（175/185）、97.2%（173/178）和96.4%（189/196）（P〉0.05）;成熟培养24 h和28 h的卵母细胞,其ICSI卵的卵裂率（73.4%和70.9%）和囊胚发育率（31.8%和29.6%）显著高于成熟培养20 h的卵母细胞（61.1%和20.6%）（P〈0.05）。对成熟培养24 h的卵母细胞注射获能精子时,ICSI卵的卵裂率和囊胚发育率（72.7%和31.4%）高于未获能精子组（69.4%和29.3%）和不运动精子组（71.5%和30.4%）,但无统计学差异（P〉0.05）。采用含5%,10%和15%PVP的精子操作液处理获能精子后对成熟培养24 h的卵母细胞进行ICSI操作,PVP浓度为5%和10%时,ICSI卵的卵裂率（73.2%和66.9%）和囊胚发育率（32.7%和29.7%）差异不显著（P〉0.05）,但二者均显著高于15%PVP浓度组的卵裂率和囊胚发育率（51.0%和16.3%）（P〈0.01）。结论认为,选用获能精子,并使用含5%PVP的精子操作液进行处理,对成熟培养24 h的牛卵母细胞进行ICSI操作,有利于ICSI卵的体外发育。     

冷冻保护剂对延边黄牛体外受精卵的影响

对延边黄牛体外受精卵进行了毒性实验,结果表明,延边黄牛体外受精桑椹胚在0.5M海藻糖(7.6%)和0.5M蔗糖(3.2%)溶液中的存活率差异不显著,早期囊胚在0.5M海藻糖(58.3%)溶液中的存活率显著高于0.5M蔗糖(34.5%)组,在同一处理内早期囊胚的存活率显著高于桑椹胚(P<0.05).以0.5M海藻糖为基础液,分别用0.0(对照组),2.0,2.5,3.0,3.5M甘油处理延边黄牛体外受精早期囊胚,其存活率对照组与不同浓度甘油组之间差异均不显著.     

组织切片法观察昆明白小鼠卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系

三实验应用组织切片法探讨了体内正常生理条件下昆明白小鼠卵巢内卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系。初情期前小鼠注射孕马血清促性腺激素,４８ｈ后注射人绒毛膜促性腺激素,于注射ＨＣＧ后不同时间取出卵巢进行组织切片。注射ＨＣＧ后１ｈ,卵丘细胞开始扩展,此时卵母细胞核膜完整,即未发生生发泡破裂;注射ＨＣＧ后３ｈ,大部分大有腔卵泡中卵母细胞发生ＧＶＢＤ,此时卵丘处于２级扩展状态。卵丘完全扩展发生在注射ＨＣＧ后９ｈ,     

猪卵母细胞体外发育不同时期膜电位的研究

采用细胞内微电极记录方法，观察了猪卵母细胞体外发育不同时期膜电位的变化．卵母细胞在体外发育０ｈ膜电位为－８．９７±０．５ｍＶ；体外成熟发育１８ｈ膜电位为－４６．４０±１．７ｍＶ；２４ｈ膜电位为＋１０．６０±１．０ｍＶ；３６ｈ膜电位为＋２６．５０±１．０ｍＶ；５０ｈ膜电位为＋２６．４０±１．１ｍＶ；体外受精发育３０ｈ膜电位为－４０．５０±０．１ｍＶ．并据他人电镜观察结果，对卵母细胞体外发育不同时期膜电位与其代谢的关系进行了初步探讨，发现两者间具有显著的相关性．     

五指山小型猪同期发情和超数排卵方法的探讨

本试验用五指山小型猪进行同期发情和超数排卵技术的试验研究.将 2 5头小型猪母猪随机分为三组,每一组各采用一种超排处理方法,即Ⅰ组为PMSG +HCG法,Ⅱ组为PG/PMSG +HCG法,Ⅲ组为PG/PG +PMSG +HCG法.三种处理方法的同期发情率和超排有效率分别为:Ⅰ组 6 6 7%和 50 0 %,Ⅱ组 90 2 %和 6 6 7%,Ⅲ组为 10 0 %和 85 6 %.试验同时采用手术法观察母猪卵巢的黄体数做为确定超排成功与否的依据,并用输卵管冲卵法收集胚胎.三种处理方法获得胚胎检出率分别为:Ⅰ组 2 6 87%,Ⅱ组 50 76 %,Ⅲ组6 5 85%.试验结果表明,PG/PMSG +HCG组和PG/PG +PMSG +HCG组的超排效果显著好于PMSG +HCG处理组(P <0 0 1,P <0 0 5)     

黑尾近红鲌人工繁殖及胚胎发育的研究

对人工驯化的黑尾近红鲌Anoherythroculter nigrocauda进行人工药物催情、产卵和孵化,并连续观察其胚胎发育全过程。结果表明：用激素PG＋HCG＋LRH-A2、HCG＋LRH-A2＋DOM、PG＋LRH-A2＋DOM、HCG＋LRH-A2组合催产,催产率均为100%,受精率为72.4%~97.9%,孵化率为63.8%~80.4%。黑尾近红鲌的胚胎发育时序和特征与斑马鱼Danio rerio相似,可分为7个时期。受精卵为黏性,呈淡黄色,圆形,直径为（0.94±0.05）mm。在水温为23.4~25.3℃条件下,受精卵经过25 min开始胚胎发育,45 min进入2细胞期,5 h 15 min进入囊胚期,7 h 25 min进入原肠期,10 h 15 min进入神经胚期,50 h 50%以上的仔鱼孵出。刚出膜的仔鱼体长为（4.10±0.02）mm。     

管道连续清洗工艺及专用清洗器的设计

在管道清洗技术中，清洗工艺及清洗器的正确设计是清洗工作的关键，通过实验研究，开发出了具有较高清洗效率的连续清洗工艺及专用清洗器，介绍了连续清洗工艺的特点及流程，这种清洗过程为事宜上刷具的清洗器夹带化学药液在管道内反复运行，专用清洗器遇到卡管后，逆向退出。在对专用清洗器的设计研究中，通过对其力学模型的建立及受力分析，给出了专用清洗器的设计理论依据，确定了组装圆盘式橡胶柱塞携带刷具的设计方案。简单介绍     

发情间期注射PMSG对猪卵泡发育及颗粒细胞凋亡影响的研究

为探讨孕马血清促性腺激素 (PMSG)对猪卵泡发育和闭锁及颗粒细胞凋亡的影响 ,实验采用性成熟肥育母猪为实验材料 ,对在情期第 11d(发情当日为 0 d)注射 PMSG后 2 4 ,4 8,72和 96 h的猪卵巢表面各类卵泡数量、颗粒细胞凋亡比例以及外周血浆中类固醇激素浓度等进行了研究。结果表明 ,注射 PMSG后 2 4 h卵巢表面卵泡总数、小卵泡 (直径 <3mm)数和中等卵泡 (直径 3～ 5 m m)数分别为 :5 9,32和 2 5 .5个 /卵巢 ,明显多于同期对照组 (情期第 12 d)猪的数量 ;注射 PMSG72和 96 h卵巢表面大卵泡 (直径≥ 5 m m)数量分别为 7和 6个 /卵巢 ,明显多于对照组 (情期第 14和第 15 d) ,而此时卵汇总数却明显低于对照组。大卵泡颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后与对照组相比无显著差异 ,而小卵泡和中等卵泡的颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后 2 4 h(6 .4 %和 7.8% )显著 (P<0 .0 5 )降低 ;中等卵泡颗粒细胞凋亡比例到 PMSG后 72 h回升至与对照组无显著差异 ,小卵泡颗粒细胞凋亡比例于 PMSG后 96 h回升至与对照组无显著差异。血清中雌二醇浓度在 PMSG注射后明显升高 ,在 PMSG注射后72 h时达最高值 (72 .3pg· m L- 1 ) ,显著高于对照组 (10 .8pg· m L- 1 )。孕酮的浓度在 PMSG注射后无明显变化。以上结果表明 ,在体内条     

不同激素组合对山东白山羊同期发情的比较研究

以山东白山羊为研究对象,应用国产的孕酮阴道海绵栓,结合PMSG/FSH、PG和HCG,将78头受体羊随机分为4组进行同期发情及卵巢排卵研究。结果显示:放栓15 d,同时在去栓前3 d肌注400 IU/只PMSG和去栓前1 d肌注0.1 mg/只PG,鉴定发情后再肌注100 IU/只HCG处理方案效果最好,发情率为84.21%,黄体形成率为75%。同时手术检查卵巢卵泡和黄体形成情况,处理方案中放栓15 d+PMSG+PG+HCG组卵巢上均有多个排卵黄体,并且排卵窝比较明显。该研究所优化的方案为获得高质量的转基因胚胎移植受体羊提供了技术支持。