日粮中添加硒对山羊瘤胃消化代谢的影响

在基础日粮中添加Ｎａ２ＳｅＯ３饲喂装有永久性瘤胃瘘管的河南本地空怀母山羊６０ｄ，结果表明，添加硒不仅不影响瘤胃液ＰＨ值，还能显著提高瘤胃液三氯醋酸沉淀蛋白和细菌蛋白含量；使瘤胃液原虫蛋白和氨氮浓度有升高趋势。能提高瘤胃发酵水平。改变瘤胃发酵类型，降低乙酸百分比，使丙酸显著增加，使瘤胃发酵趋于丙酸型；添加硒能显著提高血清总蛋白含量，降低血清尿素氮，显著提高山羊日增重。     

用荧光染色法研究山羊瘤胃原虫对细菌吞噬速率的初报

 【目的】采用荧光染色标记细菌（fluorescence labeled bacteria,FLB）技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧光全标组（WFLB）及未清洗原虫保留瘤胃自由细菌荧光标记组（FLB）。【结果】WFLB组和FLB组的吞噬速率分别为398.4 cells/(cell•h)和230.4 cells/(cell•h),换算为细菌N为：2.15 pg N/(cell•h)/和1.24 pg N/(cell•h)。【结论】每天每头羊由原虫在瘤胃内循环中带出的细菌N损失在WFLB组和FLB组分别估计为103.2 mg N/(d•头)、59.5 mg N/(d•头),或者细菌蛋白损失为0.645 g/(d•头)和0.372 g/(d•头)。结果同时表明,荧光染色标记技术可以应用于瘤胃原虫对细菌吞噬速率的研究。     

体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响

【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记瘤胃细菌法进行原虫吞噬细菌试验。【结果】原虫密度以对照组最高,显著高于A、B、C组(P0.05);细菌密度以B组最高,为4.906×109cells·mL-1,显著高于对照组(P0.05);原虫蛋白在组间差异不显著(P0.05),细菌蛋白组以B组最高,B、C、D均高于对照组(P0.05)。各组原虫的吞噬速率分别为:267.6(对照组)、196.2(A组)、244.4(B组)、274.4(C组)、285.4(D组)cells/(cell·h),组间差异显著(P0.05)。吞噬细菌N的速率分别为1.445、1.059、0.320、1.482、1.541pgN·(cell·h)-1。【结论】估算每天每头山羊细菌蛋白循环量分别为121.64(对照组)、56.64(A组)、78.39(B组)、87.04(C组)和95.06(D组)mg蛋白·(d·头)-1,B组较低,仅为对照组的64.45%,且该组微生物量最大。在本试验的基础上认为4%的豆油对微循环的调控效应最好。     

茶皂素和丝兰皂苷对山羊人工瘤胃发酵和瘤胃微生物的影响

 【目的】研究利用茶皂素和丝兰皂苷混合物对瘤胃发酵和瘤胃内纤维降解菌变化的影响。【方法】采用2×4因子体外培养试验设计,因子一为对照组（不添加皂苷）和添加皂苷组（添加0.3%茶皂素和0.03%丝兰皂苷的混合物）,因子二为不同精粗比水平（20﹕80、40﹕60、50﹕50及60﹕40）,研究不同精粗比以及皂苷条件下对瘤胃发酵和瘤胃微生物的影响。【结果】茶皂素和丝兰皂苷的混合物能降低瘤胃pH,且精粗比为20﹕80时差异极显著（P＜0.01）;能够增加乙酸、丙酸、丁酸以及TVFA的浓度,但从各成分所占比例来看,茶皂素和丝兰皂苷混合物的添加降低了乙酸和丁酸的摩尔百分比例,增加了丙酸的摩尔百分比例,因此降低了乙酸/丙酸;能够降低原虫真蛋白产量而细菌真蛋白产量提高,细菌与原虫的比值提高且差异极显著（P＜0.01）。同一精粗比条件下,添加皂苷组产琥珀酸拟杆菌的相对数量均比非添加组高,除精粗比为20﹕80时差异不显著外（P＞0.05）,其它精粗比状态下差异极显著（P＜0.01）;除精粗比为40﹕60时外,其它精粗比状态下添加皂苷组白色瘤胃球菌和黄化瘤胃球菌的相对数量均比非添加组高。【结论】添加皂苷有降低瘤胃液中原虫总数和pH的趋势,并能够降低原虫真蛋白产量而提高细菌真蛋白产量。茶皂素和丝兰皂苷混合物对瘤胃发酵模式和瘤胃内纤维降解菌变化有一定影响,其作用效果受培养底物精粗比的显著影响。     

日粮精粗比对山羊瘤胃内微生物蛋白微循环的影响

 【目的】以4只装有瘤胃瘘管的山羊为试验动物,研究不同精粗比日粮对山羊瘤胃微生态中原虫和细菌区系以及微生物蛋白微循环的影响规律。【方法】试验设精（玉米-豆饼）粗（稻草）比分别为10﹕90、30﹕70、50﹕50和70﹕30的4种日粮（A、B、C、D）,采用4×4拉丁方设计进行饲喂试验,采用荧光染色细菌技术测定瘤胃原虫对细菌的吞噬速率。【结果】日粮精粗比显著影响微生物细胞的密度。原虫密度C组最高;细菌和原虫的密度A组最低;日粮精粗比显著影响原虫吞噬的速率,A、B、C、D 4组的吞噬速率分别为：429.5、366.74、389.48、402.2 cells?cell-1?h-1,换算为对细菌N的吞噬速率分别为：2.319、1.98、2.103、2.172 pg N?cell-1?h-1。【结论】每天每头羊由于原虫的吞噬而造成的细菌N的循环损失估算分别为：136.49;369.02;485.99;440.56 mgN/（d?头）,即菌体蛋白损失为0.853、2.306、3.370和2.754 g/（d?头）,其中以C组菌体蛋白循环损失量最大,细菌周转率最高（3.07%）。     

人工瘤胃评价屎肠球菌对瘤胃发酵的影响

【目的】探讨屎肠球菌对瘤胃发酵的影响,以此评价屎肠球菌能否作为直接饲用微生物用于反刍动物的生产。【方法】利用持续动态人工瘤胃装置,采用完全随机试验设计,以不添加屎肠球菌发酵液为对照,研究了添加1.25×106和6.25×106mL-1屎肠球菌发酵液对瘤胃液pH、微生物蛋白(MCP)、氨态氮(NH3-N)、乙酸、丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度的影响。【结果】添加屎肠球菌对瘤胃pH值和MCP无显著影响(P>0.05),但能显著提高瘤胃NH3-N浓度(P<0.01);与对照组相比,1.25×106mL-1屎肠球菌液添加组显著提高了瘤胃液的乙酸与总挥发性脂肪酸浓度(P<0.05),而添加屎肠球菌对瘤胃丙酸和丁酸浓度及乙酸与丙酸的比例没有显著影响(P>0.05)。【结论】添加一定量的屎肠球菌,可在不改变瘤胃发酵类型的情况下促进饲料中碳水化合物的消化。     

产气法评价纳豆芽孢杆菌对瘤胃液体外发酵的影响

【目的】评价纳豆芽孢杆菌对瘤胃液体外发酵的影响。【方法】采用瘤胃液体外发酵产气法,以不添加纳豆芽孢杆菌为对照,动态观测基础日粮中纳豆芽孢杆菌添加量分别为1.5×108/g(处理Ⅰ)和7.5×108/g(处理Ⅱ)对瘤胃液体外发酵产气量、pH值、NH3-N质量浓度和各挥发性脂肪酸浓度的影响。【结果】与对照相比,处理Ⅱ产气量提高了11.89%(P<0.05),瘤胃pH值显著降低(P<0.05),NH3-N质量浓度提高了16.07%(P<0.05),乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸浓度分别提高了10.43%,50.35%和20.70%(P<0.05);处理Ⅰ除丙酸浓度显著高于对照(P<0.05)外,其他各指标均与对照无明显差异(P>0.05)。【结论】纳豆芽孢杆菌培养物在基础日粮中的添加量为7.5×108/g时,能促进瘤胃液对饲料底物的降解代谢。     

硫、钴对补饲尿素山羊瘤胃消化代谢的影响

用6只装有永久性瘤胃瘘管的本地空怀母山羊进行了三期试验。试验结果表明:基础日粮中添加硫或硫加钴均可提高瘤胃液PH,而只添加钴对PH无显著影响(P>0.05)。基础日粮中添加硫或钴,特别是钴,促进了瘤胃中氨的利用;增强了瘤胃中微生物合成蛋白质的能力。基础日粮中添加硫,降低了瘤胃中总挥发性脂肪酸(TVFA)的浓度,添加钴对总挥发性脂肪酸浓度无显著影响(P>0.05)。与T_1相比,T_2趋向于丙酸型发酵;T_3和T_4趋向于乙酸型发酵。四种日粮条件下,丁酸百分率无显著变化(P>0.05)。基础日粮中添加硫或钴均可提高瘤胃细菌蛋白的含量,而对瘤胃原虫蛋白含量无显著影响(P>0.05)。在山羊对尿素的利用方面,硫和钴对瘤胃内PH,氨氮浓度,三氯乙酸沉淀蛋白(TCA-P)含量,挥发性脂肪酸(VFA),细菌和原虫蛋白的影响无协同作用。     

日粮添加钛对山羊瘤胃消化代谢的影响

试验分２个系列研究了日粮中添加铁对山羊瘤胃消化代谢及日增重的影响。系列Ⅰ体内试验结果表明，日粮添加钛不影响瘤胃液ｐＨ值；试验期与对照期相比，瘤胃液氨氮浓度明显升高（Ｐ＜０．０５）；瘤胃液三氯醋酸沉淀蛋白、细菌蛋白及原虫蛋白的含量均显著提高（Ｐ＜０；０５）；添加钦后瘤胃液总挥发性脂肪酸增加，乙酸、丁酸降低，但差异均不显著（Ｐ＞０．０５），而丙酸显著增加（Ｐ＜０．０５），乙酸／丙酸值从对照期的３．１５降至试验期的２．３３（Ｐ＜０．０５），说明添加钛使瘤胃发酵类型趋于丙酸型。添加钛使血清尿素氮明显降低（Ｐ＜０．０５），但对血清总蛋白含量、血糖水平无明显影响（Ｐ＞０．０５）。添加钛能显著提高山羊日增重（Ｐ＜０．０５）。系列Ⅱ体外培养试验结果表明添加钛后人工瘤胃中细菌蛋白、原虫蛋白、氨氮浓度以及挥发性脂肪酸含量等项指标与系列Ⅰ体内试验结果基本一致。     

日粮添加豆油和胡麻油对肉牛瘤胃发酵及主要微生物数量的影响

 【目的】评价日粮添加植物油对瘤胃发酵和瘤胃微生物区系的影响。【方法】采用3×3拉丁方设计，用3头装有永久性瘤胃瘘管的杂交肉牛研究不添加油脂（对照组）、添加4％豆油（豆油组）或4％胡麻油（胡麻油组）对瘤胃pH值、NH3-N浓度、VFA以及瘤胃细菌和原虫的影响。3组日粮精粗比均为35﹕65，每期试验为21d，共3期。【结果】添加油脂对瘤胃内pH值没有影响(P＞0.05)；对照组和胡麻油组瘤胃NH3-N浓度显著高于豆油组(P＜0.05)；与对照组相比，豆油组和胡麻油组显著降低了瘤胃乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性酸浓度以及总细菌、蛋白分解菌、纤维分解菌及原虫的数量(P＜0.05)，但对乙酸与丙酸比例以及淀粉分解菌数量两个指标组间无显著差异(P＞0.05)。对照组、豆油组和胡麻油组纤维分解菌和原虫的数量依次分别为6.79×108、5.71×108、5.92×108；10.67×104、7.11×104、9.56×104 CFU•ml-1；两个加油组显著降低了瘤胃纤维分解菌和原虫数(P＜0.05)。【结论】日粮添加4％豆油和胡麻油对瘤胃发酵及主要微生物都有一定的抑制效应，但二者抑制效应大小无显著差异。     

徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构研究

 【目的】研究以稻草为主的日粮条件下徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构。【方法】以4只安装瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,PCR扩增瘤胃细菌16S rDNA序列,利用分子克隆与测序分析、细胞计数等技术,解析瘤胃细菌和原虫群体的类群组成。【结果】获得的细菌克隆基本归为两簇：与瘤胃球菌R.bromii YE282相似性为95%的XHGR1、与瘤胃R-7菌相似性为98%的XHGR3,XHGR2位于另立的R. flavefaciens簇。瘤胃球菌属细菌占细菌克隆总数的比例较高（33.33%）,原虫生物量略低于细菌,占瘤胃生物总量的44.83%。群体主要有内毛属、双毛亚科、前毛属、头毛属和等毛科等原虫,其中内毛属原虫比例最高为74.25%。【结论】以稻草为主的日粮条件下,徐淮白山羊瘤胃中细菌和原虫生物量相近,瘤胃球菌属细菌和内毛属原虫分别是瘤胃细菌和原虫区系的优势类群。     

瘤胃微生物不同区系的硝态氮还原、甲烷产生和发酵参数比较

【目的】以硝态氮为惟一氮源,评价体外培养瘤胃微生物不同区系还原硝酸盐的程度以及对甲烷产生和发酵参数的影响。【方法】采用Menke人工瘤胃产气法进行24h厌氧发酵,以硝酸钠、可溶性淀粉和微晶纤维素组成纯合日粮,用物理离心和化学抑制剂相结合的方法,将瘤胃液分成8种区系:全瘤胃液(WRF)、原虫(P)、细菌(B)、真菌(F)、原虫+细菌(P+B)、原虫+真菌(P+F)、细菌+真菌(B+F)和负对照(CTN),测定微生物硝酸盐降解率及发酵参数。【结果】P区系硝酸盐降解率显著高于B区系(P0.001),P+F及B+F区系硝酸盐降解率低;WRF产气量和硝酸盐降解率最高,P+B和P区系次之,这3个区系的甲烷(CH4)、总挥发酸(TVFA)含量和乙酸比例均高于其它区系(P0.001);硝酸盐的还原有利于微生物蛋白的合成,P+B区系的合成量最高。【结论】瘤胃原虫(P)和细菌(B)区系具有高还原硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-)能力,原虫区系的硝态氮还原能力更强;真菌(F)区系培养于此发酵底物中,还原硝酸盐的能力很弱,几乎可以忽略。瘤胃原虫和细菌区系是硝态氮还原、产甲烷和微生物蛋白合成的主要区系。     

日粮添加肉桂醛对奶牛公犊生长、健康及瘤胃发酵性能的影响

【目的】在犊牛开食料中添加肉桂醛,研究其对早期奶牛公犊生长性能、健康、瘤胃发酵及微生物区系的影响,为肉桂醛在早期犊牛的培育应用提供理论依据。【方法】试验选24头出生2周龄、体重相接近,健康状况良好的荷斯坦奶牛公犊,分为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复4头,对照组饲喂基础开食料,试验组在开食料中添加0.3%含油率为15%的包被肉桂醛。哺乳期预饲期6 d,正饲期27 d,两组饲喂等量牛奶,开食料及燕麦草自由采食,断奶日通过胃管采集瘤胃液;断奶后全部动物按照相同饲养管理方式继续饲喂51 d,试验末通过胃管采集瘤胃液。试验期的两个阶段均测定奶牛公犊采食量,生长性能、体尺指标、粪便评分和瘤胃挥发性脂肪酸指标,并基于16SrDNA基因高通量测序法对奶牛公犊瘤胃细菌区系测定分析。【结果】1)在采食量和生长性能方面,犊牛哺乳阶段、断奶后以及试验全期,试验组的平均日增重、干物质采食量、料重比等指标与对照组差异不显著(P>0.05),试验组与对照组在体尺指标中各阶段差异不显著(P>0.05);2)在犊牛健康方面,试验组犊牛腹泻率均低于对照组,但与对照组腹泻率差异不显著(P>0.05);3)在瘤胃发酵指标方面,断奶日试验组各挥发性脂肪酸的含量均低于对照组,但差异不显著(P>0.05);试验末试验组乙酸、丙酸、丁酸、戊酸和总挥发性脂肪酸极显著高于对照组（P<0.01）;4) 试验末,肉桂醛显著提高了瘤胃香农多样性指数,降低了辛普森指数;在门水平上降低了Bacteroidetes菌群丰度,提高了Firmicutes和Actinobacteria丰度;在属水平上仅提高了Prevotella丰度。【结论】通过开食料对犊牛补饲0.3%含油率为15%的包被肉桂醛对哺乳期及断奶后的生长性能没有影响,但降低了腹泻率,显著提高了断奶犊牛瘤胃挥发性脂肪酸浓度并降低了乙酸/丙酸比例,提高了瘤胃细菌菌群多样性和Firmicutes和Prevotella菌丰度,表明日粮中添加0.3%的包被肉桂醛对犊牛生长性能无负作用,但可改变瘤胃微生物区系并调控瘤胃发酵模式。     

硝态氮添加水平对体外瘤胃发酵和微生物合成效率的影响

【目的】本试验旨在探明日粮硝态氮含量对反刍动物瘤胃发酵参数以及微生物合成效率的影响。【方法】配合硝态氮添加水平分别为0、6%、12%、18%、24%和30%的处理日粮,进行双外流连续培养体外发酵,试验期144h。【结果】日粮硝态氮添加水平不影响瘤胃pH值、总挥发酸浓度(P0.05);随日粮硝态氮添加水平的提高,丙酸摩尔比例上升(Q,P0.01),乙酸摩尔比例(Q,P0.01)和NH3-N浓度(L,P0.01)下降,干物质、有机物和粗蛋白消化率提高(Q,P0.01)和微生物合成效率(MOEEF)呈二次曲线规律变化(Q,P0.01)。【结论】硝态氮能被瘤胃微生物所利用。随日粮硝态氮添加水平的提高,瘤胃发酵参数、养分消化率和MOEEF均有不同程度的改变,其中在12%—18%添加水平范围内,MOEFF和瘤胃发酵程度最大,超过此水平有不利影响。     

日粮不同NFC/NDF比对山羊瘤胃发酵与瘤胃微生物区系结构的影响

【目的】探讨日粮中非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维（NFC/NDF）比对山羊瘤胃发酵、瘤胃细菌与瘤胃产乳酸菌菌群结构组成,以及瘤胃产乳酸菌、总细菌与大肠杆菌数量的影响。【方法】试验选用4只装有永久性瘤胃瘘管、健康阉割的长江珠三角白山羊,采用自身对照试验设计,共分3期进行,每期15 d,依次饲喂 NFC/NDF比值分别为0.42（Ⅰ期）、1.04（Ⅱ期）、2.73（Ⅲ期）的3期日粮,分别于第13、14和15天采集瘤胃内容物。采用PCR/DGGE（denaturing gradient gel electrophoresis）分析瘤胃微生物区系结构,采用real-time PCR定量瘤胃内容物中总菌、乳酸杆菌、牛链球菌与大肠杆菌数量。【结果】随日粮中NFC/NDF比值提高,瘤胃pH显著降低（P＜0.05）;瘤胃液中乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸和总挥发性脂肪酸（total violate fatty acid,TVFA）浓度均显著增加（P＜0.05）,而乙酸与丙酸比显著降低（P＜0.05）;DGGE图谱分析表明,来自NFC/NDF比值不同的瘤胃样品分别聚成一族;real-time PCR测定表明,随NFC/NDF比值提高,乳酸杆菌数量显著增加（P＜0.05）,总细菌数量显著下降（P＜0.05）,牛链球菌及大肠杆菌数量未发生显著变化（P＞0.05）。【结论】瘤胃发酵模式受日粮NFC/NDF比值的影响,随NFC/NDF比值增加,瘤胃发酵从乙酸型发酵转向丙酸型发酵;同时,瘤胃微生物区系组成发生改变,瘤胃细菌总量下降。     

不同碳水化合物结构日粮对山羊瘤胃发酵和 微生物氨基酸组成的影响

 【目的】研究日粮中不同碳水化合物结构对山羊瘤胃发酵和微生物氨基酸组成的影响,为回答“瘤胃微生物的氨基酸组成是否恒定？”这一国际学术界仍有争论的问题提供理论依据。【方法】选用4头装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采用4×4拉丁方试验设计,以玉米、豆粕、稻草为基础日粮,研究不同非结构性碳水化合物与结构性碳水化合物之比(NSC/SC)处理(A：0.33、B：0.63、C：1.17及D：2.18)对pH、NH3-N、VFA浓度及瘤胃微生物氨基酸组成的影响。【结果】随着日粮中NSC/SC的升高,瘤胃pH显著降低(P＜0.05),NH3-N浓度显著升高(P＜0.05),乙酸的摩尔百分比和乙酸/丙酸的比值随日粮中NSC/SC的升高而显著降低(P＜0.05)。不同NSC/SC的日粮下的细菌氨基酸含量中,天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸含量都存在显著差异或极显著差异(P＜0.05),原虫氨基酸中天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸产生了显著变化(P＜0.05)。【结论】瘤胃微生物氨基酸组成会受到日粮中NSC/SC比例的影响。     

添喂甲硝唑对绵羊瘤胃微生物区系和消化代谢的影响

选取4只1.5～2.0岁龄、体重约40 kg,安装了永久性瘤胃瘘管的健康小尾寒羊公羊,采用4×4拉丁方设计,在精粗比为50∶50的日粮条件下,研究添喂甲硝唑对绵羊瘤胃微生物区系和消化代谢的影响。结果表明,在日粮中添喂0.00,0.05,0.10,0.20 g/kg甲硝唑时,3组试验组的绵羊瘤胃液原虫总数分别比对照组减少了30.3%（P〈0.01）,50.0%（P〈0.01）,59.6%（P〈0.01）;细菌总数分别比对照组增加了45.7%（P〈0.01）,55.4%（P〈0.01）,65.8%（P〈0.01）;瘤胃真菌DNA拷贝数分别比对照组增加了27.6%（P〈0.05）,34.0%（P〈0.05）,36.0%（P〈0.05）;瘤胃液氨态氮浓度分别比对照组降低了6.8%（P〈0.01）,16.5%（P〈0.01）,18.6%（P〈0.01）;总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸和丁酸均有增加趋势。日粮中添加甲硝唑0.05,0.10,0.20 g/kg组干物质采食量与对照组比分别增加了6.6%（P〈0.01）,12.2%（P〈0.01）,7.8%（P〈0.01）;干物质消化量分别增加了7.8%,17.7%,2.7%;有机物消化量分别增加了7.6%（P〈0.05）,17.4%（P〈0.01）,3.5%（P〉0.05）;粗蛋白消化量分别增加了13.4%（P〈0.01）,25.3%（P〈0.01）,11.2%（P〈0.01）;氮保留量比对照分别增加了13.1%（P〈0.05）,21.0%（P〈0.01）,10.9%（P〈0.05）。给绵羊添喂一定剂量的甲硝唑,可增加绵羊的自由采食量,其日粮的消化率呈增加趋势,并可使瘤胃液原虫数量减少,细菌总数和真菌数增加,氨态氮浓度降低,增加绵羊的氮保留。