柱前衍生-气相色谱法测定柑橘中2,4－D残留量研究初报

为了解决柑橘出口中2,4-D残留监测问题,研究了快速测定柑橘中2,4-D残留方法。样品经酸性乙腈提取,用酸性硅藻土净化,经三甲基氢氧化硫(TMSH)衍生后,用带电子捕获检测器的气相色谱仪进行测定。试验结果表明:2,4-D的最低检出量为5×10-13g,最低检出浓度为4×10-4mg/kg,在0.001、0.01、0.1mg/kg三种添加水平下,添加回收率范围为77.16%～97.72%,变异系数范围为3.30%～8.65%。该分析方法快速、准确、灵敏,重现性好,适用于柑橘中2,4-D残留量的检测。     

气相色谱质谱联用分析有机肥料中的植物生长激素2,4-二氯苯氧乙酸

建立了气相色谱质谱联用法测定肥料中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的分析方法,主要分为样品的前处理过程和GC-MS分析过程。肥料样品中的2,4-D以酸性乙腈为提取剂用超声波辅助提取,甲酯化衍生处理后进行GC-MS分析。使用INERTCAP5MS/NP毛细管柱程序升温分离,选择质荷比为199的碎片离子定量分析。以3种市售有机肥为样品,2,4-D的加标回收率为63.5%—78.0%,进样溶液浓度在1—80μg/mL内线性良好;样品检出限为0.24μg/g,定量限0.8μg/g。该方法灵敏度高、方便快捷,可用于有机肥料中2,4-D的分析检测。     

气相色谱-质谱联用仪测定玉米子粒中2,4-D异辛酯的残留

为检测玉米子粒中2,4-D异辛酯残留量,样品用丙酮提取后,三氯甲烷萃取,经弗罗里硅土层析柱净化,用气相色谱质谱联用仪测定.结果表明:玉米子粒中2,4-D异辛酯添加平均回收率为88.7％～101.7％,变异系数为7.6％～9.0％,2,4-D异辛酯的最小检出量为2.0×10-11 g,玉米子粒中最低检出浓度为4.0×10-3mg/kg.     

2,4-D残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

本研究用标准抗原、纯化抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG,建立了间接抑制酶联免疫吸附法,测定了地下水、蔬菜和原粮等样品中的2,4-D含量。结果表明,间接抑制ELISA检测样品中的2,4-D含量变异系数小于15%,样品回收率误差在15%以内;工作曲线表明,在50～2000ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系,检测底限为50ng/ml,低于我国规定残留限量(200ng/ml)。因此,本研究建立的间接抑制ELISA法检测地下水、蔬菜和原粮中的2,4-D含量是可行的。     

2,4-D残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

本研究用标准抗原、纯化抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG,建立了间接抑制酶联免疫吸附法,测定了地下水、蔬菜和原粮等样品中的2,4-D含量.结果表明,间接抑制ELISA检测样品中的2,4-D含量变异系数小于15%,样品回收率误差在15%以内;工作曲线表明,在50～2000ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系,检测底限为50ng/ml,低于我国规定残留限量(200ng/m1).因此,本研究建立的间接抑制ELISA法检测地下水、蔬菜和原粮中的2,4-D含量是可行的.     

抗2,4 D单克隆抗体制备及免疫学特性鉴定

制备抗2,4-D高敏感性和高特异性的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用EDC法将BSA、OVA和2,4-D偶联制成免疫原和包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,用免疫原免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫,用间接ELISA和阻断ELISA选择高效价、高敏感性的小鼠进行细胞融合;应用杂交瘤细胞技术建立分泌抗2,4-D单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生法制备腹水,并对其效价、敏感性、亚型和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,融合后筛选出3株特异性高的杂交瘤细胞1F11、2A12、2G12,单抗亚型均为IgG1型,效价为1∶2 560～1∶5 120,对2,4-D的IC50分别为0.801、1.332、1.564μg/L,亲和常数(Ka)分别为2.174×1011、3.21×1010和4.36×1010 L/mg,与其他竞争物的交叉反应率均小于0.03%。说明成功获得高敏感性、高亲和力和高特异性的2,4-D mAb,为2,4-二氯苯氧乙酸残留免疫学快速检测方法的建立奠定基础。     

衍生后SPE_(C18)-GC-FID测定芦柑2,4-D残留

建立了永春芦柑(Citrus madurensis Lour)2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)残留量气相色谱(GC)测定方法。样品用乙酸乙酯超声波提取,减压蒸干,甲醇溶解,H2SO4催化衍生成甲酯,C18固相萃取净化除去H2SO4与杂质并富集10倍,HP-5柱气相色谱分离,火焰离子化检测器检测。结果表明,本方法测定2,4-D的线性范围为1.00-20.00 mg·kg-1,线性相关系数0.9987。合理用药时芦柑果皮2,4-D残留量为1.04 mg·kg-1,所测定的5批次芦柑2,4-D含量均在0-0.90 mg·kg-1之间,变异系数为4.8%-10.0%,2,4-D加标回收率为82%-89%。     

高效液相色谱法测定柑橘中2,4-二氯苯氧乙酸残留

建立了柑橘中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)残留的高效液相色谱(HPLC)测定方法.样品用水提取,提取液经二氯甲烷萃取、浓缩后,用丙酮溶解.丙酮溶液上硅胶固相萃取柱,用甲醇洗脱,洗脱液氮气吹干后用流动相溶解.HPLC条件:二极管矩阵检测器检测;波长:282 nm;色谱柱:ODS-3 C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水为8∶2(体积比),pH 3.0.在0.2～2.0 mg/kg添加范围内,回收率86.5%～96.6%,变异系数2.45%～8.35%,最低检测限为0.05 mg/kg.     

2,4-D对姬松茸菌丝体生长的影响

[目的]测试姬松茸在2,4-D最适浓度下的生理生化指标,为探讨其应用价值提供依据。[方法]在马铃薯液体培养基中,加入不同浓度的2,4-D,探讨激素对姬松茸菌丝体生长的影响。[结果]2,4-D对姬松茸菌丝体生长有一定的促进作用。在60~140 mg/L范围内,菌丝体的生长量随2,4-D浓度的增大而增大。当2,4-D浓度为60 mg/L时,菌丝体的增长率为35.41%,当2,4-D浓度为140 mg/L时,增长率最大,为55.65%。浓度在60~100 mg/L范围内的2,4-D提高了姬松茸菌丝体的可溶性糖含量,当2,4-D浓度为60 mg/L时,其可溶性糖含量最高,比对照提高了14.07%。[结论]140 mg/L 2,4-D最有利于姬松茸的生长,60 mg/L 2,4-D有利于提高其可溶性糖含量。     

臭氧化降解除草剂2,4-D的机理研究(I):中间产物分析

苯氧羧酸类除草剂2,4-D是一种常见的农业污染物,具有较高的环境危害。将水中的除草剂2,4-D作为控制对象,采用臭氧、臭氧/过氧化氢两个氧化体系在实验室内进行降解。为了探讨2,4-D降解机理,分别采用气相色谱-质谱联机分析方法、高效液相色谱法、离子色谱法等方法对2,4-D的降解过程中可能产生的中间产物进行了检测。结果表明,2,4-D的臭氧化降解中间产物有芳香族化合物和有机酸等,主要包括:2,4-二氯苯酚、(氯)对苯二酚(邻苯二酚)、(氯)苯醌、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、乙酸、草酸、甲酸等。并经过总有机碳分析可知,部分2,4-D经过臭氧、臭氧/过氧化氢体系氧化降解,在反应时间内能彻底降解为二氧化碳、水及某些无机物等终产物。对2,4-D降解中间产物的分析为臭氧化降解除草剂2,4-D降解路径的研究打下基础。     

5-吲哚甲基海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析

通过RP-HPLC同时检测酶水解反应前后底物5-吲哚甲基海因及产物D-氨甲酰-N-色氨酸的含量变化,不仅可以检测海因酶的活性,还能分析酶反应过程的转化效率。采用Merck公司的PurospherSTARRP-C18e色谱柱(4.6mm×250.0mm,5μm),以乙腈-20mmoL/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比25∶75)为流动相,磷酸调pH值为3.0,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为220nm,于10min内很好地实现了各组分的分离。采用外标法进行定量分析,D-色氨酸、5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的线性范围分别是0.10～1.00mg/mL(r=0.9991)、0.20～2.00mg/mL(r=0.9989)、0.20～2.00mg/mL(r=0.9989);酶反应体系中5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的加标回收率分别为99.3%～100.2%和98.0%～99.3%,精密度分别为0.51%～0.87%和0.43%～0.94%。试验结果表明该法快速简便、准确可靠。     

高效液相色谱法检测饼干中的三聚氰胺

建立由高效液相色谱法检测饼干中三聚氰胺的方法。样品用1%三氯乙酸和2.2%乙酸铅超声提取,色谱柱为Hypersil ODS 100 mm×4.6 mm,5μm,流动相为乙腈∶辛烷磺酸钠离子对试剂(pH 3)=15∶85(V/V),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为210 nm,柱温为40℃。三聚氰胺在0.2~10μg.mL-1范围内,有良好的线性关系。在空白样品中添加1、2和4μg.mL-1的标准工作液,平均回收率在80.5%~93.5%之间,相对标准偏差为7.7%(n=9)。     

新型玉米田除草剂甲基磺草酮在土壤中残留的高效液相色谱分析

以乙腈、水作为溶剂,进行超声提取,采用反相高效液相色谱法紫外检测器检测,建立了甲基磺草酮在土壤中残留的液相色谱分析方法,该方法标准溶液浓度和吸收峰面积之间有良好的线性关系,回归方程为y=35.596x-1.834 6,相关系数r2=0.999 9,平均回收率在88.3%～98.3%之间,变异系数在4.8%～6.4%之间,最小检出浓度为0.014 mg/kg。该方法的灵敏度、精密度和检测限都符合农药残留分析的要求,该方法操作简单,可用于土壤中甲基磺草酮残留量的测定。     

高效液相色谱法同时测定水稻及土壤中稻瘟灵和三环唑

采用高效液相色谱法,使用SunFireTMC18色谱柱和紫外检测器,样品用甲醇与丙酮的混合液提取,经弗罗里硅土净化后,以甲醇∶水( 80∶20,V/V)为流动相,流速为0.5 mL/min,在260 nm波长下对水稻及土壤中稻瘟灵与三环唑进行同时测定.结果表明,2种分析物得到了有效分离,稻瘟灵和三环唑的线性相关系数分别为0.999 8、0.9999,最低检出量分别为1.6、1.3 ng;水稻中稻瘟灵和三环唑平均回收率分别为84.78％～93.35％、86.75％～91.13％,相对标准偏差分别为2.15％～5.81％、2.46％～4.94％；土壤中稻瘟灵和三环唑平均回收率分别为89.65％～94.08％、88.81％～91.06％,相对标准偏差分别为2.19％～4.31％、3.08％～5.38％.该分析方法快速、简单、灵敏,具有良好的准确度和精密度,适用于常规分析检验.     

石墨炉原子吸收法测定蜂胶乙醇提取物中铅

本文采用浓硝酸与高氯酸混合液消解蜂胶乙醇提取物试样得清亮试液,并通过石墨炉原子吸收光谱仪测定其中的铅含量。工作曲线线性回归方程为A=0.006 9C-0.000 4,检出限为0.082 ug/L,标准品的相对标准偏差为2.1%~2.5%,实测样品回收率106.2%~108.4%。结果表明此方法准确度高,重现性好,操作简便快速,可以满足蜂胶产品铅含量检测。     

粉霉灵分析方法研究

采用长１ｍ，内径３ｍｍ，内装４．５％ＯＶ－１０１＋１．５％ＱＦ－１／ＧａｓＣｌｍｒｏｍＱＡＷＤＭＣＳ（６０～８０目）玻璃柱，以氢焰离子化检测器检测三唑酮含量，其标准偏差为０．０４７，变异系数为１．３３％，回收率在９８．３％～１０１．９％之间。多菌灵含量采用薄层—紫外法测定，检测波长２８１ｎｍ，多菌灵含量标准偏差为０．２７，变异系数０．８２％，回收率在９９．４％～１０１．３％之间。     

气相色谱法测定水果中咪鲜胺残留量的方法研究

采用丙酮震荡提取样品,在水解衍生的步骤中创造性地使用试管加入吡啶盐酸盐,于220℃的烘箱里水解1.5 h,经过处理后使用气相色谱ECD进行测定。结果表明:该方法的线性范围为0.005～0.500 ng,相关系数为0.999 9;对香蕉、绿橙、花牛苹果、青苹果、猕猴桃、砀山梨6种空白基质分别进行了0.01、0.10、1.00mg/kg 3个水平加标,其回收率为81.0%～106.4%,相对标准偏差(RSD,n=5)为0.3%～5.7%;该方法的最低检出限为0.01 mg/kg,并且烘箱水解的新方法操作简便,提高了检测效率。说明该方法具有快速、便捷、安全、清洁、成本低的特点,可满足大批量水果样品中咪鲜胺残留量的分析要求。     

利用荧光分析法测定玉米须中的总黄酮含量

根据黄酮类化合物能与Al3+形成稳定的荧光络合物,建立一种测定玉米须总黄酮的新方法。用60%乙醇溶液,在功率400W下超声处理20min,提取玉米须有效成分;以芦丁为标样,选择激发波长为λex=445nm,发射波长为λem=542nm,采用荧光分光光度法测定玉米须中总黄酮含量,并进行加标回收实验,以验证方法的准确性。方法检出限为1.08×10-9mol/L,线性范围在0～0.04mg/mL之间;线性回归方程:y=216.63x+137.93,相关系数r=0.999 7,平均回收率为98.3%～100.8%,相对标准偏差(RSD)为0.88%。这种方法操作简便、快速、准确,具有良好的分析应用前景。     

GC-ECD测定江永香姜中有机氯农药残留

[目的]建立气相色谱-电子捕获检测器检测(GC-ECD)江永香姜中有机氯农药残留的分析方法。[方法]样品经正己烷-丙酮(4∶1,V/V)超声提取,过滤、盐析、干燥,经弗洛里硅土柱净化,用丙酮+正己烷(1∶9,V/V)洗脱,GC-ECD检测。[结果]8种有机氯农药的检出限0.028~0.500μg/kg,加标回收率96.4%~100.2%,相对标准偏差RSD 1.3%~3.5%,符合国家标准要求。[结论]该方法具有操作简单、准确、快速、灵敏、净化效果好等特点,适合江永香姜中有机氯农药残留的测定。     

流动注射比色法测定饲料中的亚硝酸盐

采用流动注射分析法测定饲料中的亚硝酸盐。线性范围为20~1 000 μg/L,相关系数r＝0.999 9;检出限为2.68 μg/L;用50 μg/L亚硝酸钠标准溶液连续测定7次,其相对标准偏差为2.60%;实际样品的加标回收率为82.8%~106.8%。本方法操作简便、灵敏度较高、线性范围宽、精密度高,适用于饲料中亚硝酸盐的测定。