液相色谱荧光法测定稻谷及秸秆中阿维菌素残留量

[目的]运用柱前衍生-高效液相色谱荧光法,建立稻米及水稻秸秆中阿维菌素残留量的测定方法.[方法]稻米样品采用乙腈-乙酸乙酯（1：1,1：1）提取．水稻秸秆采用乙酸乙酯提取.提取液经三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生化后,高效液相色谱荧光法测定。[结果]结果表明,在0．001-0100mg／kg的添加浓度范围内,阿维菌素在稻米中的添加回收率为80．1％～94．5％,变异系数为3．5％-6．2％;在水稻秸秆中的回收率为77．8％～82．8％,变异系数为1．1％～4．9％、该方法在稻谷中的最小检测浓度为1．00μ/kg,在秸秆中的最小检测浓度为0．500μ/kg[结论]该方法的灵敏度与准确度符合农药残留分析要求.     

甲氨基阿维菌素苯甲酸盐衍生化条件优化及在土壤残留检测中的应用

为考察衍生化反应时间、温度、光照、衍生化试剂浓度以及衍生化产物稳定性等因素对衍生化反应的影响,建立测定土壤中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的柱前衍生化高效液相色谱荧光测定方法,采用三氟乙酸酐(TFAA)-N-甲基咪唑(NMIM)-乙腈(ACN)法进行柱前衍生化,研究衍生化因子的影响.土壤样品经甲醇提取,以高效液相色谱-荧光检测器进行甲维盐残留量分析结果表明:在20℃,避光条件下,先后加入等量NMIM-CAN(1+9)和TFAA-CAN(1 +9),衍生化效率达到最高,此时,对土壤中甲维盐的最低检测浓度为0.001 mg· L-1;在0.005～1 mg·kg-1时,甲维盐添加回收率为91.74％～102.68％,变异系数在2.55％～7.55％之间.在最大衍生率下,高效液相色谱-荧光检测法准确可靠,灵敏度和准确度均达到农药残留检测的要求.     

3种石斛兰以茎段为外植体的离体快繁技术1）

以肿节石斛（ Dendrobium pendulum）、尖刀唇石斛（ D．heterocarpum）和报春石斛（ D．primulinum）的无菌茎段为外植体,通过正交试验和单因子试验,研究不定芽诱导、生根和炼苗移栽等技术,筛选出各培养阶段的适宜培养基配方和培养条件,建立3种石斛兰离体快繁体系。结果表明：适合肿节石斛和报春石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS＋6-BA 0．5 mg· L-1＋NAA 0．1 mg· L-1＋椰乳100 mL· L-1,诱导率分别为93．75％和90．00％;适合尖刀唇石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS＋6-BA 0．25 mg· L-1＋NAA 0．1 mg· L-1＋椰乳100 mL· L-1,诱导率达到95．00％。适合肿节石斛和尖刀唇石斛生根的培养基为MS＋NAA 0．5 mg· L-1＋香蕉泥100 g· L-1,适合报春石斛生根的培养基为MS＋NAA 0．75 mg· L-1＋土豆泥100 g· L-1,生根诱导率高达100％。     

花叶艳山姜茎尖离体快繁技术

以花叶艳山姜（Alpinia zerumbet cv．vaniegata）的茎尖作为外植体,研究了花叶艳山姜的离体快繁技术。结果表明：花叶艳山姜茎尖接种在MS＋BA3．0mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1＋白糖30g·L-1的培养基上,30d后长出幼芽;丛生芽在MS＋6-BA2．0—2．5mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1＋白糖30g·L-1的培养基上,增殖效果最佳,增殖倍数达4．0,芽生长正常,且色泽浓绿;芽苗在1／2MS＋NAA1．0～1．5mg·L-1＋白糖30g·L-1的培养基上,生根效果较好,根系粗壮,生根率为93．0％;组培苗移栽在V河沙：V珍珠岩：V表土：1：1：1的混合基质中,成活率可达70．1％。     

柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法测定水中草铵膦

采用柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法建立了水中草铵膦的检测方法。水样在四硼酸钠缓冲盐体系中与氯甲酸-9-芴基甲酯进行衍生化反应,衍生产物在Waters AtlantisT3色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)上进行色谱分离。试验结果表明,该方法的检出限为0.000 370 mg·kg-1,定量限为0.001 23 mg·kg-1,在0.002 00~0.200 00 mg·L-1,草铵膦具有良好的线性关系(R2=0.999 9)。在0.003 00、0.300和30.0 mg·kg-1添加水平下,草铵膦的平均回收率为88.0%~103.0%,相对标准偏差(n=5)为0.73%~2.14%。该方法前处理简单,回收率和精密度均符合农药残留检测技术的要求,适合水中草铵膦的检测。     

高效液相色谱法测定发酵醪中的γ-氨基丁酸

建立了高效液相色谱测定发酵醪中γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，GABA）的方法。采用7％（V／V）乙酸水溶液对发酵醪进行预处理，以异硫氰酸苯酯为衍生剂，用反相C18柱为分离柱，柱温27℃，阶段洗脱，在254nm下进行检测。结果表明，发酵醪中的GABA获得了很好的分离，GABA在0～1．5mmol／L内线性相关性好，其线性方程为y=14106．5713x-258．2493（r=0．9993）。最小检测浓度为0．5μmol／L（R5D≤10％），组间样品测定相对误差为3．571％，加样平均回收率达到了99．038％。所建立的方法稳定、灵敏、重现性好，可用于测定发酵醪中的GABA。     

用基于邻苯二甲醛柱前衍生的高效液相色谱法测定稻米的Y-氨基丁酸含量

建立基于邻苯二甲醛（0-phthalaldehyde,OPA）柱前衍生的高效液相色谱法（highperformanceliquidchromato—graphy,HPLC）,测定了稻米中Y-氨基丁酸（Y-aminobutyricacid,GABA）的含量。结果显示：用三氯乙酸作为提取溶剂的效果最好;检测限为0．5mg／L,提取回收率为79．1％-101．5％;巨胚糙米的GABA含量显著高于常规胚糙米的,发芽后巨胚糙米的GABA积累量也高于常规胚糙米的。     

尤溪金柑离体再生体系优化及试管苗保存

以尤溪金柑试管苗为材料,采用双因素试验设计,筛选出适合尤溪金柑试管苗增殖和生根的培养基;采用L3（3^4）正交表设计,研究each、甘露醇和多效唑对尤溪金柑试管苗保存的影响．结果表明：芽增殖的最优培养基为：MS＋1．2mg·L-1 6-BA＋0．05mg·L-1NAA,增殖系数最高,达10．60;生根最优培养基为：MS＋0．3mg·L-1NAA十0．2mg·L-1 IBA。生根率最高达到了83．33％．保存12个月时处理C4（MS＋0．44g·L-1 CaCl2＋0g·L-1甘露醇＋1．0mg·L-1多效唑）中尤溪金柑试管苗的存活率均为最高,达97．8％．     

球根秋海棠金正日离体再生影响因素研究

为了建立球根秋海棠组培快繁体系，以球根秋海棠（BegoniatuberhybridaVoss）品种金正日的叶为外植体，研究了培养中各因素对叶基部的影响。结果表明：不同叶片部位外植体的诱导和分化能力不同，叶基部愈伤组织诱导和分化能力最强，诱导率和分化率分别为85．7％和85．4％；暗培养和接种前4℃低温预处理降低了外植体的诱导率和分化率，在金正日花离体培养中不宜采用；叶基部最适宜的诱导和分化培养基为MS＋2，4-D1．0mg·L-1＋BA2．0mg·L-1＋NAA0．5mg·L-1。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定水产饲料中的痕量砷

探讨氢化物发生-原子荧光光谱法测定水产饲料中痕量砷的方法,此法的检出限为0．01 mg·kg-1,相对标准偏差为2．9％,线性范围为0-100 μg·L-1,相关系数为0．999 9．回收率90．5％-104．0％。     

反相高效液相色谱法测定小鼠心肌中ATP、ADP和AMP含量及分析

建立同时测定小鼠心肌组织中ATP（三磷酸腺苷）、ADP（二磷酸腺苷）和AMP（一磷酸腺苷）含量的高效液相色谱方法。采用反相高效液相色谱模式,使用SepaxBio-C18（250ram×4．6mmID,μm,200A）色谱柱,以60mmoL·L^-1磷酸二氢钾、60mmoL·L^-1磷酸氢二钾组成的缓冲液（pH=6．68）为流动相等比洗脱,流速：O．6mL·min^-1紫外检测波长为259Nm,带宽为30nm。三种目标组分在10min内实现基线分离,平均加标回收率均在99％以上,线性范围为1-200mg·L^-1检出限分别为20、20、25ng。该法简便、准确,易于移植。     

茶枝柑皮中多糖组成成分的分析

[目的]研究测定茶枝柑皮中多糖的组成成分。[方法]以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）进行柱前衍生化,采用反相高效液相色谱法,测定茶枝柑皮多糖中单糖衍生物。色谱条件为：色谱柱为Phenomenex Luna C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为浓度0.05mol/L混合磷酸盐溶液-乙腈（80∶20,V/V,pH=7.1）;检测波长为245 nm。[结果]茶枝柑皮多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖组成,其摩尔比为0.08∶0.002∶0.05∶4.80∶1∶1.52∶0.11∶3.82。[结论]该方法具有操作简单、快速、重复性好、回收率高等特点,可用于柑橘果胶多糖中单糖组成及含量的测定。     

高效液相色谱-荧光检测法同时分析沼液中4种喹诺酮类抗生素

通过对沼液样品预处理过程优化、提取剂与洗脱剂的筛选和检测色谱条件优化,建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光检测法分析沼液中4种喹诺酮类抗生素(FQs)的检测方法。该方法选用Na2EDTA溶液作为提取剂,调节样品pH=4,漩涡混匀后经HLB固相萃取柱净化,选用6 m L甲醇为洗脱剂,浓缩后用高效液相色谱-荧光分析法(HPLC-FLD)检测,采用乙腈/0.01 mol·L~(-1)四丁基溴化铵作为流动相,外标法定量。4种FQs在0.002~5.0 mg·L~(-1)浓度范围内呈现良好线性关系,R~2均大于0.990。样品在0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg·L~(-1)6个添加水平下的平均回收率在80.4%~105.7%,相对标准偏差为1.0%~5.1%,方法的检出限为0.004~0.01 mg·L~(-1)。应用该方法对南京地区分别以鸡粪、猪粪、牛粪为发酵原料的3个大中型沼气工程的沼液样品进行分析,4种喹诺酮类抗生素均被检出,检测浓度为5~204μg·L~(-1),表明沼液中抗生素污染问题值得关注。     

HPLC法检测保健食品中大蒜素的含量

选取固体类、液体类、半固体类3类保健食品为研究对象,考察了提取溶剂、乙醇体积分数、提取温度、色谱柱对检测结果的影响,建立了高效液相色谱法测定保健食品中大蒜素主要功效成分二烯丙基三硫醚(diallyl trisulfide,DATS)、二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide,DADS)的检测方法。试样以无水乙醇超声提取,经C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离;流动相为V(乙腈)∶V(水)=68∶32;流速1.0 mL.min-1;紫外检测波长240 nm;检出限DATS 2.0 mg.kg-1,DADS 1.5 mg.kg-1。大蒜素浓度在6.26～6 262.24 mg.kg-1范围内呈良好线性关系(r=0.9999),分别对固体类、液体类、半固体类样品进行高低两水平添标回收试验,平均回收率DATS为97.6%～105.8%,DADS的回收率为95.3%～105.4%。重复性变异系数1.5%～2.7%,再现性变异系数3.8%～5.6%。同时将HPLC与GC分析相比较,结果无显著性差异。该方法简便快速,准确可靠,适用于多种保健食品中大蒜素含量的检测。     

基因工程菌发酵秸秆水解液产生物柴油

目前生物柴油的价格是石化柴油的15倍,寻求新的廉价易得的原料降低生物柴油的成本是必然趋势。作物秸秆是一种低廉普遍的废弃物,秸秆中含有纤维素,半纤维素等成分,水解成单糖后可以作为合成生物柴油所需的糖类来源。利用前期研究构建的基因工程菌Escherichia coli pET28a(+) PAW发酵秸秆(玉米秸秆和小麦秸秆)水解液得到乙醇,并在胞内将乙醇与外源添加的脂肪酸进行同步转化合成生物柴油的主要成分脂肪酸乙酯。HPLC分析表明玉米水解液中葡萄糖含量(1040 g·L-1)较高,小麦水解液中木糖含量(4056 g·L-1)较高。E. coli pET28a(+) PAW能够有效地以小麦和玉米两种秸秆水解液作为糖类替代物发酵生产生物柴油,小麦水解液培养基中的生物柴油含量(030 g·L-1)高于玉米水解液培养基中的含量(025 g·L-1),同时也高于现有报道。结果表明,以秸秆水解液作为原料,利用基因工程菌合成生物柴油是可行的,有助于降低生物柴油的原料成本。     

HPLC法测定木糖母液的组成

[目的]建立一种快速准确测定木糖母液组成的方法。[方法]采用HPLC法分析木糖母液中木糖的含量。[结果]色谱条件为流动相乙腈：水（70：30）,流速1.0ml/min,柱温20℃,进样量10μl。在上述色谱条件下,测得木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖保留时间分别为6．321、7．405、7．943和8．491min。木糖浓度在1～40mg/ml范围内,与峰面积呈良好的线性关系。精密吸取20mg/ml标样溶液,外标法计算,测得木糖母液中木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖的含量分别为38．10％、23．70％、13．80％、9．89％。结果显示,HPLC法可准确测定样品中糖类成分的含量,且重现性好,分析速度快,操作简便。[结论]该研究为生产过程中有效控制产品的质量提供了检测依据。     

高效液相色谱法测定鱼粉中组胺含量

建立了鱼粉中组胺的柱前衍生、液相色谱检测方法。样品经高氯酸溶液提取、丹磺酰氯衍生化反应后经高效液相色谱—紫外检测器检测,外标法定量。方法的检出限为50 mg/kg,浓度在2.0～80.0μg/mL范围内,线性良好（R2=0.999 3）,添加浓度在50、300、1 000 mg/kg时,回收率均大于70%,相对标准偏差（RSD）小于7%,结果表明该方法可适用于鱼粉中组胺的测定。     

高效液相色谱法测定鳗鲡各组织中的乙酰甲喹残留量

建立鳗鲡各组织中乙酰甲喹残留量的高效液相色谱测定方法,高效液相色谱检测条件为:采用SunFireTM C_(18)柱(4.6mm×150mm,3.5μm),柱温35℃;以甲醇∶水(40∶60,体积比)为流动相,流速为0.8mL·min~(-1);采用二极管阵列检测器,检测波长239nm。结果表明:在0.05~2.5μg·mL~(-1)范围内,乙酰甲喹具有良好的线性关系,含量与峰面积的相关系数达0.999以上;乙酰甲喹在鳗鲡肌肉、肾、肝和血浆中的检出限分别为3μg·kg~(-1)、15μg·kg~(-1)、15μg·kg~(-1)、15μg·L~(-1),鳗鲡各组织中乙酰甲喹回收率在76%~90%,相对标准偏差均小于10%(n=6)。本方法简便、快捷、灵敏度高,具有良好的重复性,满足鳗鲡各组织基质内乙酰甲喹残留量的快速定量分析的要求。     

HPLC法分析木糖结晶母液中的糖组分

[目的]用HPLC法测定木糖结晶液中糖组分。[方法]色谱柱为SCR-101N糖分析柱(7.9 mm×30 cm),柱温为40℃,流动相为水,流速为1.0 ml/min,检测器为视差检测器。[结果]以峰高定量,葡萄糖、木糖和阿拉伯糖在4~80 mg/ml范围内线性关系良好,R2分别为0.9993、0.9997和0.9995,平均回收率分别为100.4%(n=5,RSD=1.8%)、98.1%(n=5,RSD=0.8%)和99.4%(n=5,RSD=1.4%)。[结论]该方法测定木糖结晶液糖含量快速,结果准确、可靠。     

GA对康乃馨切花瓶插保鲜效果研究

以4个不同浓度（10 mg.L-1、50 mg.L-1、100 mg.L-1、200 mg.L-1）的GA保鲜液对香石竹切花进行了瓶插试验。结果表明：3%蔗糖＋200 mg.L-18-羟基喹啉＋200 mg.L-1柠檬酸＋10 mg.L-1GA配方能很好地维持切花水分平衡,使切花的瓶插寿命延长到13 d,比对照（蒸馏水）增加5d;最大花径是对照（蒸馏水）的1.22倍,比不加GA的增加1.12倍。