“中国马铃薯晚疫病A_2交配型的研究”通过技术鉴定

１９９９年９月,河北农业大学张志铭教授主持的“中国马铃薯晚疫病Ａ２交配型的研究”,通过了省科委组织的成果鉴定。该成果首次证明我国马铃薯主产区（河北、内蒙、山西等）存在晚疫病菌Ａ２交配型;首次发现我国马铃薯晚疫病菌群体中有低频率自育型菌株,表明该菌可进行单性生殖;该研究首次揭示Ａ２交配型与ＤＮＡ多态性之间有一定相关性;明确了晚疫病菌及其卵孢子离体培养的适宜培养基等。该成果为制定马铃薯晚疫病防治策略和深入研究晚疫病菌的遗传变异提供了重要理论,此研究成果填补了国内空白,达国内领先水平。“中国马铃薯晚疫…     

四川马铃薯晚疫病菌交配型、生理小种、甲霜灵敏感性 及mtDNA单倍型组成分析

【目的】对马铃薯晚疫病菌群体特征进行系统分析,为马铃薯晚疫病的防控提供科学依据。【方法】对2008—2011年采集自四川的马铃薯晚疫病菌的交配型、甲霜灵敏感性、生理小种及mtDNA单倍型进行分析。【结果】四川马铃薯晚疫病菌以A2交配型为主,占测定菌株的62.5%,A1交配型和自育型菌株的发生频率分别为18.8%和18.4%,A1交配型菌株集中在九龙县和普格县。192个菌株中共测定出55个生理小种,其中生理小种1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11发生频率最高,99.48%的供试菌株含有多个毒力基因。甲霜灵敏感性测定发现四川马铃薯晚疫病菌群体包含抗性、中抗和敏感菌株,分别占测定菌株的63.0%、22.0%和15.0%,敏感菌株分布于普格县、道孚县和九龙县。检测到四川马铃薯晚疫病菌有Ⅰa和Ⅱa两种单倍型,分别占测定菌株的97.4%和2.6%,为第二次全球迁移后出现的“新”群体,Ⅰa单倍型马铃薯晚疫病菌广泛分布于四川各马铃薯产区,其中存在A1交配型、A2交配型、自育型和未知交配型菌株。【结论】四川马铃薯晚疫病菌群体组成日趋复杂,亟待发掘新抗源和培育水平抗病品种,以及合理布局已有抗病品种和利用马铃薯晚疫病预警系统,科学防控马铃薯晚疫病。     

云南省马铃薯晚疫病菌交配型分布及发生频率

1998－1999年，将云南省不同类型马铃薯主要种植区内12个马铃薯产区分离的大量晚疫病菌菌株与A1和A2交配型标准菌株进行了交配型测定。 结果表明：253个晚疫病菌株中，A1交配型有204株，仍为优势侵染病原，分布于所有马铃薯产区；A2交配型菌株41株，发生频率为16．2％，除昭通、沾益、嵩明、寻甸和大理外，其余7个产区均有分布。8个自育型菌株被检测到，对其形态特征及有性结构分别进行了描述。本文还讨论了A2交配型的扩散对云南省马铃薯生产造成的潜在威胁，并据此提出了对种薯调运的一些建议。     

马铃薯晚疫病菌（Phytophthora infestans）A2交配型的研究进展

近年来,关于马铃薯晚疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）Ａ２交配型的研究有很大进展。本文就马铃薯晚疫病菌Ａ２交配型的鉴定方法、在世界各国的分布、出现的原因、出现的后果以及卵孢子的生物学特性进行了综合评述,指出卵孢子作为新的初 侵染来源在该病害流行中起着很重要的作用。     

内蒙古马铃薯晚疫病菌交配型和生理小种研究

为了了解和探讨我国内蒙古马铃薯晚疫病菌的表现型多样性,对1997~1999年和2002~2003年采自内蒙古马铃薯主栽区的38个马铃薯晚疫病菌株进行交配型和生理小种研究。结果表明,所有马铃薯晚疫病菌株的交配型均为A1,A1交配型在被测菌株中占绝对优势;在38个内蒙古供试菌株中,共发现18个马铃薯晚疫病菌生理小种,其中以小种3a.3b.4.7.10,1.2.3a.3b.4.5.6.7.8.9.10.11和3a.3b.4.6.7.10发生频率较高,分别占被测菌株的21.05%,13.16%和10.53%,并且发现能克服全部12个抗病基因的马铃薯晚疫病菌株5株,占被测菌株的13.16%,但菌株中克服抗病基因R2的菌株比例很小,仅为15.8%。内蒙古马铃薯晚疫病菌株的生理小种与全世界的生理小种变化趋势一致,已越来越复杂化并出现了优势生理小种。     

河北省马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)A2交配型的分布

对 1996— 1997年采自河北省马铃薯主产区的 2 8个马铃薯晚疫病菌的菌株在白云豆 -V8蔬菜汁培养基上进行了交配型测定。结果发现 ,在 2 8个菌株中 ,18个菌株为A1交配型 ,占被测总菌株数的 6 4.3% ;10个菌株为A2交配型 ,占被测总菌株数的 35 .7% ,其中 9个菌株采自承德市围场县 ,1个菌株采自张家口市康保县。说明在河北省的 2个马铃薯主产区均存在A2交配型 ,且在同一块田中同时存在A1和A2交配型。同时还发现该病菌单位面积产生卵孢子的数量差异很大 ,为 10～ 2 30 0个·cm-2 。并对藏卵器、雄器、卵孢子的大小、颜色、形态等进行了描述     

甘肃马铃薯晚疫病病菌交配型及对甲霜灵的敏感性

检测了2007—2009年在甘肃省采集分离的马铃薯晚疫病菌的交配型及其对甲霜灵的敏感性。79株晚疫病菌进行交配型检测结果表明,69株为A1交配型,4株为A2交配型,6株为自育型;117株马铃薯晚疫病菌对甲霜灵敏感性检测结果为:60.68%的菌株对甲霜灵表现高抗,11.97%表现中抗,27.35%表现敏感。     

黑龙江省马铃薯晚疫病菌交配型、瑞毒霉敏感性及mtDNA单倍型分析

2012~2014年在黑龙江省各马铃薯主产区共分离了151株马铃薯晚疫病菌,并测定了晚疫病菌的交配型、瑞毒霉敏感性和mt DNA单倍型。交配型测定结果显示,分离的151株马铃薯晚疫病菌中,A1交配型为103株(68.2%),自育型为33株(21.9%),A2交配型为15株(9.9%)。这说明黑龙江省马铃薯晚疫病菌的群体结构发生了明显的变化。瑞毒霉测定结果显示,2012~2014年分离的151株菌株中敏感性菌株占3.3%,中抗菌株占6.6%,抗性菌株占90.1%,表明黑龙江省部分马铃薯主产区分离的晚疫病菌已对瑞毒霉产生抗药性。线粒体DNA单倍型的测定结果显示在黑龙江省部分马铃薯主产区共发现了3种线粒体DNA单倍型,分别为Ia,Ib和IIa。其中,IIa mt DNA单倍型的数量最多,发生频率为86.1%。这说明IIa mt DNA单倍型是黑龙江省部分马铃薯主产区的优势种群。     

马铃薯晚疫病菌交配型检测方法比较

晚疫病是云南省马铃薯第一大病害,近年在云南省种植区有逐年加重的趋势,从1998年发现晚疫病菌的2种交配型以来,有性生殖的风险也随之增加。文章以2010年来自云南省马铃薯主产区的86个晚疫病菌菌株为材料,以对峙培养检测法检测结果为准,比较分析了CAPs标记和A2特异性DNA片段扩增方法的准确性。研究证实了2种分子标记检测方法均可以准确检测出晚疫病菌A1和A2交配型,但不能区分A2和A1A2交配型。A2交配型占总菌株的82.56%,在云南省所有马铃薯主产区都存在,已成为云南省晚疫病菌群体中的优势交配类型。     

中国马铃薯晚疫病菌A2交配型的进一步研究

调查研究了中国马铃薯的主产省马铃薯晚疫病菌A2交配型的发生和分布情况。本试验在白云豆培养基上测试了1995－198年采自河北、内蒙、云南、四川、重庆和北京的142个菌株的交配型。结果表明，其中28个菌析为A2交配型，占被测菌株的19．7％。同时发现不同省份A2交配型的发生频率明显不同，河北、山西和内蒙的A2交配型菌株的比例明显高于云南、四川和重庆，并发现2个自育菌株，占测试菌株的1．4％。     

马铃薯晚疫病菌群体遗传结构研究进展

 本文较全面地综述了马铃薯晚疫病菌的交配型、生理小种及其对甲霜灵的敏感性等表现型群体遗传结构特征的研究进展，阐述了世界各国晚疫病菌交配型的分布、生理小种组成及病菌对瑞毒霉抗性菌株的出现频率。同时综述了几种分子标记，如mtDNA指纹、RFLP、RAPD、AFLP和SSR在研究晚疫病菌基因型及遗传多样性方面的应用及研究成果。并指出了中国今后对马铃薯晚疫病菌研究工作的重点。     

马铃薯晚疫病菌在内蒙古和甘肃的交配型分布及对几种杀菌剂的敏感性

1997-2001年在内蒙古自治区和甘肃省马铃薯主产区采集马铃薯晚疫病菌并进行了交配型和药剂敏感性测定。结果为：采自内蒙古的143株菌中有140株是典型A1交配型、3株是可自育的A1交配型；采自甘肃的41株菌中有40株是典型A1交配型、1株为可自育的A1交配型；二省都未发现A2交配型。表明内蒙古和甘肃马铃薯主产区的晚疫病菌以A1交配型占绝对优势。对甲霜灵（metalaxyl)的敏感性测定显示：内蒙古菌株中有50．8％表现高度抗性、42．5％表现中度抗性、只有6．7％表现敏感，说明内蒙古马铃薯主产区的晚疫病菌普遍对甲霜灵具有了抗性；甘肃的菌株中，26．8％表现高度抗性、29．3％表现中度抗性、43．9％表现敏感；同时发现甲霜灵可刺激某些技性菌株的生长。试验还测定了35株菌对烯酰吗啉(dimethomarph)和腈嘧菌脂(mzoxystrobin)的敏感性：其中对烯酞吗啉表现敏感的占94％、中度敏感的占6％；对腈嘧菌脂敏感的占71．4％，中度敏感的占28.6％；未发现对二种药剂高抗或不敏感菌株，且烯酰吗啉和腈嘧菌脂与甲霜灵均无交互抗性。     

马铃薯晚疫病病菌在贵州和云南的交配型分布与卵孢子生物学特性分析

贵州省与云南省是我国重要的马铃薯种植区,为了明确马铃薯晚疫病病菌在这2个省份的交配型分布情况和致病疫霉菌卵孢子的生物学特性,采用对峙培养的方法对2010—2012年采集自贵州省和云南省的马铃薯晚疫病病菌菌株进行了交配型测定,并采用MTT染色法和隔膜培养法研究马铃薯晚疫病病菌自育型菌株的卵孢子生物学特性。结果表明:在被测菌株中,自育型为优势菌株,比例高达91%,2个省间并没有显著性差异;贵州省和云南省2个群体的致病疫霉菌卵孢子平均活性率均随培养时间的增加而下降;同时自育型菌株更容易诱导A1交配型产生卵孢子。     

2013～2015年黑龙江省马铃薯晚疫病菌群体结构研究

从交配型、甲霜灵敏感性和生理小种组成上研究黑龙江省马铃薯主产区晚疫病菌群体结构.试验材料采自2013 ～2015年黑龙江省齐齐哈尔、绥化、哈尔滨和佳木斯地区马铃薯大田.交配型测定结果表明,在132株菌株中,A1交配型占总菌株68.18％,A2交配型占总菌株31.82％;甲霜灵敏感性测定结果显示,在127株菌株中,敏感性菌株、中抗菌株、高抗菌株分别占17.32％、4.72％、77.95％;在84个晚疫病菌株中,共鉴定出37个生理小种类型,生理小种类型趋于复杂,其中优势小种为1.3.4.7.9.10.研究可为黑龙江省马铃薯晚疫病有效防控提供理论依据.     

马铃薯晚疫病菌A2交配型与DNA多态性相关关系研究

利用RAPD方法初步研究了马铃薯疫病菌DNA多态性与A2交配型的关系，共用27个有多态性的引物对22个菌株进行了扩增，共扩增出275条有多态性的DNA谱带用于统计分析。聚类分析结果显示，阈值为8时，将供试的22个菌系划分为4个类群，10个A2交配型菌系中的8个均在第Ⅳ类群中，由此认为该病菌的DNA多态性与A2交配型有一定相关性。同时还发现各地的晚疫病菌系有不同程度的群体分化现象。     

内蒙古马铃薯晚疫病菌基因型多样性分析

为了解和探讨我国内蒙古马铃薯晚疫病菌的基因型多样性,对1997～1999年和2002～2003年采自内蒙古马铃薯主栽区的40个马铃薯晚疫病菌株进行了线粒体DNA单倍型和AFLP分析。结果表明,所有马铃薯晚疫病菌株的线粒体DNA单倍型均为Ⅱa型,说明Ⅱa型可能是目前内蒙古马铃薯晚疫病菌的主要类型,同时病菌群体结构为新的群体结构;所有供试的40个马铃薯晚疫病菌株可划分为17种AFLP基因型,平均每2个菌株为1个特有的基因型,17种基因型分布于3个组中,菌株的亲缘关系与病菌的地理来源、采集年份无相关性。     

马铃薯晚疫病菌对3种杀菌剂的抵抗性与交配型分化

对采自黑龙江省和吉林省的马铃薯晚疫病菌进行了交配型的测定。结果表明,来自吉林省龙井市和黑龙江省5个县市的67个菌株均为A1交配型,未发现A2交配型。为了筛选对晚疫病有效的杀菌剂,在室内测定了不同杀菌剂的抗药性。马铃薯晚疫病菌对杀菌剂的抗性的测定结果显示,对于瑞毒霉,5个菌株敏感,占8.8%;10个菌株中抗,占17.5%;42个菌株是抗性菌株,占73.7%。对于韩乐威没有菌株能在1.0μg·mL-1的浓度生长,只有1株菌株在0.5μg·mL-1上生长,表明韩乐威的最低抑制浓度是0.2～0.5μg·mL-1。对于烯酰吗啉,大多数菌株能在0.5μg·mL-1的浓度上生长,在1.0μg·mL-1上生长的有2个菌株,表明烯酰吗啉的最低抑制浓度是0.5～1.0μg·mL-1,并且3种杀菌剂没有产生交互抗性。     

中国发生马铃薯晚疫病菌（Phytopthora infestans）A_2交配型

北京，内蒙古、山西和云南省等省区的１０个菌株，在黑麦琼脂培养基和立马豆Ｖ—８琼脂培养基上进行交配型试验，发现其中３个菌株为Ａ２交配型，７个菌株为Ａ１交配型。Ａ２交配型菌株采自内蒙古自治区和山西省。对卵孢子、藏卵器和雄器的形态进行了描述。ｔｅ，ａ＊ｆｆｎ．ＷｈｅｔｈｅｒＡ，ｅｘｉｓｔｓｏｒｎｏｔｉｎＣｈｉｎａｈａｓｎｅｖｅｒｂｅｅｎｓｔｕｄｉｅｄｂｅｆｏｒｅ．Ｉｎ１９９５ｗｅｂｅｇａｎｔｈｅｉｌｌｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｎｄｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄＡ，ｉｎＣｈｉｎａ＇Ｔｈｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅｓｔｕｄｙｗｅｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｓｆｏｌｌｏｗ．ＴｈｅｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｉｓｔｏｆｉｎｄｏｕｔｂｙｓｕｒｖｅｙｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅＡ，ｍａｔｉｎｇｔｙｐｅｅｘｉｓｔｓｉｎＣｈｉｎａ，ａｎｄｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｉｍｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ｍｏｖｅｍｅｎｔ，ｒｅａｓｏｎｆｏｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅＡ，ｗｏｕｌｄｂｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｌａｔｅｒ．１Ｍａｔｅｒｉａｌｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｌ＇１ＣＯｌｌｅｃｔｉｏｎｏｆｓａｍｐ?     

新疆番茄晚疫病原菌交配型鉴定及其对甲霜灵敏感性测定

[目的]鉴定2011至2015年新疆阿克苏、疏勒、叶城等地的晚疫病原菌交配型并测定病原菌对甲霜灵敏感性,掌握P.infestans种群在新疆是否有有性生殖存在,为番茄晚疫病的防治药剂筛选和轮换,以及防治策略的制定提供科学依据.[方法]采集番茄的病害部位(病果、病叶和病茎),在燕麦培养基上对其进行组织分离保存,采用对峙培养法鉴定保存菌株交配型,采用含药平板法测定保存菌株敏感性.[结果]阿克苏市、疏勒县、叶城县和墨玉县温室采集样品分离保存的37个菌株均为A1交配型,无A2交配型和自育型菌株.37个番茄晚疫病菌菌株中,敏感菌占总数的0;,中抗菌株占35.14;,抗性菌株占64.86;.抗性菌株的抗性水平都在1.8 ×103倍以上.[结论]在自然条件下阿克苏市、墨玉县、叶城县和疏勒县等地番茄晚疫病菌没有有性生殖发生,番茄晚疫病菌对甲霜灵具有较高抗性.     

马铃薯和番茄晚疫病病菌全基因组DNA的RAPD多态性分析

 对采集自云南省元谋等9个县的35个马铃薯和番茄晚疫病菌株用RAPD的方法进行了分子指纹的研究。马铃薯晚疫病菌和番茄晚疫病菌全基因组DNA指纹研究结果表明，两类晚疫病菌有丰富的遗传多态性，在不同的相似水平上可以划分为许多不同的遗传组群。来自不同寄主的菌株间有一定的遗传差异，但马铃薯晚疫病菌和番茄晚疫病菌不能完全划分为两个不同的组群，而是交叉分布在不同的遗传组群中。