人工瘤胃评价屎肠球菌对瘤胃发酵的影响

【目的】探讨屎肠球菌对瘤胃发酵的影响,以此评价屎肠球菌能否作为直接饲用微生物用于反刍动物的生产。【方法】利用持续动态人工瘤胃装置,采用完全随机试验设计,以不添加屎肠球菌发酵液为对照,研究了添加1.25×106和6.25×106mL-1屎肠球菌发酵液对瘤胃液pH、微生物蛋白(MCP)、氨态氮(NH3-N)、乙酸、丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度的影响。【结果】添加屎肠球菌对瘤胃pH值和MCP无显著影响(P>0.05),但能显著提高瘤胃NH3-N浓度(P<0.01);与对照组相比,1.25×106mL-1屎肠球菌液添加组显著提高了瘤胃液的乙酸与总挥发性脂肪酸浓度(P<0.05),而添加屎肠球菌对瘤胃丙酸和丁酸浓度及乙酸与丙酸的比例没有显著影响(P>0.05)。【结论】添加一定量的屎肠球菌,可在不改变瘤胃发酵类型的情况下促进饲料中碳水化合物的消化。     

四株纳豆枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定及其对瘤胃发酵的影响

采用酪蛋白平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板初筛法、菌落形态和16SrRNA序列比对分别从无菌大豆(DD)、接种稻草的大豆(DC)、市售纳豆(ND)以及实验室储存菌株纳豆枯草芽孢杆菌NY-3(NY)中分离、筛选、鉴定出4株产蛋白酶和纤维素酶活性较高的纳豆枯草芽孢杆菌;通过体外批次发酵试验,向日粮底物中添加1.5×1011cfu筛选出的四株菌,取0h和24h的瘤胃液样测定各个发酵参数.结果表明:与对照组相比,添加纳豆枯草芽孢杆菌(DC组、DD组、ND组、NY组)并不影响瘤胃液pH值(P=0.883),但显著提高瘤胃液中NH3-N值(P0.05)和挥发性脂肪酸(VFA)各成分的浓度(P0.05);与对照组相比,DC组的乙酸/丙酸差异不显著(P0.05),但是DD、ND组和NY组均有显著降低(P0.05).     

甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵参数的影响

采用人工瘤胃体外发酵方法对培养液中甜菜碱盐酸盐不同质量浓度(0、16.7和33.4 mg.L-1)下,各时间段(3、6、12、18和24 h)的体外产气量、pH值、干物质降解率、氨态氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)、乳酸和菌体蛋白含量的测定,探讨甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵功能的影响。结果显示:培养液中甜菜碱盐酸盐的质量浓度为33.4 mg.L-1时,瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸、总VFA的浓度显著升高(P<0.01),干物质降解率显著提高(P<0.01),乳酸浓度显著降低(P<0.05);而甜菜碱盐酸盐对瘤胃液pH值、产气量、菌体蛋白含量、NH3-N浓度无显著影响。结论:甜菜碱盐酸盐可改善人工瘤胃发酵性能。     

不同水平大豆寡糖(SBOS)对生长绵羊瘤胃发酵的影响

采用体外批次培养法,研究在日粮中添加不同水平SBOS对绵羊瘤胃发酵功能的影响。SBOS的添加水平分别为基础日粮的0,0.4%,0.8%,1.2%,1.6%和2.0%等6个水平,即1个对照组(0水平组)5个试验组,每个组3个重复。结果表明:体外培养24 h,日粮中添加SBOS可以增加瘤胃液NH3-N、丙酸及总VFA、MCP浓度,提高培养底物NDF降解率,降低瘤胃液pH值、乙/丙比值,对瘤胃产气量、瘤胃液乙酸、丁酸浓度影响不显著。应用综合评定指标(MFAEI)对产气量、pH、MCP浓度、总VFA浓度、NH3-N浓度和NDF含量进行综合评定,得出添加量为1.2%的SBOS更有利于调控瘤胃发酵。     

粗饲料颗粒替代玉米青贮对肉牛瘤胃发酵及微生物菌群的影响

【目的】研究粗饲料颗粒对肉牛瘤胃发酵及瘤胃菌群结构的影响.【方法】选择20头18月龄、体质量相近的西门塔尔杂种公牛(西门塔尔牛♂×本地黄牛♀),随机分为4组,试验组1、2和3的粗饲料分别以粗饲料颗粒(50%玉米秸秆+50%苜蓿干草)替代20%、50%和80%的全株玉米青贮,对照组粗饲料全部为全株玉米青贮,育肥120天屠宰后,采集4组肉牛瘤胃液,测定瘤胃发酵参数,运用16S rDNA高通量测序分析试验组3和对照组的瘤胃菌群多样性.【结果】粗饲料颗粒替代部分全贮玉米青贮饲喂肉牛,瘤胃总挥发性脂肪酸无显著变化,NH_3-N浓度、乙酸比例和乙酸/丙酸比值显著降低(P0.05)而丙酸比例显著增加(P0.05);粗饲料颗粒替代80%全株玉米青贮,瘤胃菌群中检测到共有操作分类单位(OTUs)802个,对照组和试验组3肉牛瘤胃特有OTUs分别为359个和312个,瘤胃液菌群相对丰度和多样性无显著变化;2组肉牛瘤胃液中相对丰度占82%以上的优势菌群门类为拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes),普雷沃氏菌属(Prevotella)为优势菌属.【结论】粗饲料颗粒替代部分全株玉米青贮,降低了瘤胃液NH_3-N浓度、乙酸比例及乙酸/丙酸比值,提高了丙酸比例,对瘤胃液总VFA浓度、菌群丰度和多样性无显著影响.     

高精料条件下延胡索酸对山羊瘤胃微生物体外发酵的影响

通过山羊瘤胃液的体外批次培养,研究延胡索酸对瘤胃混合细菌体外发酵的影响。瘤胃液在含底物(玉米粉、豆粕和黑麦草)和延胡索酸(0、4、8和12 mmol.L-1)条件下发酵24 h。结果表明,在整个发酵期内,不同浓度的延胡索酸均显著提高了累积产气量,同时显著影响总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度及其组成,降低乙酸的浓度及比例,增加丙酸的浓度及比例。其中4 mmol.L-1延胡索酸在12~24 h提高了TVFA浓度和丙酸浓度(P<0.05),8 mmol.L-1组和12 mmol.L-1组的TVFA浓度和丙酸浓度在16 h和24 h也有显著提高(P<0.05)。在12、16、20和24 h时,3个添加组乙酸比例均显著低于对照组(P<0.05),而丙酸比例则明显提高(P<0.01),乙酸和丙酸的比值显著降低(P<0.05)。4 mmol.L-1延胡索酸添加组的乳酸浓度在12、16、20和24 h均极显著低于对照组(P<0.01)。结果提示,延胡索酸能显著提高瘤胃微生物体外发酵液中TVFA及丙酸比例,其中4 mmol.L-1延胡索酸对于调控瘤胃微生物体外发酵效果最佳。     

苏子油对瘤胃体外发酵模式、脂肪酸组成及甲烷生成的影响

为探讨苏子油对瘤胃体外发酵的影响,采用人工瘤胃技术分析不同添加水平的苏子油对瘤胃发酵模式、发酵参数和瘤胃脂肪酸代谢的影响.结果表明:添加不同剂量苏子油对发酵液pH值和氨氮(NH3-N)含量无显著影响(P0.05);与对照相比较,随着苏子油添加量的增加干物质降解率、中性洗涤纤维降解率、酸性洗涤纤维降解率、发酵底物单位产气量显著降低(P0.05),甲烷产量呈下降趋势(P0.05);对TVFA无显著影响(P0.05),丙酸含量显著增加(P0.05),乙酸含量和乙酸丙酸比例显著降低(P0.05);C18:1、c9,t11-CLA和总的长链脂肪酸浓度均明显升高(P0.01).表明在粮中添加一定量的苏子油,可改变瘤胃发酵类型、降低甲烷产量、调节瘤胃液脂肪酸组成.     

不同氮源日粮中添加烟酸对绵羊瘤胃发酵的影响

【目的】研究3种不同氮源日粮中添加烟酸对绵羊瘤胃发酵的影响,为生产实践提供理论依据。【方法】将9只装有永久性瘤胃瘘管的绵羊随机分为3组,每组3只,分别饲喂豆粕、麻饼和尿素-麻饼型基础日粮。通过体外培养法研究添加一定量烟酸后,3种不同氮源日粮在培养0,0.5,1,2,4,8,12,16,20,22h后,培养液中NH3-N和细菌N质量浓度、原虫数、总挥发性脂肪酸(VFA)及乙酸、丙酸浓度和乙酸/丙酸的变化情况。【结果】添加烟酸后,尿素-麻饼型日粮培养液中NH3-N和细菌N质量浓度和原虫数均高于豆粕型日粮,而豆粕型日粮又高于麻饼型日粮,差异显著性随培养时间而变化;尿素-麻饼型日粮NH3-N质量浓度在培养2h达最高,之后下降,在4h后趋于平稳,而细菌N质量浓度在培养0～12h有升高趋势,12～22h又降低,但差异均不显著(P0.05)。豆粕型日粮在培养2h内NH3-N质量浓度升高,之后下降,在培养4h达最低,4h后又缓慢升高;而细菌N质量浓度在0～8h升高,8～22h下降。麻饼型日粮在培养过程中,NH3-N和细菌N质量浓度差异均不显著(P0.05)。3种日粮培养液中原虫数均在培养后4h达最高值,之后有所下降。不同氮源日粮对总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸浓度及乙酸/丙酸的影响差异均不显著(P0.05)。【结论】添加烟酸后,尿素-麻饼型日粮NH3-N利用率较高,产生较多的细菌和原虫,饲喂效果优于其他2种日粮;麻饼型日粮饲喂效果最差。     

丙酸钙对湿玉米纤维保鲜效果、瘤胃液体外培养主要发酵指标及防腐保鲜效果影响

采用单因子试验设计,在玉米纤维饲料中添加0、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%和2.4%CP(以干物质为基础计算),即处理组K、C1、C2、C3、C4、C5和C6,进行体外瘤胃液培养发酵试验;在此基础上,将K、C1、C2、C3、C4和C5进行湿玉米纤维防腐保鲜试验。结果表明,在湿玉米纤维中添加0.4%~2.4%丙酸钙对体外培养瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸和氨态氮(NH3-N)浓度及p H无显著影响(P0.05),18~20℃室温条件下存放20~30 d,C4和C5组湿玉米纤维霉菌总数、p H、水分含量、NH3-N浓度均显著低于C1、C2和C3组(P0.05),霉菌数量稳定,感官上无霉变现象。综合体外培养瘤胃液发酵指标影响及防腐保鲜效果,确定CP可作为湿玉米纤维饲料防霉剂,建议在18~20℃条件下存放时间少于20 d添加量为1.2%,存放时间20~30 d添加量为1.6%。     

青蒿提取物对奶牛瘤胃体外发酵及甲烷生成的影响

【目的】旨在研究青蒿提取物对奶牛瘤胃体外发酵及甲烷生成的影响。【方法】选用4头体况相近、胎次相近的健康荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体。试验分为6个处理组,即在发酵底物中分别添加0.00%、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、2.00%的青蒿提取物,每个处理组6个重复,试验重复进行3个批次。于39℃的恒温恒湿培养箱中体外发酵24h,测定瘤胃常规发酵指标pH、氨态氮、挥发性脂肪酸、总产气量及甲烷生成。【结果】与对照组相比,添加青蒿提取物对奶牛瘤胃体外发酵液的pH、总挥发酸、乙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、产气量均无显著影响(P0.05)。当添加0.50%和0.75%的青蒿提取物时,氨态氮质量浓度、干物质消失率显著提高(P0.05),中性洗涤纤维含量显著降低(P0.05)。青蒿提取物显著降低乙酸/丙酸值,且0.50%组的乙酸/丙酸值最低(P0.01)。青蒿提取物可有效抑制甲烷生成,0.50%时抑制效果最佳(P0.01)。【结论】在体外条件下,添加青蒿提取物可以有效调节奶牛瘤胃发酵,且添加0.50%青蒿提取物对奶牛瘤胃发酵及甲烷调控最适宜。     

瓜实蝇生物学特性研究

通过对瓜实蝇B actrocera(Z eug od acus)cucurbitae在10、14、18、22、26、30、34和38℃下卵、幼虫和蛹的发育历期及成虫羽化、取食、交尾和产卵等生物学特性的研究表明,瓜实蝇的卵、幼虫和蛹的发育历期随温度的升高而缩短,其最适发育温度在26~30℃范围内。14℃下卵期3.5~4.0 d,平均(3.68±0.14)d,30℃下仅需1 d;幼虫于14℃下历期最长为(9.0~16.0)d,平均(11.73±1.21)d,30℃下最短为4.0~6.0 d,平均(4.83±0.24)d;蛹14℃下最长为24.0~33.0 d,平均(26.95±0.41)d,最短30℃下为6.0~7.0 d,平均(6.39±0.02)d。成虫白天活动,黄昏时交尾,羽化多集中于凌晨。卵产于瓜皮内,以幼虫蛀食瓜肉为害,老熟幼虫脱离瓜果进入土中化蛹。     

草酸青霉和棘孢木霉对青枯劳尔氏菌的生防效果

  目的  探究自主筛选获得的2株生防菌棘孢木霉Trichoderma asperellum QZ2与草酸青霉Penicillium oxalicum QZ8对青枯劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)的生防效果。  方法  以青枯菌作为靶标菌,通过平板培养法、生长曲线法测定2株生防菌及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用;通过土培试验、基于稀释涂布法测定生防菌在土壤中对青枯菌的抑制效果。  结果  平板对峙培养试验发现:棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌有显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达80.9%和45.9%;棘孢木霉QZ2与草酸青霉QZ8生防菌高温灭菌发酵液对平板培养青枯菌,同样呈显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达33.3%和34.8%。无菌滤膜处理的未高温灭菌2株生防菌发酵液的青枯菌液培养结果表明:其D(600)显著小于未添加生防菌发酵液的对照D(600)(P＜0.05),且棘孢青霉QZ8抑制效果好于草酸木霉QZ2。土壤培养结果显示:2株生防菌处理的土壤中青枯菌的活菌数量显著低于未添加生防菌的对照(P＜0.05)。  结论  棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌均有显著的抑制效果,可作为番茄Lycopersicon esculentum青枯病的潜在生防菌。图5表2参32     

加州新小绥螨对截形叶螨的捕食作用

为明确加州新小绥螨Neoseiulus californicus(McGregor)对截形叶螨Tetranychus truncate(Ehara)的捕食潜力,采用捕食者功能反应方程及参数研究加州新小绥螨对截形叶螨各螨态捕食作用。结果表明,加州新小绥螨对雌成螨、若螨、卵的选择性捕食系数分别为0.365、1.276和1.390。在不同温度条件下,加州新小绥螨对截形叶螨的功能反应均属于HollingⅡ型;对猎物卵和幼若螨的控制能力最强。在试验温度范围内,加州新小绥螨的捕食能力随温度升高呈先增后减趋势,28℃时最强,对截形叶螨雌成螨、若螨和卵的攻击系数(a)最大,分别为0.639、0.730和0.842;处理时间最短,分别为0.126、0.075和0.039d;最大日捕食量分别为7.943头、13.405头和25.575粒。加州新小绥螨的捕食作用存在较强的种内干扰反应,随着捕食者密度的增大,平均捕食量逐渐减少,捕食作用率也相应降低,捕食作用率与其自身密度的关系为E=0.423P-0.747。     

牡山羊草(Ae.Jevenalis)细胞质对普通小麦的效应研究

将牡山羊草（Ae.Jevenalis）细胞质导入普通小麦,研究其对普通小麦主要农艺性状的遗传效应。结果表明,牡山羊草细胞质对普通小麦开花习性具有优良的作用,能提高普通小麦育性;除使株高降低外,对其他农艺性状均无明显不良效应;能提高小麦的品质,并对白粉病有一定的抗性。     

东亚钳蝎对小菜蛾的捕食效应

在实验室条件下，研究东亚钳蝎对小菜蛾的捕食效应。结果表明，东亚钳蝎对小菜蛾3~4龄幼虫及成虫的捕食功能反应属于Holling 功能反应模型Ⅱ型，对幼虫和成虫的瞬间攻击力分别为0.661和0.687，最大捕食量则分别为36.36头和125头。东亚钳蝎有较强的种内干扰作用，随着捕食者密度的增大，捕食作用率相应降低。猎物和天敌相互干扰会降低东亚钳蝎对3~4龄小菜蛾幼虫的寻找效应，但对其捕食量影响不大。在小菜蛾幼虫和成虫的混合种群中东亚钳蝎偏嗜小菜蛾成虫。     

紫荆黄萎病病原菌研究

在紫荆树上发现1种紫荆新病害 紫荆黄萎病,病叶症状有2种类型：一种为灰绿色干枯型,主要表现为叶片从边缘开始失水萎蔫,逐渐向叶片中心扩展,后期整个叶片皱缩卷曲、质地较脆,呈现灰绿色焦枯状;另一种为黄色萎蔫型,前期叶片从边缘开始变黄萎蔫,逐渐向内部扩展,病健交界处有明显界限,后期叶片皱缩,颜色呈现淡黄色到淡橘黄色。发病枝条的维管束呈浅橘红色或褐色,病叶不脱落。依据Koch’s准则证明,分离物CC001是引起该病害的病原菌。对CC001菌株的rDNA ITS区段进行PCR扩增和测序,并结合形态学特征鉴定为大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）。寄主范围测定结果表明,该病菌还可以侵染马铃薯和棉花。该研究是国内关于紫荆黄萎病的首次报道。     

甘蓝型油菜与黑芥双倍体减数分裂的原位杂交分析

【目的】探明植物杂种后代减数分裂异常与花粉败育之间的关系。【方法】通过甘蓝型油菜与黑芥种间杂交和基因组加倍,获得芸薹属三基因组双倍体,采用基因组原位杂交方法,观察三基因组双倍体花粉母细胞的减数分裂规律。【结果】与单倍体相比,双倍体花粉育性得到一定恢复,但可育花粉的比例较低,只有10%~20%。基因组原位杂交结果显示,双倍体花粉母细胞减数分裂终变期染色体以形成同源二价体为主,但也有部分染色体形成四价体或六价体。四价体有3种形式:B基因组染色体形成的四价体、AC基因组染色体形成的四价体及B与AC基因组之间形成的异配四价体。减数分裂后期Ⅰ染色体均等分离的细胞占总数的70%左右,在第2次减数分裂期也观察到非正常分裂如非四分孢子、微核等现象。【结论】减数分裂过程中的染色体异常行为可能是导致花粉育性不高的重要原因;虽然不正常的减数分裂导致花粉育性下降,但双亲染色体的异源联会可为双亲遗传物质的交换提供条件。     

兰州百合和有斑百合的核型研究

【目的】研究兰州百合及有斑百合的染色体核型。【方法】利用染色体常规压片的方法,对兰州百合和有斑百合的染色体数目及核型进行了研究和分析。【结果】兰州百合的核型公式为2n=2x=24=2m+2sm+6st+14t,相对长度为6.35%～12.07%,核型不对称系数为83.25%,染色体相对差异较大。有斑百合的核型公式为2n=2x=24=4m+12st+8t,相对长度为6.11%～12.90%,核型不对称系数为80.11%。【结论】兰州百合的核型类型属于3A型,有斑百合的核型类型为3B型,以有斑百合核型的进化较高,可见不同居群的百合间核型存在差异。     

桑寄生对桂花和阴香营养代谢的影响

采集被桑寄生严重危害的桂花和阴香样品,以同一植株没有被桑寄生危害的枝条作为对照,分析叶片中的叶绿素、可溶性总糖和脯氨酸的含量。结果发现,桂花和阴香被桑寄生侵害后,叶片中的叶绿素及可溶性糖含量下降,光合作用受阻,脯氨酸含量有所上升。通过试验数据的对比分析,阐明桑寄生对桂花和阴香营养代谢的影响,并提出了园林树木保护的若干建议和措施。     

合欢皂苷颗粒剂对高原鼠兔的抗生育作用

【目的】研究合欢皂苷颗粒剂对高原鼠兔的抗生育作用,确定最佳用量,为高原鼠兔种群数量的控制提供参考。【方法】用主药量为135,270和540 mg/kg的合欢皂苷水溶液灌胃小鼠,进行抗小鼠生育力试验,确定效果后换算为高原鼠兔的相应剂量,制备成合欢皂苷质量分数分别为0.3%,0.6%和1.2%的颗粒剂,并进行摄食系数研究,筛选出抗生育效果与适口性均良好的剂量,研究该颗粒剂对高原鼠兔怀孕率及生殖器官临床剖检和病理学的影响。【结果】主药含量为540 mg/kg的合欢皂苷抗小鼠生育效果良好,对雄性小鼠的抗生育率可达63%,对雌性小鼠的抗生育率可达70%。通过换算,合欢皂苷质量分数为1.2%的颗粒剂对高原鼠兔的抗生育率达70%,摄食系数可达1.67。经剖检,可见雄性高原鼠兔输精管充血,睾丸肿大;雌性高原鼠兔出现子宫充血、胎儿吸收等现象。【结论】合欢皂苷对雌、雄高原鼠兔均具有良好的抗生育作用,其作用靶点主要为生殖器官。